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临床内科杂志 2019年第9期36卷 608-611页

作者：蒲俊曾静胡厚祥川北医学院附属医院心血管内科四川南充637000

目的探讨血清微小RNA(miR)-20a和自噬相关基因7(ATG7)对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后主要不良心血管事件(MACE)的预测价值。方法纳入行PCI的初发急性STEMI患者233例,根据院内预后情况分为MACE组64例和... 详细信息

目的探讨血清微小RNA(miR)-20a和自噬相关基因7(ATG7)对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后主要不良心血管事件(MACE)的预测价值。方法纳入行PCI的初发急性STEMI患者233例,根据院内预后情况分为MACE组64例和非MACE组169例。比较两组患者血清氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、Ⅲ型前胶原氨端肽(PⅢNP)、ATG7及miR-20a水平并分析其相关性。结果MACE组患者年龄、NT-proBNP、PⅢNP、ATG7水平及Killip心功能Ⅳ级患者比例均高于非MACE组,血清miR-20a水平低于非MACE组(P7水平升高是急性STEMI患者PCI后发生院内MACE的独立危险因素,而血清miR-20a水平升高是其独立保护因素(P相关分析结果显示,血清miR-20a与ATG7、NT-proBNP、PⅢNP均呈负相关(P7与NT-proBNP、PⅢNP均呈正相关(P7预测急性STEMI患者PCI后发生院内MACE的价值高于血清miR-20a和ATG7。结论血清miR-20a和ATG7均与NT-proBNP、PⅢNP密切相关,是急性STEMI患者PCI后发生院内MACE的独立预测因素。

关键词：微小RNA-20a 自噬相关基因7 急性ST段抬高型心肌梗死经皮冠状动脉介入治疗主要不良心血管事件

支气管哮喘患儿基质金属蛋白酶-16、自噬相关基因5和自噬相关基因7的表达及其与肺功能的相关性

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实用临床医药杂志 2022年第9期26卷 35-39页

作者：许花芬冯琼李春蕾海南省人民医院新生儿科海南海口570311

目的探讨支气管哮喘患儿外周血单个核细胞中基质金属蛋白酶-16(MMP-16)、自噬相关基因5(ATG5)、自噬相关基因7(ATG7)表达水平与肺功能的相关性。方法选取哮喘患儿80例作为观察组,健康体检儿童80例作为对照组。采集观察组和对照组患儿血... 详细信息

目的探讨支气管哮喘患儿外周血单个核细胞中基质金属蛋白酶-16(MMP-16)、自噬相关基因5(ATG5)、自噬相关基因7(ATG7)表达水平与肺功能的相关性。方法选取哮喘患儿80例作为观察组,健康体检儿童80例作为对照组。采集观察组和对照组患儿血样,检测第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV_(1)%)、用力肺活量(FVC)、最大呼气峰流速占预计值百分比(PEF%),计算第1秒用力呼气容积占用力肺活量的比率(FEV_(1)/FVC)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测外周血单个核细胞MMP-16 mRNA、ATG5 mRNA和ATG7 mRNA水平;采用Pearson法分析急性发作期哮喘患儿MMP-16 mRNA、ATG5 mRNA、ATG7 mRNA与肺功能指标的相关性。结果MMP-16 mRNA、ATG5 mRNA、ATG7 mRNA水平在对照组患儿和观察组临床缓解期患儿及急性发作期患儿中呈依次显著升高趋势(P7 mRNA、ATG5 mRNA与ATG7 mRNA均呈显著正相关(r=0.536、0.542、0.534,P7 mRNA均与FEV_(1)%、FEV_(1)/FVC、PEF%呈显著负相关(P7 mRNA水平较高,FEV_(1)%、FEV_(1)/FVC、PEF%较低,差异有统计学意义(P7 mRNA水平较高,且均与肺功能有密切联系。

关键词：儿童支气管哮喘基质金属蛋白酶-16 自噬相关基因5 自噬相关基因7 肺功能

诱导/封闭自噬相关基因7对肾癌786-0细胞自噬的调控作用研究

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现代泌尿外科杂志 2015年第4期20卷 264-268页

