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樟树籽油甘油二酯的分离及抑菌活性

南昌大学学报（理科版） 2015年第5期39卷 485-491,497页

作者：郭夏丽张虹杜雨芊洪学斌刘星星罗丽萍南昌大学生命科学学院江西南昌330031 昆明学院云南昆明650214 南昌市食品化妆品监督所江西南昌330038

为了研究樟树籽油甘油二酯(DAG)的抑菌活性,以樟树籽油为原料,通过柱层析分离得到纯度为92.4%的DAG,采用滤纸片法、最小抑菌浓度(MIC)测定法、抑菌活力实验对4种细菌进行抑菌效果分析;通过菌液电导率、可溶性蛋白质与菌体核酸含量的测... 详细信息

为了研究樟树籽油甘油二酯(DAG)的抑菌活性,以樟树籽油为原料,通过柱层析分离得到纯度为92.4%的DAG,采用滤纸片法、最小抑菌浓度(MIC)测定法、抑菌活力实验对4种细菌进行抑菌效果分析;通过菌液电导率、可溶性蛋白质与菌体核酸含量的测定和扫描电镜观察细菌表面形态变化,探究其抑菌机理。结果表明:DAG对G^+细菌和G^-细菌均有较好的抑制效果,抑菌活力均在0.60以上,抑菌时效3~48h。对G^+细菌和G^-细菌的MIC分别是2.0和4.0mg·mL^(-1)。加入DAG的菌液电导率升高、菌液可溶性蛋白质和菌体核酸增多,细菌表面形态发生改变,说明对细菌的抑制作用主要是通过破坏细菌细胞膜,从而使其内含物泄漏,菌体形态发生改变,抑制细菌生长。

关键词：樟树籽油甘油二酯抑菌效果抑菌机理

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樟树籽油酯交换法制备生物柴油的研究

中国油脂 2014年第1期39卷 54-57页

作者：史亚亚陶武辉曾哲灵咸阳师范学院陕西咸阳712000 咸阳市土壤肥料工作站陕西咸阳712000 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室南昌330047

以浓H2SO4为催化剂,樟树籽油与甲醇预酯化生成酯化油;再以NaOH为催化剂,酯化油与甲醇进行酯交换制备生物柴油。在单因素试验的基础上,利用正交试验优化酯交换反应条件。结果表明:当甲醇与酯化油摩尔比为4.0∶1、催化剂与酯化油摩尔比为0... 详细信息

以浓H2SO4为催化剂,樟树籽油与甲醇预酯化生成酯化油;再以NaOH为催化剂,酯化油与甲醇进行酯交换制备生物柴油。在单因素试验的基础上,利用正交试验优化酯交换反应条件。结果表明:当甲醇与酯化油摩尔比为4.0∶1、催化剂与酯化油摩尔比为0.050∶1、反应时间为80 min、反应温度为55℃时,酯交换率最高,达94.38%。经气相色谱分析,樟树籽油生物柴油的脂肪酸甲酯组成为:癸酸甲酯53.67%,月桂酸甲酯42.92%,肉豆蔻酸甲酯0.44%,棕榈酸甲酯0.37%,油酸甲酯2.11%,亚油酸甲酯0.26%。

关键词：樟树籽油酯交换生物柴油

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樟树籽油甘油酯分离纯化及抑菌活性

樟树籽油甘油酯分离纯化及抑菌活性

作者：洪学斌南昌大学

学位级别：硕士

樟树(Cinnamomum camphora(L.)Presl)为樟科樟属中经济价值最大的树种之一,主要生长在长江以南地区。樟树籽含油量40%以上,富含C1012的中碳链脂肪酸,含量可达90%以上,具有预防和治疗动脉血栓,降血脂和抑菌等作用。利用樟树籽油(CSO)通... 详细信息

