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基于TLR4/NF-κB信号通路研究逍遥散对慢性心理应激加重胶原诱导性关节炎大鼠病情的调节作用

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中华中医药杂志 2024年第5期39卷 2211-2218页

作者：李媛媛张碧涛崔子龙范培健王少贤河北中医药大学基础医学院石家庄050200 河北省中西医结合肺病研究重点实验室石家庄050091

目的:观察逍遥散对慢性心理应激加重胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠病情的调节作用及可能机制。方法:40只Wistar大鼠适应性喂养1周后随机分为正常组(8只)与模型组(32只),正常组正常饲养4周,模型组大鼠在建立CIA动物模型基础上施加1周孤养与... 详细信息

目的:观察逍遥散对慢性心理应激加重胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠病情的调节作用及可能机制。方法:40只Wistar大鼠适应性喂养1周后随机分为正常组(8只)与模型组(32只),正常组正常饲养4周,模型组大鼠在建立CIA动物模型基础上施加1周孤养与3周慢性不可预知温和应激(CUMS)建立类风湿关节炎伴发抑郁症(RAD)动物模型。通过比较第0天与第28天体质量、摄食量、糖水偏好率、旷场行为学变化及足趾容积、关节炎评分(AI)共同判断RAD模型大鼠是否制备成功。RAD模型大鼠全部成模并随机分为模型组、甲氨蝶呤组、逍遥散组、氟西汀组,每组8只。正常组与模型组每天灌胃0.9%氯化钠溶液,甲氨蝶呤组每周灌胃2次甲氨蝶呤水溶液(1 mg/kg),逍遥散组与氟西汀组除每周灌胃2次甲氨蝶呤水溶液(1 mg/kg)外,同时逍遥散组每天灌胃逍遥散水煎液(19.27 g/kg),氟西汀组每天灌胃氟西汀水溶液(2 mg/kg),给药持续6周。通过比较用药前后各组大鼠体质量、摄食量、糖水偏好率、旷场行为学及足趾容积、AI评分共同判断RAD大鼠抑郁与关节炎恢复程度;酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;实时荧光定量PCR法测定海马IL-1β、TNF-α、IL-6、Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB P65(NF-κB P65)mRNA表达;蛋白质印迹法(Western Blot)检测海马TLR4、NF-κB P65蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量增长缓慢,摄食量减少,糖水偏好率与旷场行为学异常,足趾容积与AI评分明显升高,兼具抑郁与关节炎外在表现,血清与海马组织中IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.01),海马组织中TLR4、NF-κB P65 mRNA与蛋白表达显著增加(P<0.01)。药物干预后,模型动物抑郁与关节炎表现得到有效改善,尤其加入抗抑郁药物逍遥散与氟西汀后效果更佳。同时,血清中IL-1β、TNF-α水平显著降低(P<0.05,P<0.01),海马组织IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达显著减少(P<0.05,P<0.01),海马组织中TLR4、NF-κB P65 mRNA与蛋白表达也显著减少(P<0.01)。结论:逍遥散可改善模型大鼠抑郁样行为同时减轻关节炎病情,其机制可能与调节TLR4/NF-κB信号通路,抑制炎症因子表达过多相关。

关键词：类风湿关节炎抑郁症胶原诱导性关节炎慢性心理应激逍遥散 TLR4/NF-κB信号通路

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掺和料对压蒸胶砂试件抗硫酸盐侵蚀性能研究

非金属矿 2024年第1期47卷 41-45页

作者：张碧涛胡延燕杜永康刘栋陕西建材科技集团股份有限公司陕西西安710018 西安建筑科技大学材料科学与工程学院陕西西安710055 黄陵生态水泥有限公司陕西延安727399

为研究压蒸养护下不同掺和料对胶砂试件抗硫酸盐侵蚀性的影响规律,采用石英粉、粉煤灰和矿粉为矿物掺和料制备压蒸胶砂试件,得到不同干湿循环次数下试件的抗压抗蚀系数,并对硫酸盐腐蚀前后胶砂试件的表观形态和微观形貌进行了分析。结... 详细信息