作者：王振龙邓骞王子明西安交通大学医学院第二附属医院泌尿外科陕西西安710004

目的探讨诱导/封闭Atg7对肾癌786-0细胞自噬的调控作用。方法构建上调Atg7的慢病毒载体plenti6.3-Atg7,下调Atg7的慢病毒载体sh-Atg-1lv、sh-Atg-2lv,空载对照慢病毒载体sh-scramb-con lv、plenti6.3-GFP,分别转染肾癌786-0细胞系,未转染的786-0细胞系为空白对照。RT-PCR和Western blot检测各组Atg7的表达,研究plenti6.3-Atg7激活Atg7效率和sh-Atg-1lv、sh-Atg-2lv抑制Atg7效率。Western blot检测上述各组细胞LCII/LC3I蛋白比值,研究上调及下调Atg7对肾癌786-0细胞自噬的激活及抑制作用。结果经过筛选,成功构建稳定上调Atg7的786-0/plenti6.3-Atg7xbx细胞系、稳定下调Atg7的786-0/sh-Atg-2lv细胞系、空载对照786-0/sh-scramb-con lv、786-0/plenti6.3-GFP细胞系。与空白对照组比较,Atg7上调组786-0细胞LCII/LC3I比值显著升高(3.31±0.12 vs.2.23±0.10 P自噬激活作用;Atg7下调组的786-0细胞LCII/LC3I比值显著降低(1.45±0.11 vs.2.23±0.10 P自噬抑制作用。结论上调Atg7对肾癌786-0细胞系具有自噬激活作用,下调Atg7对肾癌786-0细胞系具有自噬抑制作用。

关键词：自噬肾透明细胞癌自噬相关基因7 sh-A tg7 plenti6.3-A tg7

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第三军医大学学报 2011年第20期33卷 2162-2165页

作者：陈洁熊吉陈潇迪牟歌王军樊丽琳陈东风第三军医大学大坪医院野战外科研究所消化内科重庆400042

目的明确Calpain 2及自噬相关基因7(autophagy related gene 7,ATG7)在非酒精性脂肪性肝病中的表达变化及意义。方法应用高脂饮食喂养SD大鼠建立非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)在体模型,并按时相点分为4... 详细信息

目的明确Calpain 2及自噬相关基因7(autophagy related gene 7,ATG7)在非酒精性脂肪性肝病中的表达变化及意义。方法应用高脂饮食喂养SD大鼠建立非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)在体模型,并按时相点分为4、8、12周及16周组,同时设立正常饮食组为对照组,每组6只。检测各组大鼠血清ALT、AST、FFA水平,通过HE染色观察肝脏脂肪变情况,利用Real-time PCR及Western blot检测Calpain 2及ATG7的表达变化。结果①HE染色提示肝脏脂肪变程度随高脂饮食喂养时间的延长而加重。NAFLD大鼠模型各时相点血清ALT、AST、FFA水平均较对照组有不同程度的升高,在16周组时分别为(165.95±7.24)U/L、(249.52±4.20)U/L、(0.83±0.05)mmol/L,与对照组比较均有明显的升高(P7的mRNA相对表达量在4周组(0.82±0.02)即开始下降,在16周组(0.20±0.03)降至最低,与对照组比较降低显著(P7±1.20,P7的蛋白相对表达水平则随肝脏脂肪变性的进展明显下降,16周时降低最为明显(0.18±0.05,P自噬相关基因ATG7的表达,进而减弱了自噬对细胞的保护作用,导致肝细胞的损伤加重,自噬可能参与了NAFLD的发生。

关键词：非酒精性脂肪性肝病 Calpain2 自噬相关基因7 大鼠

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作者：闵鹤鸣锦州医科大学

学位级别：硕士

目的探讨局灶性脑缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤时,受损大脑皮质中bcl-2同源结构域蛋白(Beclin-1)、自噬相关基因7(autophagy related gene7,ATG7)、自噬相关基因3(autophagy related gene 3,ATG3)和自噬微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein1 light chain3,LC3)的表达规律。方法将健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)和模型组(IR组)。其中模型组又分为再灌注IR 0h、1h、3h、6h、12h、24h六个亚组。采用大脑中动脉栓塞术(middle cerebral artery occlusion,MCAO)制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型。动物苏醒后采用神经功能缺损评分,模型制备24 h后采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色及脑组织含水量方法鉴定模型是否成功。采用透射电镜观察各组大鼠大脑神经元的自噬情况,采用免疫组化和免疫印迹方法检测大脑皮质Beclin-1、ATG7、ATG3和LC3的表达规律。结果模型鉴定结果显示:sham组大鼠的行为学表现正常,神经功能未见缺损症状,脑组织未见水肿和梗死区;而IR各组大鼠均出现明显的神经功能缺损症状,IR 12h后脑组织含水量显著增高,IR 6h后可见明显的苍白梗死区,与sham组比较有显著差异。透射电镜sham组可见正常的神经元形态,而IR各组均可见到明显的神经元自噬。免疫组化染色后发现,sham组仅见少量Beclin-1阳性表达细胞,而IR不同时间点则呈现不同的表达增高趋势,其中IR 3h和IR 24h组呈现较明显的表达。免疫印迹检测Beclin-1也呈现一致的表达趋势。免疫组化和免疫印迹结果显示,ATG7、ATG3、LC3表达也呈现与Beclin-1一致的趋势。结论Beclin-1、ATG7、ATG3、LC3在调节脑缺血再灌注损伤中的细胞自噬具有重要的作用。

