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表层蛋白对嗜酸乳杆菌NCFM生长代谢的影响

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食品与发酵工业 2022年第2期48卷 40-44页

作者：李佳珣张秋香王瑞赵建新江南大学食品学院江苏无锡214122

为评估表层蛋白对嗜酸乳杆菌自聚集、生长及代谢的影响,通过测定菌体自聚集率、菌体生长、GC-MS分析表层蛋白去除前后嗜酸乳杆菌胞内小分子代谢物的变化。结果表明,表层蛋白去除前后,嗜酸乳杆菌的胞内氨基酸类如组氨酸、酪氨酸、鸟氨酸... 详细信息

为评估表层蛋白对嗜酸乳杆菌自聚集、生长及代谢的影响,通过测定菌体自聚集率、菌体生长、GC-MS分析表层蛋白去除前后嗜酸乳杆菌胞内小分子代谢物的变化。结果表明,表层蛋白去除前后,嗜酸乳杆菌的胞内氨基酸类如组氨酸、酪氨酸、鸟氨酸,有机酸类如乳酸、苹果酸等代谢物具有显著差异,这些代谢物直接影响了表层蛋白相关的主要生化反应和关键代谢通路。经过代谢通路富集分析,主要影响了精氨酸和脯氨酸代谢、赖氨酸生物合成、精氨酸生物合成、氨基糖和核苷酸糖代谢、丙氨酸,天冬氨酸和谷氨酸代谢这5条代谢通路。总之,表层蛋白的剥离影响了氨基酸合成的代谢通路,氨基酸合成会竞争生长所需的能量,进而影响嗜酸乳杆菌的生长,该研究为进一步认识表层蛋白对嗜酸乳杆菌胞内小分子化合物代谢的影响提供了依据。

关键词：嗜酸乳杆菌表层蛋白代谢组学自聚集氨基酸合成

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乳酸菌表层蛋白功能研究进展

中国食品学报 2023年第6期23卷 411-419页

作者：王晓萌韩张鹏李佳乐付梦琪桑亚新高洁河北农业大学食品科技学院河北保定071000

乳酸菌作为益生菌的主要类群,不仅常用于食品发酵,还具有维持肠道稳态、调节宿主免疫、疾病的预防和治疗等功能。乳酸菌对肠道的黏附能力是其发挥功能的重要前提,也是其在肠道中定植的必要条件。表层蛋白(SLP)是乳酸菌表面主要的黏附因... 详细信息

乳酸菌作为益生菌的主要类群,不仅常用于食品发酵,还具有维持肠道稳态、调节宿主免疫、疾病的预防和治疗等功能。乳酸菌对肠道的黏附能力是其发挥功能的重要前提,也是其在肠道中定植的必要条件。表层蛋白(SLP)是乳酸菌表面主要的黏附因子,在菌相之间、菌相与环境之间的相互关系中发挥重要作用。本文概述乳酸菌SLP的结构特征及功能,重点论述SLP对菌体的支撑保护作用,在菌相识别中的黏附作用,抑制病原菌入侵作用,免疫调节方面的作用等,并阐述SLP在生物技术、纳米技术、疫苗研发中的应用,以期为乳酸菌SLP的进一步研究与开发利用提供参考。

关键词：乳酸菌表层蛋白识别和黏附疫苗研发

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乳酸菌表层蛋白对其耐消化应激及肠道黏附能力的影响

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中国乳品工业 2022年第5期50卷 4-9页

作者：陈大卫程月范佳明申菲菲任晨瑜陈春萌张瑞张臣臣关成冉郑英明顾瑞霞扬州大学江苏省乳品生物技术与安全控制重点实验室食品科学与工程学院江苏扬州225127 江苏宇航食品科技有限公司江苏东台224000 扬州市中医院江苏扬州225000

首先研究了乳酸菌的耐消化应激能力,然后研究了表层蛋白对菌株耐消化应激、黏附Caco-2细胞和抑制大肠杆菌黏附Caco-2细胞的影响。结果表明,依次经过唾液-胃液-肠液消化应激后,植物乳杆菌S7、W198和副干酪乳杆菌m111的存活率均大于3.53%... 详细信息