为研究压蒸养护下不同掺和料对胶砂试件抗硫酸盐侵蚀性的影响规律,采用石英粉、粉煤灰和矿粉为矿物掺和料制备压蒸胶砂试件,得到不同干湿循环次数下试件的抗压抗蚀系数,并对硫酸盐腐蚀前后胶砂试件的表观形态和微观形貌进行了分析。结果表明,与纯水泥试件相比,单掺20%石英粉对压蒸试件的抗硫酸盐侵蚀性降低幅度最大,240次干湿循环抗压抗蚀系数为0.53,单掺粉煤灰、矿粉或3种矿物掺和料两两双掺均有利于提高压蒸胶砂试件的抗硫酸侵蚀性。压汞试验表明,掺入矿物掺和料能有效改善压蒸胶砂试件的孔结构,但是单掺石英粉增加了大于0.02μm的有害孔含量,降低了压蒸胶砂试件抗硫酸盐侵蚀性。

关键词：矿物掺和料压蒸胶砂试件抗硫酸盐侵蚀性

血小板源性生长因子B在胃癌组织的表达及其临床意义

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中华实验外科杂志 2024年第1期41卷 128-132页

作者：朱恒利邢文凤钱昆张碧涛黄国全孙建华湖北医药学院研究生院十堰442099 重庆医科大学附属第一医院胃肠外科重庆400014 恩施州中心医院胃肠外科恩施445099 恩施州中心医院湖北硒与人体健康研究院恩施445099

目的基于单细胞测序技术解析血小板源性生长因子B(PDGFB)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法选用3对胃癌及配对的癌旁组织样本进行单细胞转录组测序(scRNA-seq)。CellTypist对过滤后的单细胞表达数据进行亚群分类,使用Wilcoxon rank-... 详细信息

目的基于单细胞测序技术解析血小板源性生长因子B(PDGFB)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法选用3对胃癌及配对的癌旁组织样本进行单细胞转录组测序(scRNA-seq)。CellTypist对过滤后的单细胞表达数据进行亚群分类,使用Wilcoxon rank-sum对测序数据进行拟时序分析,探究不同细胞簇中PDGFB的差异表达。通过癌症基因组图谱(TCGA)及免疫组织化学技术(IHC)分析PDGFB在胃癌组织中的表达。收集68例胃癌患者临床数据,采用单因素和多因素Cox比例风险回归模型确定影响胃癌患者预后的独立因素。结果scRNA-seq分析发现,PDGFB与4种促血管生成因子(FLT4、FLT1、TEK、KDR)在胃癌组织中均显著高表达(PDGFB与4种胃癌组织中的表达显著高于在癌旁组织中的表达,PDGFB在胃癌组织中的相对表达量为2.907,FLT4的相对表达量为2.293,FLT1的相对表达量为2.049,TEK的相对表达量为1.851,KDR的相对表达量为1.843,F=19.399,P<0.01);不同细胞亚群的标记基因分析显示,PDGFB在内皮细胞中显著高表达(PDGFB在内皮细胞中的表达显著高于其他细胞,内皮细胞中相对表达量为2.533,成纤维细胞中相对表达量为0.872,巨噬细胞中相对表达量为1.391,组织干细胞中相对表达量为1.618,F=8.945,P<0.01)。TCGA和IHC分析表明,PDGFB在胃癌组织中的表达显著高于癌旁组织(PDGFB在胃癌组织中阳性率为66.18%(45/68),癌旁组织阳性率为17.65%(12/68),χ^(2)=32.89,P<0.05),并且PDGFB高表达的患者术后5年生存率显著低于PDGFB低表达的患者(PDGFB高表达患者中位生存时间为20个月;PDGFB低表达患者中位生存时间为58个月,χ^(2)=17.64,P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,PDGFB的表达在胃癌患者的不同年龄、肿瘤大小、T分期、肿瘤分期均存在显著性相关性[风险系数(HR)=1.950,95%可信区间(CI)=1.101~3.455,P<0.05;HR=5.102,95%CI=2.566~10.146,P<0.05;HR=2.645,95%CI=1.116~6.268,P<0.05;HR=3.985,95%CI=1.971~8.058,P<0.05;HR=6.820,95%CI=1.552~29.967,P<0.05],为总生存期相关的危险因素。结论PDGFB在胃癌中高表达,并且PDGFB的高表达与胃癌患者的不良预后明显相关。

关键词：胃癌血小板衍生生长因子B 单细胞测序技术血管生成

微管相关蛋白1轻链3β在胃癌组织的表达及其临床意义

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中华实验外科杂志 2024年第2期41卷 230-234页

作者：邢文凤朱恒利张碧涛黄国全钱昆孙建华湖北医药学院研究生院十堰442099 湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院胃肠外科恩施445099 重庆医科大学第一附属医院胃肠外科重庆400014