关键词：自噬 bcl-2同源结构域蛋白自噬相关基因7 自噬相关基因3 自噬微管相关蛋白轻链3 缺血再灌注

老年重症肺炎患者血清FOXO1、ATG7水平及与短期预后的关系

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国际检验医学杂志 2024年第10期45卷 1218-1222页

作者：生淑红许靖付佑辉上海市第七人民医院呼吸内科上海200137

目的探讨老年重症肺炎患者血清叉头状转录因子1(FOXO1)、自噬相关基因7(ATG7)的表达水平及与短期预后的关系。方法选取2020年8月至2022年8月该院收治的122例老年重症肺炎患者作为病例组,另选取同期来该院进行健康体检的105例老年人作... 详细信息

目的探讨老年重症肺炎患者血清叉头状转录因子1(FOXO1)、自噬相关基因7(ATG7)的表达水平及与短期预后的关系。方法选取2020年8月至2022年8月该院收治的122例老年重症肺炎患者作为病例组,另选取同期来该院进行健康体检的105例老年人作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清FOXO1、ATG7的表达水平。根据患者重症肺炎确诊后28 d内是否死亡分为存活组(n=91)和死亡组(n=31)。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清FOXO1、ATG7表达水平对老年重症肺炎短期死亡的预测价值,采用多因素Logistic回归分析探讨老年重症肺炎短期死亡的影响因素。结果病例组患者血清FOXO1、ATG7表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(t=7.615、29.591,P7表达水平均高于生存组,差异有统计学意义(t=10.029、9.399,P7预测老年重症肺炎患者短期死亡的曲线下面积(AUC)分别为0.733(95%CI:0.673~0.799)、0.826(95%CI:0.756~0.893),两者联合预测的AUC为0.908(95%CI:0.862~0.949)。FOXO1、ATG7与急性生理与慢性健康评估(APACHEⅡ)评分呈正相关(r=0.693、0.627,均P714~7.515),FOXO1≥10.67 ng/mL(OR=2.529,95%CI:1.232~5.193),ATG7≥16.35 pg/mL(OR=2.875,95%CI:1.414~5.845)是老年重症肺炎患者死亡的危险因素(P7表达水平明显升高,二者可用于评估老年重症肺炎患者的短期预后。

关键词：重症肺炎叉头状转录因子1 自噬相关基因7 预后老年

一例早发性卵巢功能不全患者的ATG7新发变异分析

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复旦学报（自然科学版） 2021年第4期60卷 437-443,450页

作者：尚凌月杨熙王颖忱张锋张晓金吴燕华复旦大学生命科学学院上海200433 复旦大学附属妇产科医院上海200011 上海市女性生殖内分泌相关疾病重点实验室上海200011 生物科学国家级实验教学示范中心(复旦大学) 上海200433

早发性卵巢功能不全(POI)是女性生育力下降的重要原因之一.POI的病因复杂多样,大部分患者的病因仍待研究,其中遗传因素占POI病因的20%~25%.本研究通过全外显子组测序(WES)技术在一位汉族散发POI患者中发现ATG7基因的杂合c.1372G>A(p.V45... 详细信息

早发性卵巢功能不全(POI)是女性生育力下降的重要原因之一.POI的病因复杂多样,大部分患者的病因仍待研究,其中遗传因素占POI病因的20%~25%.本研究通过全外显子组测序(WES)技术在一位汉族散发POI患者中发现ATG7基因的杂合c.1372G>A(p.V458M)变异.ATG7(autophagy-related 7)是自噬相关基因,已有研究揭示该基因缺陷可导致小鼠出现POI表型.本研究发现的ATG7 c.1372G>A变异在千人基因组、ExAC和gnomAD 3个数据库的东亚人群中均无报道,SIFT、PolyPhen-2、MutationTaster和CADD 4种不同算法均预测其有害.根据美国医学遗传学和基因组学会发布的序列变异解读标准与指南,该变异属于致病变异.家系回访揭示该变异属于新发变异,健康父母均为野生型纯合子.生物信息学预测发现该变异对应的氨基酸位于蛋白质的α螺旋区域,且在多物种中高度保守,提示该变异很可能诱导蛋白质功能受损.

