硒抑制长链非编码RNA HOXB-AS1表达调控胃癌增殖的作用及其机制

作     者：樊斌 孙率真 张家耀 张碧涛 姜毅楠 李炫飞 孙建华 Fan Bin;Sun Shuaizhen;Zhang Jiayao;Zhang Bitao;Jiang Yinan;Li Xuanfei;Sun Jianhua

作者机构：恩施土家族苗族自治州中心医院肝胆外科445000 武汉大学中南医院胃肠外科武汉市腹膜癌临床医学研究中心湖北省肿瘤医学临床研究中心肿瘤生物学行为湖北省重点实验室430071 恩施土家族苗族自治州中心医院胃肠外科445000 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2022年第39卷第11期

页      面：2133-2136页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(82070302、1902018) 湖北省卫生健康委员会面上项目(WJ2021M167) 武汉大学中南医院科技创新培育基金资助项目(CXPY2022055) 恩施州第二批农业与社会发展科技指导性计划项目 

主　　题：硒 HOXB-AS1 胃癌 蛋白激酶B/雷帕霉素的哺乳动物靶标蛋白通道 

摘      要：目的探讨硒抑制长链非编码RNA HOXB cluster antisense RNA1(HOXB-AS1)表达调控胃癌增殖的作用及其机制。方法对人胃癌HGC-27、SNU-1,KATOⅢ细胞和人胃黏膜上皮细胞使用实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内HOXB-AS1基因表达水平;根据亚硒酸钠添加的浓度将高表达HOXB-AS1基因的细胞分为空白组、5μmol/L组、10μmol/L组、15μmol/L组、20μmol/L组、25μmol/L组、30μmol/L组,分别培养24、48、72 h后采用细胞计数试剂(CCK-8)检测各组细胞活力,筛选亚硒酸钠的最佳作用浓度;用30μmol/L亚硒酸钠干预人胃癌HGC-27细胞,采用RT-qPCR检测细胞内HOXB-AS1基因表达水平,采用CCK-8检测细胞活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡比例变化,运用蛋白质印迹法(Western blot)法检测蛋白激酶B(Akt)及雷帕霉素的哺乳动物靶标蛋白(mTOR)的表达水平。组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果RT-PCR检测结果表明,与其他细胞株比较,人胃癌HGC-27细胞HOXB-AS1基因的表达水平最高(5.37±0.14,F=386.913,P0.05);CCK-8结果显示30μmol/L亚硒酸钠组的平均细胞抑制率都显著高于其他5组(F24 h=178.105,F48 h=1093.759,F72 h=473.833,P0.05);RT-PCR检测结果表明,亚硒酸钠干预后的HGC-27人胃癌细胞的HOXB-AS1表达水平(0.11±0.01)显著低于对照组(t=43.895,P0.05),而细胞凋亡率[(36.36±0.46)%]则显著高于对照组(t=-26.737,P0.05);Western blot结果显示亚硒酸钠组的Akt(1.02±0.00)、磷酸化Akt(p-Akt,0.32±0.02)、mTOR(0.79±0.00)和磷酸化mTOR(p-mTOR,0.49±0.02)的相对表达量都显著低于对照组(tAkt=27.951,tp-Akt=47.666,tmTOR=37.898,tp-mTOR=25.307,P0.05)。结论硒能够通过抑制人胃癌细胞的lncRNA HOXB-AS1表达来影响Akt/mTOR通路,从而促进人胃癌细胞的凋亡来抑制胃癌的增殖。