目的基于单细胞测序技术解析微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)在胃癌中的表达及其与患者预后的关系。方法选用3对胃癌及配对的癌旁组织样本行单细胞转录组测序(scRNA-seq)。CellTypist对过滤后的单细胞表达数据进行亚群分类, 使用Wilcoxon ra... 详细信息

目的基于单细胞测序技术解析微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)在胃癌中的表达及其与患者预后的关系。方法选用3对胃癌及配对的癌旁组织样本行单细胞转录组测序(scRNA-seq)。CellTypist对过滤后的单细胞表达数据进行亚群分类, 使用Wilcoxon rank-sum对测序数据进行拟时序分析, 探究不同细胞簇中LC3B的差异表达。通过癌症基因组图谱(TCGA)及免疫组织化学技术(IHC)分析LC3B在胃癌组织中的表达。采用单因素和多因素Cox比例风险回归模型确定影响胃癌患者预后的独立因素。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术分析胃癌细胞中LC3B的表达水平, 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成、Transwell检测LC3B表达改变后, 胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化。两组间比较采用两独立样本t检验。结果 scRNA-seq分析结果显示, LC3B在胃癌组织中的表达量高于癌旁组织(2.001±2.706比1.010±1.634, t=44.094, P<0.01)且LC3B在内皮细胞、单核细胞中表达量高于其余细胞亚群(3.610±3.294, 3.214±3.889, F=1 039.267, P<0.01)。通过TCGA和IHC分析结果显示, LC3B在原发性胃癌组织中的表达高于正常组织[67.983(53.874, 83.827)比48.114(39.147, 78.174), P<0.01;60.3%比19.1%, χ^(2)=9.299, P<0.01]。生存分析显示, LC3B高表达的胃癌患者总体生存时间短于LC3B低表达的患者[风险比(HR)=4.143, 95%可信区间(CI):2.352~7.298, P<0.05]。多因素Cox回归分析显示, LC3B为总生存期相关的危险因素(HR=4.966, 95%CI:2.241~11.005, P<0.01)。CCK-8、Transwell迁移及侵袭实验、克隆形成实验检测分析发现, 过表达LC3B后胃癌细胞的活力、迁移、侵袭、增殖能力高于空载体组[(1.837±0.057)比(1.287±0.091)、(338.000±39.950)个比(152.333±4.509)个、(287.667±44.230)个比(148.667±27.465)个、(202.333±12.503)个比(104.667±11.240)个, t=8.883、7.999、4.624、10.062, P<0.05], 抑制LC3B表达后, 胃癌细胞的活力、迁移、侵袭、增殖能力低于空载体组[(0.810±0.064)比(1.460±0.058)、(129.667±37.859)个比(389.667±43.822)个、(126.000±60.531)个比(290.000±70.682)个、(54.667±16.166)个比(109.667±3.055)个, t=12.963、7.776、3.052、5.790, P<0.05]。结论 LC3B在胃癌中高表达, 并且促进胃癌细胞的增殖和转移。

关键词：胃癌单细胞转录组测序自噬微管相关蛋白1轻链3β 预后

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如何当好赴对口帮扶地区党政代表团联络员

秘书之友 2023年第4期 33-35页

作者：张碧涛中共上海市金山区委党校

持续深化东西部协作，是扎实推动巩固拓展脱贫攻坚成果，加快全面推进乡村振兴的重要举措。对口地区双方每年固定安排党政高层领导互访对接，是体现帮扶工作组织领导成效的一项政治性、政策性很强的重要任务，也是各级实施东西部协作考...

持续深化东西部协作，是扎实推动巩固拓展脱贫攻坚成果，加快全面推进乡村振兴的重要举措。对口地区双方每年固定安排党政高层领导互访对接，是体现帮扶工作组织领导成效的一项政治性、政策性很强的重要任务，也是各级实施东西部协作考核评价的首要内容。

关键词：

来源：博看期刊

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逍遥散治疗抑郁症的研究进展

中国实验方剂学杂志 2022年第23期28卷 273-282页

作者：张碧涛李媛媛辛泰然王浩李红红王少贤河北中医学院石家庄050200 河北省中西医结合肺病研究重点实验室石家庄050091

逍遥散出自《太平惠民和剂局方》,全方由柴胡、当归、白芍、白术、茯苓、煨姜、薄荷、炙甘草组成。逍遥散作为中医调治情志活动异常的经典名方,临床实践及实验研究均证实其可用于抑郁、焦虑症及多种躯体疾病继发的抑郁状态,如逍遥散加... 详细信息