樟树(Cinnamomum camphora(L.)Presl)为樟科樟属中经济价值最大的树种之一,主要生长在长江以南地区。樟树籽含油量40%以上,富含C1012的中碳链脂肪酸,含量可达90%以上,具有预防和治疗动脉血栓,降血脂和抑菌等作用。利用樟树籽油(CSO)通过酶解法获得中碳链脂肪酸甘油酯(MCFA-GE),具有改善餐后血脂,抑制体重增加及抑菌作用。樟树籽取材方便,资源量巨大,目前多以废弃垃圾形式处理掉,利用率小,造成巨大的资源浪费。为此对樟树籽的中MCFA-GE进行系统性的研究尤为重要。本文以樟树籽为实验材料采用物理压榨法,脱臭脱色制得精炼CSO。通过Lipozyme RM IM固定化脂肪酶获得樟树籽油甘油酯(CS-GE),采用柱层析法进一步分离得到樟树籽油甘油三酯(CS-TAG)、樟树籽油甘油二酯(CS-DAG)和樟树籽油单甘酯(CS-MG)。为了进一步开发CS-TAG、CS-DAG和CS-MG的功能活性,通过滤纸片法,最小抑菌浓度(MIC),抑菌活力测定的研究CS-TAG、CS-DAG、CS-MG对大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、单增李斯特菌,金黄色葡萄球菌的抑菌活性。通过对菌液电导率、可溶性蛋白质和核酸含量的测定,探讨了其抑菌机理。论文还研究了异樟、油樟、芳樟、龙脑樟,脑樟5种化学型樟树叶精油的化学组成和抑菌活性。(1)对CSO酶解后的MCFA-GE进行TLC分析,CS-GE的各组分以迁移值CS-TAG(0.94)、CS-FFA(0.83)、CS-1,3-DAG(0.53)、CS-1,2-DAG(0.50),CS-MG(0.07)进行展开。进一步采用柱层析分离MCFA-GE,再对其进行TLC分析,可得到纯度92.7%、98.2%和97.8%的CS-TAG、CS-DAG、CS-MG。采用RP-HPLC-ELSD进一步进行定量分析,结果表明各组分纯度分别为95.1%、92.4和94.6%。(2)以柱层析分离得到的CS-TAG、CS-DAG和CS-MG为实验材料,采用滤纸片法观察抑菌敏感性,96孔平板法测定MIC,抑菌活力实验测定抑菌时效。结果表明,CS-TAG、CS-DAG和CS-MG对4种受试菌均有抑菌效果。CS-TAG、CS-DAG对4种受试菌的抑菌圈直径可达15.03 mm7.76 mm为高度敏感,CS-MG对于受试菌的抑菌圈直径可达22.21 mm5.37 mm为极度敏感。通过96孔板法和抑菌活力实验,测得CS-TAG、CS-DAG和CS-MG对G+的MIC均小于G-,对于4种受试菌的抑菌活力均在0.60以上,作用于同种细菌抑菌能力CS-TAG樟树叶精油,GC-MS分析5种化学型樟树精油化学组成。从异樟,油樟,芳樟,龙脑樟和脑樟叶精油共鉴定出71种已知化合物,脑樟中主要成分为(R)-樟脑(41.02%)、异樟中为反式橙花叔醇(22.52%)、油樟中桉叶脑(41.95%)、芳樟中β-芳樟醇(51.23%)、龙脑樟中龙脑(40.67%)。71种已知化合物中有5类化合物(醇类、酮类、醚类、烯类,这4类物质氧化物和衍生物)除异樟34.93%,脑樟、芳樟、油樟,龙脑樟中5类化合物含量均在81%以上,这5类化合物的总量依次是龙脑樟>油樟>脑樟>芳樟>>异樟。滤纸片法发现樟树叶精油随着浓度的提高,抑菌活性逐渐增大。芳樟、脑樟、油樟、异樟叶精油对G+的抑菌效果总体要比对G-抑菌效果好,其中油樟叶精油抑菌效果最好。通过以上研究表明,柱层析对MCFA-GE的分离效果良好,且各组分纯度高。分离得到的CS-TAG、CS-DAG和CS-MG对4种细菌均有抑菌活性,且对G+的抑菌能力强于G-,对于同种细菌抑菌能力CS-TAG樟树叶精油的化学组成和抑菌活性的研究,表明樟树叶精油的抑菌活性可能与其化学组成有一定的关联。

关键词：樟树籽油中碳链甘油三酯甘油二酯单甘酯抑菌活性抑菌机理化学型

樟树籽油合成富含中链脂肪酸甘油二酯的工艺研究

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食品工业科技 2013年第12期34卷 111-114页