首先研究了乳酸菌的耐消化应激能力,然后研究了表层蛋白对菌株耐消化应激、黏附Caco-2细胞和抑制大肠杆菌黏附Caco-2细胞的影响。结果表明,依次经过唾液-胃液-肠液消化应激后,植物乳杆菌S7、W198和副干酪乳杆菌m111的存活率均大于3.53%,显著高于其他菌株(p表层蛋白;去除表层蛋白后,菌株S7、W198和m111的耐消化应激能力显著下降(p表层蛋白能增强其耐消化应激及黏附肠道的能力。

关键词：乳酸菌消化应激表层蛋白肠道黏附

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乳杆菌表层蛋白对肠上皮屏障的免疫保护作用

乳杆菌表层蛋白对肠上皮屏障的免疫保护作用

作者：张娇娇江南大学

学位级别：硕士

肠上皮屏障是一道物理性屏障,其结构的完整性和功能的正常发挥是抵抗外界物质入侵肠道以及维持肠道稳态的重要前提。大量文献显示,多种乳杆菌能够加强肠上皮屏障功能,保护肠上皮屏障免受外来损伤。表层蛋白(Surface layer protein,Slp)... 详细信息

肠上皮屏障是一道物理性屏障,其结构的完整性和功能的正常发挥是抵抗外界物质入侵肠道以及维持肠道稳态的重要前提。大量文献显示,多种乳杆菌能够加强肠上皮屏障功能,保护肠上皮屏障免受外来损伤。表层蛋白(Surface layer protein,Slp)作为乳杆菌表层物质的一种,研究指出部分菌株的Slp通过与病原菌竞争黏附位点,拮抗肠细胞凋亡和炎症反应,减轻病原菌诱导的肠上皮屏障损伤。本论文研究多种乳杆菌的Slp对TNF-α诱导的肠上皮屏障是否具有保护作用,以此揭示Slp对肠道功能的贡献,为进一步开发利用乳杆菌资源提供理论基础,也为肠道的健康干预提供新的思路。首先分离纯化获得了四株乳杆菌(*** NCFM,*** ATCC 4356,*** JCM 2009和*** CCFM 421)的Slp。通过Li Cl去除Slp后,黏附在Caco-2细胞上的四株乳杆菌数量显著降低(P蛋白质免疫印迹法和免疫荧光染色技术发现,四株乳杆菌的Slp能够显著回调细胞内紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的表达水平(P蛋白的表达和恢复紧密连接蛋白的分布,以及抑制肠道炎症,最终保护肠上皮屏障免受TNF-α的干扰。因此,本研究揭示出Slp对于肠上皮屏障的积极贡献,为后续进一步开发利用乳杆菌及Slp资源在胃肠道方面的应用提供理论基础。

关键词：肠上皮屏障表层蛋白乳杆菌紧密连接肠道炎症

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嗜酸乳杆菌表层蛋白提取方法的对比

食品工业科技 2021年第17期42卷 107-112页

作者：王艳阳边明明康媛媛章绍兵孟珺河南工业大学粮油食品学院河南郑州450001

本文通过电泳比较了5 mol/L LiCl法、4 mol/L盐酸胍法、8 mol/L尿素法和5 mol/L LiCl结合1 mol/L LiCl法提取嗜酸乳杆菌JCM 1132表层粗蛋白方法,并进一步研究了不同提取方法对乳杆菌表面特性的影响。结果表明:两种不同浓度的LiCl法是提... 详细信息

本文通过电泳比较了5 mol/L LiCl法、4 mol/L盐酸胍法、8 mol/L尿素法和5 mol/L LiCl结合1 mol/L LiCl法提取嗜酸乳杆菌JCM 1132表层粗蛋白方法,并进一步研究了不同提取方法对乳杆菌表面特性的影响。结果表明:两种不同浓度的LiCl法是提取表层蛋白的最适方法,该方法提取可得到纯度较高的表层蛋白。且用该方法剥离表层蛋白后,菌体的存活率最高,约为99.27%。不同方法去除表层蛋白后,菌体的表面电荷、表面疏水性、自聚集能力以及与沙门氏菌的共聚集能力均有所降低。表明表层蛋白对嗜酸乳杆菌表面性质起关键性作用,对乳杆菌益生功能的积极影响。