逍遥散出自《太平惠民和剂局方》,全方由柴胡、当归、白芍、白术、茯苓、煨姜、薄荷、炙甘草组成。逍遥散作为中医调治情志活动异常的经典名方,临床实践及实验研究均证实其可用于抑郁、焦虑症及多种躯体疾病继发的抑郁状态,如逍遥散加减联合西药或其他疗法治疗妇科疾病、内科疾病、消化系统疾病等基础上伴随抑郁症发病,可明显改善患者汉密尔顿抑郁量表、抑郁自评量表等评分,疗效良好,患者依从性较高,无明显不良反应。目前逍遥散治疗抑郁症的发病机制主要集中于单胺神经递质5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)等,下丘脑-垂体-肾上腺轴促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)等,免疫炎症因子水平白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等,肠道微生态及脑肠轴食欲素、胃饥饿素、瘦素等,进而调节机体神经生化机制、内分泌机制、免疫机制和脑区结构异常等达到防治抑郁症的目的,但逍遥散抗抑郁的作用机制研究尚待进一步深入探讨。该文通过整理相关文献,对逍遥散治疗抑郁症的临床应用和基础作用机制进行了综合分析,以期为逍遥散临床防治抑郁症,提高患者生存质量提供有益的指导;同时也为逍遥散抗抑郁作用机制的深入研究,提供参考。

关键词：逍遥散抑郁症临床应用作用机制研究进展

类风湿关节炎伴发抑郁症模型大鼠制备与评价探讨

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中国实验动物学报 2023年第9期31卷 1105-1113页

作者：李媛媛张碧涛范培健崔子龙王少贤河北中医药大学石家庄050200 河北省中西医结合肺病研究重点实验室石家庄050091

目的制备并评价类风湿关节炎伴发抑郁症动物模型。方法 32只大鼠随机分为正常组(N组)、抑郁组(D组)、关节炎组(RA组)、模型组(RAD组),每组8只。N组正常饲养,D组施加1周孤养与3周慢性不可预知温和刺激(chronic unpredictable mild stres... 详细信息

目的制备并评价类风湿关节炎伴发抑郁症动物模型。方法 32只大鼠随机分为正常组(N组)、抑郁组(D组)、关节炎组(RA组)、模型组(RAD组),每组8只。N组正常饲养,D组施加1周孤养与3周慢性不可预知温和刺激(chronic unpredictable mild stress, CUMS),RA组予胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)方法建立关节炎模型,RAD组在建立CIA动物模型基础上施加1周孤养与3周CUMS建立RAD动物模型。通过观测大鼠足趾容积、关节炎指数(arthrits index, AI),滑膜、踝关节病理和血清白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平评价大鼠类风湿关节炎模型是否制备成功;通过测定体重、摄食量、糖水偏好率、旷场行为学(运动总格数、直立次数),血清促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone, CRH)、促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone, ACTH)、皮质酮(corticosterone, CORT)水平及海马病理变化评价大鼠抑郁状态。模型大鼠同时符合上述抑郁状态与类风湿关节炎相关指标检测,则表明RAD动物模型制备成功。结果与N组比较,RA组与RAD组大鼠足趾容积、AI评分及血清IL-1β、IL-6水平显著增加(P<0.05),关节间隙增宽,滑膜增生明显并延伸至关节腔,可见大量炎细胞浸润,D组与RAD组大鼠体重、摄食量、运动总格数、直立次数、糖水偏好率有不同程度降低,血清CRH、ACTH、CORT水平有不同程度升高,神经元细胞减少,伴有部分细胞核萎缩,模型组尤为明显(P<0.05)。结论胶原诱导性关节炎联合孤养与CUMS可较好地模拟RAD模型动物外在表现与内在指标变化,可为RAD疾病的研究提供动物模型参考。

关键词：类风湿关节炎抑郁症胶原诱导性关节炎慢性不可预知温和应激模型评价

当归芍药散对慢性束缚应激模型大鼠海马NMDAR1、GluR2及BDNF表达和抑郁样行为的影响

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中华中医药杂志 2023年第3期38卷 1003-1008页

作者：辛泰然张碧涛王浩李红红丁跃玲王少贤河北中医学院石家庄050200 河北省中西医结合肺病研究重点实验室石家庄050091

目的:观察当归芍药散对慢性束缚应激模型大鼠海马谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)、谷氨酸受体2(GluR2)以及脑源性神经营养因子(BDNF)表达和抑郁样行为的影响。方法:60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组、当归芍药散... 详细信息