作者：赵曼丽胡蒋宁朱雪梅李红艳刘小如李静邓泽元南昌大学食品科学与技术国家重点实验室江西南昌330047

以固定化脂肪酶Lipozyme RM IM为催化剂,研究无溶剂体系下樟树籽油和甘油合成中链脂肪酸甘油二酯的工艺。采用响应面分析法对甘油酶解反应的工艺条件进行优化,确定最佳条件为底物摩尔比(甘油∶樟树籽油)=1∶2.3,加酶量11.7wt%,反应温度7... 详细信息

以固定化脂肪酶Lipozyme RM IM为催化剂,研究无溶剂体系下樟树籽油和甘油合成中链脂肪酸甘油二酯的工艺。采用响应面分析法对甘油酶解反应的工艺条件进行优化,确定最佳条件为底物摩尔比(甘油∶樟树籽油)=1∶2.3,加酶量11.7wt%,反应温度72℃,反应时间15h。在此条件下得到产物油中甘油二酯含量为51.60%。气相色谱法测定合成产物的脂肪酸组成,产物油中癸酸(C10∶0)及月桂酸(C12∶0)含量分别为54.68%和39.79%,与樟树籽油脂肪酸组成基本一致。合成产物中DAG的中链脂肪酸含量虽有一定降低,但总量仍能达到75%左右。

关键词：甘油二酯樟树籽油酶法甘油解中链脂肪酸

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樟树籽油降血脂功能及甘油二酯制备工艺研究

樟树籽油降血脂功能及甘油二酯制备工艺研究

作者：吴学志南昌大学

学位级别：硕士

樟树(Cinnamomum camphora)为樟科樟属中经济价值最大的树种之一主要分布在长江以南地区。樟树籽含油量达40%以上,其中葵酸(C10)和月桂酸(C12)这两种中碳链脂肪酸占脂肪酸总量的90%以上。樟树籽来源方便,资源量巨大,但对其有效利用却很... 详细信息

樟树(Cinnamomum camphora)为樟科樟属中经济价值最大的树种之一主要分布在长江以南地区。樟树籽含油量达40%以上,其中葵酸(C10)和月桂酸(C12)这两种中碳链脂肪酸占脂肪酸总量的90%以上。樟树籽来源方便,资源量巨大,但对其有效利用却很少。为此,需要对樟树籽及其油脂进行系统性研究,同时,响应面法优化樟树籽油(camphor seed oil, CSO)酶法制备甘油二酯(diacylglycerol, DAG)的工艺研究,以有利于对其开发利用。本文以成熟樟树籽为实验材料,采用冰冻组织切片、尼罗红染色及激光扫描共聚焦显微镜观察樟树籽油体与含油量相关性,SD大鼠亚急性毒理性实验考查CSO食用安全性;CSO降血脂功能研究;采用响应面法优化CSO酶法制备DAG的工艺。研究结果如下： 1、樟树籽子叶贮藏细胞形状多为多边形,少数为椭圆形,细胞内的油体直径为(0.68±0.11)μ m,且分布均匀,油体部分为不规则形状或椭圆形,少部分为球形;通过热压榨法可得40%的毛油,经过过滤、脱酸、脱色等步骤可得精炼CSO。 2、亚急性毒理性实验中,30只雄性SD大鼠,随机分为3组,CSO组喂食CSO,大豆组喂食大豆油,对照组仅喂食基础饲料,喂食35d后大鼠无任何不适表现出现或者死亡,CSO组大鼠各项血液学指标(红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白等)与对照无显著差异。 3、降血脂功能研究中,30只雄性SD大鼠,随机分为3组,通过连续性喂食基础饲料中加胆固醇和胆酸制备高脂饲料造成的高血脂SD大鼠为模型,空白对照组仅喂食基础饲料,CSO组喂食CSO,大豆油组喂食大豆油,对比研究CSO对其血脂有关各项生化指标、肝脏脂肪含量、肝脏细胞结构及主动脉结构的影响,探讨了CSO的降血脂功能、预防和治疗脂肪肝及动脉粥样硬化的作用。结果显示：CSO能够降低大鼠体内TC的含量,增加血清中TG的含量。肝脏及主动脉病理组织学观察显示,大豆油组大鼠肝脏产生病变,其细胞大小不一,其内堆积许多脂类物质,而CSO组肝脏发生轻微病变,其细胞表面脂类物质较丰富,CSO能够延缓肝脏病变,且在主动脉切片观察中发现,CSO能够抑制脂类物质在主动脉内膜上的堆积。结果：CSO对实验性高血脂大鼠具有显著的降血脂及预防和脂肪肝疗效作用。 3、以CSO为原料,优化脂肪酶水解CSO制备DAG的工艺。通过丙酮和叔丁醇对脂肪酶进行预处理,对3种固定化脂肪酶(Lipozyme RM IM、Lipozyme TL IM、Novozym435)进行筛选。以反应产物DAG质量分数和甘油三酯(Triacylglycerol, TAG)质量分数为响应值,含水量(加酶量的30%-50%)、加酶量(油质量的8%-10%)和温度(55-75℃)作为变量,利用响应面法(RSM)优化CSO制备DAG工艺。结果表明,Lipozyme RM IM经过预处理后,重复使用次数可达到11次,RSM法优化CSO制备DAG的最优工艺条件：加酶量10%,含水量40%,温度65℃。在此优化条件下,DAG质量分数和TAG质量分数分别为50.38%和40.68%。此工艺为CSO工业化生产中链DAG油提供理论和试验依据。