关键词：乳杆菌表层蛋白提取方法益生特性

乳杆菌表层蛋白理化性质与生物功能的研究进展

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河南工业大学学报（自然科学版） 2020年第4期41卷 129-138页

作者：孟珺王艳阳康媛媛章绍兵河南工业大学粮油食品学院河南郑州450001

许多乳杆菌外表面都包裹着一层蛋白质,即为表层蛋白,氯化锂、盐酸胍和尿素等高浓度的解离剂可从菌体表面剥离表层蛋白。乳杆菌表层蛋白等电点偏碱性,分子质量25~71 kDa,来源不同的蛋白结构组成差异较大。乳杆菌表层蛋白对其菌体的表面... 详细信息

许多乳杆菌外表面都包裹着一层蛋白质,即为表层蛋白,氯化锂、盐酸胍和尿素等高浓度的解离剂可从菌体表面剥离表层蛋白。乳杆菌表层蛋白等电点偏碱性,分子质量25~71 kDa,来源不同的蛋白结构组成差异较大。乳杆菌表层蛋白对其菌体的表面性质、胃肠道耐受性、黏附与定植都有积极的影响,还可协助乳杆菌抑制致病菌的感染,减少病原菌感染引起的细胞凋亡。乳杆菌表层蛋白独特的理化特性和良好的益生功能使其在食品和医药领域有着较为广泛的应用。着重综述了乳杆菌表层蛋白结构性质、制备方法、生物学功能、应用等方面的研究进展,为乳杆菌表层蛋白进一步的研究提供有价值的信息。

关键词：表层蛋白益生特性黏附抑菌

乳杆菌表层蛋白对菌株表面特性和益生特性的影响

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现代食品科技 2021年第11期37卷 43-49,33页

作者：李佳珣张秋香王瑞赵建新江南大学食品学院江苏无锡214122

为评估乳杆菌表层蛋白对菌株特性的影响,该研究通过序列比对筛选出含slp基因的乳杆菌,之后用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对其中部分菌的slp基因表达情况进行鉴定,并测定了表层蛋白去除前后菌体生长的吸光度值、自聚集... 详细信息

为评估乳杆菌表层蛋白对菌株特性的影响,该研究通过序列比对筛选出含slp基因的乳杆菌,之后用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对其中部分菌的slp基因表达情况进行鉴定,并测定了表层蛋白去除前后菌体生长的吸光度值、自聚集率、自成膜量、与致病菌共聚集率等特性。结果表明,4株嗜酸乳杆菌、30株卷曲乳杆菌、3株瑞士乳杆菌、30株鼠李糖乳杆菌都含有slp基因,经过SDS-PAGE鉴定了四种菌的部分菌株均表达表层蛋白,且其表层蛋白与菌株的特性密切相关。比如,在生长方面,瑞士乳杆菌去除表层蛋白前后生长能力差异很大,但氯化锂溶液和蛋白酶K两种溶液处理的吸光度值差距较小,差值仅在0.2以内;在与致病菌共聚集方面,大部分菌株在不同处理过程中没有较大差异,有趣的是,本身自聚能力弱的鼠李糖乳杆菌3-1表现出来的与致病菌极强的共聚能力,这株菌的在口腔方面的防龋潜力值得进一步探究。该研究丰富了人们对乳杆菌表层蛋白的了解,为深入探究表层蛋白的功能和应用奠定理论基础。

关键词：乳杆菌表层蛋白表面特性序列比对 slp基因

表层蛋白对乳杆菌益生性质的影响及其抑菌功能

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表层蛋白对乳杆菌益生性质的影响及其抑菌功能

作者：牛钰涵江南大学

学位级别：硕士

乳杆菌表层蛋白作为乳杆菌细胞壁外的一层特殊结构,已被证明具有保护菌体完整性和益生性质的作用。近年来,越来越多的研究开始关注表层蛋白自身的生物学功能如抗氧化作用、免疫功能以及抑菌作用等,但其对表层蛋白生物学功能的作用机制... 详细信息