目的:观察当归芍药散对慢性束缚应激模型大鼠海马谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)、谷氨酸受体2(GluR2)以及脑源性神经营养因子(BDNF)表达和抑郁样行为的影响。方法:60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组、当归芍药散组,每组15只。除空白组外,其余各组采用束缚方式制备慢性应激模型,当归芍药散组大鼠应激同时灌胃当归芍药散混悬液13.44 g·kg^(-1)·d^(-1),氟西汀组应激同时灌胃氟西汀水溶液2 mg·kg^(-1)·d^(-1),空白组与模型组灌胃等体积0.9%氯化钠溶液,1次/d,实验21 d。采用糖水消耗实验、高架十字迷宫实验评价大鼠行为学变化,尼氏染色法观察大鼠海马神经元病理变化,免疫组化法和qRT-PCR法分别检测大鼠海马CA1区NMDAR1、GluR2、BDNF蛋白及mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠体质量降低,糖水消耗率、高架十字迷宫实验开放臂停留时间及进入次数显著减少(P<0.05),海马CA1区尼氏小体数量、GluR2与BDNF蛋白及mRNA表达均显著降低(P<0.05),而NMDAR1蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,当归芍药散组大鼠体质量、糖水消耗率、高架十字迷宫实验开放臂停留时间及进入次数均显著增加(P<0.05),海马CA1区尼氏小体数量、GluR2与BDNF蛋白及mRNA表达均显著升高(P<0.05),而NMDAR1蛋白及mRNA表达降低(P<0.05);Pearson相关分析表明,大鼠糖水消耗率、开放臂进入次数、开放臂停留时间、尼氏小体与其海马CA1区GluR2、BDNF mRNA表达呈正相关(P<0.05,P<0.01),与NMDAR1 mRNA表达呈负相关(P<0.05,P<0.01)。结论:慢性束缚应激可导致大鼠出现抑郁样行为和海马NMDAR1、GluR2、BDNF表达的明显变化,当归芍药散可能通过抑制应激大鼠海马CA1区NMDAR1表达,提高GluR2、BDNF的表达,发挥一定的抗抑郁作用。

关键词：慢性束缚应激抑郁当归芍药散谷氨酸受体脑源性神经营养因子

逍遥散对慢性束缚应激肝郁脾虚大鼠孤束核Ghrelin、GHS-R及Ob-R表达的影响

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中华中医药杂志 2022年第8期37卷 4692-4697页

作者：张碧涛辛泰然李媛媛王浩李红红王少贤河北中医学院石家庄050200 河北省中西医结合肺病研究重点实验室石家庄050091

目的:通过观测孤束核(NTS)胃饥饿素(Ghrelin)、胃饥饿素受体(GHS-R)及瘦素受体(Ob-R)的表达变化,探讨逍遥散影响慢性束缚应激(CIS)肝郁脾虚大鼠体质量与摄食量变化的机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组和逍遥散组,... 详细信息

目的:通过观测孤束核(NTS)胃饥饿素(Ghrelin)、胃饥饿素受体(GHS-R)及瘦素受体(Ob-R)的表达变化,探讨逍遥散影响慢性束缚应激(CIS)肝郁脾虚大鼠体质量与摄食量变化的机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组和逍遥散组,每组15只。每天3 h连续21 d CIS方法建立动物模型,同时灌胃给予相应药物。观察各组大鼠体质量、摄食和旷场实验行为学指标变化;间苯三酚法测定血清D-木糖含量;RT-qPCR、免疫组化和Western Blot法分别检测各组大鼠NTS中Ghrelin、GHS-R、Ob-R mRNA或蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量降低,摄食量下降,旷场实验总移动距离、站立和修饰次数显著减少,血清D-木糖含量显著下降(P<0.05);NTS中Ghrelin、GHS-R阳性细胞表达数和总积分光密度显著减少(P<0.05),Ob-R阳性细胞表达数和总积分光密度显著升高(P<0.05);GHS-R mRNA和蛋白表达显著减少(P<0.05),Ob-R mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,逍遥散组大鼠体质量、摄食量及旷场实验总移动距离、站立次数和血清D-木糖含量显著升高(P<0.05);NTS中Ghrelin、GHS-R表达显著升高(P<0.05),Ob-R表达显著降低(P<0.05)。结论:逍遥散可通过调节CIS大鼠NTS中Ghrelin、GHS-R和Ob-R的表达变化,发挥调节食欲、抗应激作用。

关键词：逍遥散慢性束缚应激肝郁脾虚摄食行为孤束核胃饥饿素受体瘦素受体