关键词：樟树籽油组织切片中碳链甘油三酯亚急性毒理性降血脂功能响应面甘油二酯

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樟树籽油溶剂萃取脱酸工艺优化

食品科技 2012年第6期37卷 194-196,200页

作者：章挺江香梅付宇新江西省林业科学院江西省植物生物技术重点实验室南昌330032

为优化樟树籽油溶剂脱酸工艺,在单因素水平试验的基础上,选择萃取次数、液料比、温度为因素,以酸值为响应值,设计Box-Behnken中心组合试验,采用响应面法分析优化了樟树籽油溶剂脱酸参数。试验结果表明,萃取次数为3次、液料比为1:2.8、... 详细信息

为优化樟树籽油溶剂脱酸工艺,在单因素水平试验的基础上,选择萃取次数、液料比、温度为因素,以酸值为响应值,设计Box-Behnken中心组合试验,采用响应面法分析优化了樟树籽油溶剂脱酸参数。试验结果表明,萃取次数为3次、液料比为1:2.8、温度为34℃时,脱酸效果最佳,酸值由21.58KOHmg/g降为1.41KOHmg/g。

关键词：樟树籽油脱酸响应面分析

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樟树籽油纳米脂质体制备工艺及其性质的研究

樟树籽油纳米脂质体制备工艺及其性质的研究

作者：杨芳南昌大学

学位级别：硕士

樟树籽核仁中富含油脂,含90%以上的中链脂肪酸(medium chain fatty acid, MCFA),其中癸酸(C10：0)与月桂酸(C12：0)分别占53.27%和39.93%。由6-12个碳原子组成的脂肪酸碳链与甘油酯化后形成的甘油三酯为中链甘油三酯(medium-chain trigl... 详细信息