关键词：早发性卵巢功能不全自噬相关基因7 自噬新发突变

ATG7沉默影响卵巢癌SKOV3细胞顺铂化疗敏感性的研究

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ATG7沉默影响卵巢癌SKOV3细胞顺铂化疗敏感性的研究

作者：张璇蚌埠医学院

学位级别：硕士

目的:研究小干扰RNA(siRNA)诱导的自噬相关基因7(ATG7)沉默对卵巢癌SKOV3细胞顺铂(DDP)化疗敏感性的影响。方法:***法选取顺铂作用于卵巢癌SKOV3细胞系的条件。2.活性氧(ROS)检测试剂盒检测应用不同浓度顺铂时卵巢癌SKOV3细胞系产生的... 详细信息

目的:研究小干扰RNA(siRNA)诱导的自噬相关基因7(ATG7)沉默对卵巢癌SKOV3细胞顺铂(DDP)化疗敏感性的影响。方法:***法选取顺铂作用于卵巢癌SKOV3细胞系的条件。2.活性氧(ROS)检测试剂盒检测应用不同浓度顺铂时卵巢癌SKOV3细胞系产生的活性氧水平。*** blot检测应用不同浓度顺铂时卵巢癌SKOV3细胞系自噬相关蛋白Beclin-1、P62、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和ATG7的表达水平。4.应用siRNA技术使卵巢癌SKOV3细胞系中ATG7基因沉默,Western blot检测siRNA对卵巢癌SKOV3细胞系中ATG7基因的干扰效果。***法检测siRNA-ATG7干扰前后顺铂对卵巢癌SKOV3细胞系存活率的影响。*** V-FITC/PI双染法检测siRNA-ATG7干扰前后顺铂对卵巢癌SKOV3细胞系凋亡率的影响。7.线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测siRNA-ATG7干扰前后顺铂对卵巢癌SKOV3细胞系早期凋亡的影响。8.应用倒置显微镜观察siRNA-ATG7干扰前后顺铂诱导的卵巢癌SKOV3细胞系细胞形态的变化。结果:***结果示,不同浓度顺铂(2,4,7,9,10,20,40,60μg·mL)对卵巢癌SKOV3细胞系的增殖抑制作用具有浓度和时间依赖性,顺铂浓度为4μg·mL作用细胞24h时,细胞存活率为52.71%±0.03。2.活性氧(ROS)检测结果示,应用不同浓度顺铂(0,2,4,8μg·mL)时卵巢癌SKOV3细胞系产生的活性氧增多。*** blot检测结果示,应用不同浓度顺铂(0,2,4,8μg·mL)时卵巢癌SKOV3细胞系自噬相关蛋白Beclin-1,ATG7表达水平增强,P62表达水平降低,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值增加。*** blot检测结果示,siRNA对卵巢癌SKOV3细胞系中ATG7基因的干扰效果明显。***法检测结果示,较siRNA-ATG7干扰前,干扰后顺铂诱导的卵巢癌SKOV3细胞系存活率明显降低至41.7%±0.01,明显低于阴性对照组的细胞存活率(54.0%±0.01)(P7干扰前,干扰后顺铂诱导的卵巢癌SKOV3细胞系凋亡率明显增加。7.线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测结果示,较siRNA-ATG7干扰前,干扰后顺铂诱导的卵巢癌SKOV3细胞系早期凋亡率明显增加。8.倒置显微镜观察结果示,较siRNA-ATG7干扰前,干扰后顺铂诱导的卵巢癌SKOV3细胞系中细胞密度显着降低,细胞间间隙扩大,悬浮细胞数量显着增加,细胞质体积减少,细胞逐渐缩小、变圆并失去其正常形态,边界模糊。结论:1.自噬可能与卵巢癌SKOV3细胞的顺铂化疗耐药性有关。2.通过沉默自噬相关基因ATG7可以增强卵巢癌SKOV3细胞对顺铂化疗的敏感性。