乳杆菌表层蛋白作为乳杆菌细胞壁外的一层特殊结构,已被证明具有保护菌体完整性和益生性质的作用。近年来,越来越多的研究开始关注表层蛋白自身的生物学功能如抗氧化作用、免疫功能以及抑菌作用等,但其对表层蛋白生物学功能的作用机制以及研究范围仍旧比较有限。本论文从表层蛋白对乳杆菌益生性质的影响开始研究,进一步探究纯化后表层蛋白的黏附、抗炎以及抑菌功能,旨在发现乳杆菌表层蛋白更多的生物学功能,为其进一步的研究和应用提供理论依据。首先通过提取和电泳鉴定筛选出7株携带表层蛋白的乳杆菌,*** NCFM、*** ATCC 4356、*** CGMCC 1.1878、*** CCFM 421、*** JCM 1101、*** JCM 2009、*** CCFM Y40。使用LiCl去除7株乳杆菌的表层蛋白后,菌株自聚率、表面电荷吸附率、与沙门氏菌共聚率相较完整菌株均显著下降(P表层蛋白的存在对乳杆菌上述表面性质有积极作用。模拟胃肠道耐受实验发现,LiCl处理后的菌株在模拟胃肠环境中的存活率较完整菌株显著降低(P表层蛋白对胃肠道环境下的乳杆菌具有保护作用。乳杆菌黏附HT-29细胞实验结果显示,在去除表层蛋白之后,7种乳杆菌黏附率较之前均显著下降,其中*** NCFM下降最大,达到73.6%(P表层蛋白(*** NCFM、*** CGMCC1.1878、*** CCFM 421、*** 2009),发现4种表层蛋白在排除、竞争、替换三种处理方式下均可以显著抑制大肠杆菌和沙门氏菌对HT-29细胞的黏附(P表层蛋白可以通过与致病菌竞争黏附位点或掩盖干扰其识别黏附位点等方式拮抗致病菌对HT-29细胞的黏附。通过对大肠杆菌感染的HT-29细胞的细胞活力和IL-8分泌的测定,发现*** NCFM表层蛋白能够抑制大肠杆菌诱导的HT-29细胞的IL-8的上调,表明表层蛋白具有调节炎症和免疫反应的作用,能够调节炎症反应相关的IL-8促炎症因子。进一步探究表层蛋白对致病菌的抗菌作用,通过生长曲线和活菌计数证实*** NCFM和*** CGMCC 1.1878的表层蛋白具有提高Nisin抑制金黄色葡萄球菌抑菌活性的作用。Nisin单独或与表层蛋白联合处理时,可以观察到显著的膜透性变大以及A吸收物质的释放(P表层蛋白的联合抑菌机理涉及细胞内酶活力的降低,细胞膜损伤以及细胞膜电位的降低。未来可能通过二者的联合使用,解决Nisin的抗药性问题。综上,本论文研究发现携带表层蛋白对菌体表面性质、胃肠道耐受性以及黏附功能具有积极作用。纯化的表层蛋白能够拮抗致病菌黏附及调节致病菌诱导的细胞炎症反应。此外可与Nisin联合使用抑制***。研究显示了乳杆菌表层蛋白对菌株益生功能的贡献及自身抑菌和免疫调节方面的潜能,为其进一步的开发利用提供了基础数据。

关键词：表层蛋白乳杆菌表面性质黏附联合抑菌

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乳酸杆菌表层蛋白基因结构及功能研究进展

食品与生物技术学报 2015年第7期34卷 679-684页

作者：关晓燕罗卫东李丽丽董颖顾英辽宁省海洋水产科学研究院辽宁大连116023 大连海洋大学海洋与土木工程学院辽宁大连116023 辽宁医学院食品科学与工程学院辽宁锦州121000

乳酸杆菌对宿主的黏附性是其发挥益生作用的基础,而其黏附性与自身的表层蛋白密切相关。乳酸杆菌表层蛋白具有相对分子质量低、高等电点、结构和基因的多样性等特点。国内外学者对于乳酸杆菌的表层蛋白进行了深入的研究。作者从乳酸杆... 详细信息

乳酸杆菌对宿主的黏附性是其发挥益生作用的基础,而其黏附性与自身的表层蛋白密切相关。乳酸杆菌表层蛋白具有相对分子质量低、高等电点、结构和基因的多样性等特点。国内外学者对于乳酸杆菌的表层蛋白进行了深入的研究。作者从乳酸杆菌表层蛋白的基因结构和特性、和生物学功能几个方面对乳酸杆菌表层蛋白进行了综述。

关键词：乳酸杆菌表层蛋白结构域基因