樟树籽核仁中富含油脂,含90%以上的中链脂肪酸(medium chain fatty acid, MCFA),其中癸酸(C10：0)与月桂酸(C12：0)分别占53.27%和39.93%。由6-12个碳原子组成的脂肪酸碳链与甘油酯化后形成的甘油三酯为中链甘油三酯(medium-chain triglyceride,MCT),因MCT具有非常独特的代谢特征,可作为有脂肪吸收障碍、脂肪泻病人的食物来源,同时对于手术后、感染、皮肤烧伤、艾滋病以及癌症、糖尿病等病人是一种良好的食物。但是樟树籽油(cinnamomum camphora seed oil, CCSO)适口性与水溶性较差,若作为食用油食用又存在烟点低,容易起泡的问题,并且MCT具有在肠道内水解迅速,产生大量脂肪酸易引起肠胃不适的特点,因此有必要对CCSO的利用展开研究。脂质体由于其双亲的特征,可同时作为水溶性药物和脂溶性药物的载体,将CCSO制备成脂质体可使其在肠液中缓慢释放,提高了生物利用度,增加其在血液中的存在时间。研究表明,CCSO质量与C10：0和C12：0峰面积具有良好的线性关系,C10：0的回归方程为y=1924x+48.984(R2=0.9995),C12:0的回归方程为y=1317.7x+27.723,(R2=0.9996);以此为基础,建立了以癸酸、月桂酸峰面积为指标的包封率测定方法：采用氯仿/甲醇(v/v,1：1)对樟树籽油脂质体破乳,用正己烷冷冻高速离心5min萃取游离CCSO与总的CCSO,根据峰面积与油脂质量关系计算包封率。经公式推导验证、回收率及精密度实验,证明利用峰面积计算包封率的方法简单可行,可消除仪器误差,特别是对没有紫外吸收的油脂而言是一种良好的包封率测定方法。确立了樟树籽油脂质体制备方法：采用薄膜分散法结合动态高压微射流技术(dynamic high pressure microfluidization,DHPM)制备樟树籽油纳米脂质体,分别以包封率和粒径为指标,考察了不同因素对樟树籽油脂质体包封率以及不同微射流压力对樟树籽油脂质体粒径的影响,在单因素基础上,采用响应面方法对樟树籽油脂质体制备工艺进行了优化,得到制备樟树籽油纳米脂质体的最佳工艺为：加入大豆卵磷脂的质量浓度为3g/100mL,CCSO与大豆卵磷脂质量比为3：1,大豆卵磷脂与胆固醇质量比为6.7：1,吐温80占大豆卵磷脂质量的24.2%,磷酸缓冲溶液pH为7.0、浓度为0.01mol/L,制备温度35℃,动态高压微射流120Mpa下处理两次,在此条件下得到的樟树籽油纳米脂质体包封率为(91.8±3.7)%,平均粒径达(107.1士8.6)nm。分别加入蔗糖、麦芽糖、甘露醇、海藻糖做为冻干保护剂制备樟树籽油脂质体冻干粉,以形态、重建效果、粒径以及包封率为指标,对加入冻干保护剂顺序、预冻温度、预冻时间、干燥时间、冷冻保护剂种类以及添加量对樟树籽油脂质体冻干粉制备的影响进行了研究,得出最优条件如下：在已制备的樟树籽油脂质体溶液中加入冻干保护剂(海藻糖与大豆卵磷脂质量比为2：1),在预冻温度-80℃下,预冻5h,干燥36h,在此条件下制备的樟树籽油脂质体冻干粉包封率为(87.2±4.4)%,平均粒径(138.1±4.8)nm,相变温度86.42℃,常温密封放置下有较好的稳定性。对樟树籽油脂质体和冻干粉重建后的脂质体用透射电镜进行形态研究,发现透射电镜下两者均为单室脂质体,形态规整,大小均匀,重建后樟树籽油脂质体壁膜较厚。以外观、包封率、粒径、pH、泄漏量、丙二醛含量为指标,对樟树籽油脂质体溶液进行60d放置考察实验,发现樟树籽油脂质体的物理化学性质稳定;对樟树籽油脂质体进行模拟胃肠液释放实验,发现樟树籽油脂质体在人工胃液中释放较为缓慢,在人工肠液中释放较快;缓释效果与胃肠液中酶种类有较大关系,肠液中的脂肪酶可加速樟树籽油脂质体的水解释放。

关键词：樟树籽油脂质体包封率气相色谱稳定性释放

基于NMR和Raman技术在樟树籽油甲酯化率分析中的应用研究

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基于NMR和Raman技术在樟树籽油甲酯化率分析中的应用研究

作者：王云鹏宁波大学

学位级别：硕士

脂肪酸甲酯作为一种新型绿色环保能源,甲酯化率测定是其制备工艺中的关键一环,但目前相关的测定方法均存在一定的限制。为提供更多手段用于甲酯化率的分析,本文以月桂酸甲酯和甘油三月桂酸酯为研究对象,采用NMR和Raman等技术建立定量分... 详细信息