关键词：卵巢癌顺铂 RNA干扰自噬自噬相关基因7

自噬指标ATG7、Beclin1与非酒精性脂肪性肝病的相关性研究

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自噬指标ATG7、Beclin1与非酒精性脂肪性肝病的相关性研究

作者：张璞河北医科大学

学位级别：硕士

目的:非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种以肝细胞脂肪变性及脂质沉积为主要病理特征,但除外过量饮酒史及其他损肝因素的临床综合征。已有很多研究表明代谢应激、炎症、内质网应激以及自噬等参与NAFLD... 详细信息

目的:非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种以肝细胞脂肪变性及脂质沉积为主要病理特征,但除外过量饮酒史及其他损肝因素的临床综合征。已有很多研究表明代谢应激、炎症、内质网应激以及自噬等参与NAFLD的发生发展过程。自噬(autophagy)是一种依赖溶酶体途径对细胞内的蛋白和细胞器进行降解的过程,这有利于维持细胞内稳态,目前很多研究表明自噬功能与多种疾病密切相关,包括糖尿病、NAFLD、心血管疾病以及癌症等。而最近的研究表明自噬与脂代谢有关,自噬可能参与NAFLD的发生发展,但自噬是一把双刃剑,目前的研究表明自噬与NAFLD的关系仍存在争议。因此本研究通过测定人血清中自噬指标自噬相关基因7(autophagy related gene 7,ATG7)、Beclin1的水平,从而在临床层面探讨自噬与非酒精性脂肪性肝病的相关性。方法:选取2015年1月-2015年4月在河北省人民医院体检中心体检的受试者176人。所有实验对象均签署知情同意书后,行口服75g葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT),并留取血液样本4ml,经3000转/分离心10分钟后分离血清,应用全自动生化分析仪检测血糖、肝功、血脂等生化指标,应用电化学发光法测定血清胰岛素、甲状腺相关激素。应用稳态模型评估胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMR-IR),计算公式为:HOMA-IR=空腹血糖(FPG,mmol/)×空腹胰岛素水平(FIns,mIU/l)/22.5。根据2010年中华医学会肝病学分会《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南》的诊断标准,将受试者分为非酒精性脂肪性肝病组和对照组。采用SPSS21.0软件进行数据分析,P值相关指标结果显示,非酒精性脂肪性肝病组的甘油三酯(triglyceride,tg)高于对照组(p=0.003);而非酒精性脂肪性肝病组的高密度脂蛋白(low-densitylipoproteincholesterol,ldl-c)及载脂蛋白a1(apolipoproteina1,apoa1)均低于对照组(p相关指标结果显示,与对照组相比,非酒精性脂肪性肝病组空腹胰岛素(fastinginsulin,fins)及餐后2小时胰岛素(2hpostprandialinsulin,2hins)均升高(p=0.001,p=0.017);非酒精性脂肪性肝病组与对照组相比,homa-ir增加(p=0.001)。比较两组甲状腺功能相关指标结果显示,非酒精性脂肪性肝病组血清tt3(totaltriiodothyronine,tt3)水平及tt4(totalthyroxine,tt4)水平均高于对照组,非酒精性脂肪性肝病组tsh水平低于对照组,但差异均无统计学意义(p=0.097,p=0.693,p=0.433)。2非酒精性脂肪性肝病组与对照组血清自噬指标atg7、beclin1的比较比较非酒精性脂肪性肝病组和对照组血清中自噬指标atg7、beclin1有无差异。分析结果显示,非酒精性脂肪性肝病组atg7水平高于对照组,差异有统计学意义(p=0.029);而非酒精性脂肪性肝病组血清beclin1水平高于对照组,但差异无统计学意义(p=0.710)。3血清atg7水平和各指标的关系应用spearman线性相关对血清atg7与年龄、whr、bmi以及血糖、血脂、胰岛素等各指标的相关性进行分析。结果提示本研究人群中血清atg7水平与bmi、ldl-c、fins及homr-ir呈正相关,而与其他指标没有相关性。4血清beclin1水平和各指标的关系用上述同样方法即spearman线性相关分析血清beclin1水平与各指标的相关性,结果发现纳入人群血清beclin1水平与bmi、tg呈正相关,而与homr-ir等其他指标没有相关性5各项指标与非酒精性脂肪性肝病之间的相关性应用logistic回归分析,以是否发生非酒精性脂肪性肝病作为应变量,观察血清Atg

关键词：非酒精性脂肪性肝病自噬脂代谢自噬相关基因7 Beclin1