脂肪酸甲酯作为一种新型绿色环保能源,甲酯化率测定是其制备工艺中的关键一环,但目前相关的测定方法均存在一定的限制。为提供更多手段用于甲酯化率的分析,本文以月桂酸甲酯和甘油三月桂酸酯为研究对象,采用NMR和Raman等技术建立定量分析混合标准品中甲酯含量的方法;将所建方法用于樟树籽油酯交换过程中甲酯化率的测定,以GC-MS法验证方法准确度,并对樟树籽油脂肪酸组成及其制备脂肪酸甲酯的优越性进行分析。主要研究内容如下:1)以CDCl为溶剂,四甲基硅烷为内标,采用NMR分析甘油三月桂酸酯和月桂酸甲酯,建立定量分析样品中月桂酸甲酯含量的qH-NMR法。C-NMR结果表明,二者仅在羰基区(δ=172～174)和甘油区(δ=62～70)有对应特征峰;随着样品中甲酯含量增加,δ=62.09和δ=68.88处甘油骨架碳原子峰强逐渐减弱,δ=51.41处甲基碳原子峰强逐渐增强,特征峰强度变化与样品中二者相对含量变化相一致。H-NMR结果表明,将月桂酸甲酯特征峰(δ=3.67)和甘油三月桂酸酯特征峰(δ=4.13～4.18和δ=4.28～4.34)作定量峰,以混合标准品中月桂酸甲酯含量(%)为X轴,定量峰相对峰面积为Y轴,得到甲氧基(-OCH)峰面积与月桂酸甲酯含量线性回归方程y=-0.97+0.61x(R=0.9991),甘油骨架亚甲基(-CH-CH-CH-)峰面积与月桂酸甲酯含量线性回归方程y=34.6-0.35x(R=0.9998);线性相关系数均良好,可用于脂肪酸甲酯的定量分析。2)采用FTIR和Raman分析甘油三月桂酸酯和月桂酸甲酯,建立定量分析样品中月桂酸甲酯含量的Raman模型。FTIR结果表明,二者红外吸收峰极其相似,尤其官能团区(4000～1300 cm),几乎无差异,指纹区(1300～670 cm)二者位置基本一致,但强度存在微弱差异。Raman结果表明,Raman对于结构变化的分析可能比FTIR更敏感,随着含量变化,Raman中出现一些可用于定量分析的特征区域,如423 cm处甲酯特有的-C=O的弯曲振动、1730～1750 cm处RC=OOR基团的-C=O伸缩振动、2800～2930 cm处的-C-H伸缩振动;结合5种光谱预处理法和RPLS建立了可准确预测月桂酸甲酯含量的PLS模型(R=0.9919,RMSECV=0.1143)。3)采用建立的qH-NMR法和Raman模型对樟树籽油样品进行甲酯化率测定,并分析其脂肪酸组成及制备甲酯的优越性。qH-NMR结果表明,-OCH和-CH-CH-CH-作定量峰的结果基本一致;甲酯化率随衍生时间延长而增加,0.1min时仅6.0%;10 min时达99.1%;qH-NMR与GC-MS无显著性差异(P>0.05),可有效用于甲酯化率分析,且前者具有前处理简单、分析时间短等优点。Raman结果表明,模型预测结果与qH-NMR、GC-MS相近;随着衍生进行,产物在光谱中呈与系列标准品相似的谱峰变化,甲酯化率不断提高,并于10 min时反应完全;Raman法可有效用于甲酯化率的分析,但相较其余两种方法准确度略低。脂肪酸组成及优越性分析显示,主要脂肪酸为癸酸(51.93%)、月桂酸(43.86%)、油酸(2.03%);其甲酯在密度、冷滤点、氧化稳定性、十六烷值等方面均优于以C16和C18等长链脂肪酸为主的油料,是极好的甲酯制备原料。

关键词：核磁共振拉曼光谱樟树籽油脂肪酸甲酯甘油三酯甲酯化率

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樟树籽油的提取工艺研究

粮食与食品工业 2015年第5期22卷 19-22页

作者：邱雅杰王成禹刘欢张宇胡小泓武昌工学院食品工程学院武汉430065

采用单因素试验和正交试验对超声波辅助提取樟树籽油的工艺条件进行优化研究。结果表明:用石油醚作溶剂进行提取,最佳工艺条件为:提取温度为40℃、提取时间为20 min、提取功率为70 W。在此条件下樟树籽油的提取率为44.0%。

关键词：樟树籽油溶剂选择超声波辅助提取正交试验