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白藜芦醇对膝骨关节炎模型大鼠关节液中氧化应激和炎症因子的调控作用

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中国组织工程研究 2024年第32期28卷 5154-5158页

作者：任伟亮焦永伟张健杨立英杨琦河北中医学院第一附属医院(河北省中医院)骨伤三科河北省石家庄市050000

背景:膝骨关节炎是临床常见退行性关节疾病,主要表现为慢性炎症和氧化应激反应。白藜芦醇具有抗炎和抗氧化应激的生物作用,因此可对症进行治疗,有望为膝骨关节炎治疗提供新的策略。目的:探讨白藜芦醇通过沉默信息调节因子1(silence info... 详细信息

背景:膝骨关节炎是临床常见退行性关节疾病,主要表现为慢性炎症和氧化应激反应。白藜芦醇具有抗炎和抗氧化应激的生物作用,因此可对症进行治疗,有望为膝骨关节炎治疗提供新的策略。目的:探讨白藜芦醇通过沉默信息调节因子1(silence information regulator 1,SIRT1)/叉头框转录因子O1(forkhead transcription factor O1,FOXO1)通路对大鼠膝骨关节炎的作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、白藜芦醇低剂量组和白藜芦醇高剂量组,每组10只,除对照组外均建立膝骨关节炎模型,分别在造模的第1,4,7天注射4%木瓜蛋白酶溶液与0.3 mol/L半胱氨酸溶液(1∶1混置0.5 h)的混合液20μL。造模成功后1 d开始给药,白藜芦醇低剂量组和白藜芦醇高剂量组大鼠经关节腔注射白藜芦醇25 mg/kg或100 mg/kg,对照组和模型组经关节腔注射等体积生理盐水。治疗28 d后,测定4组大鼠膝关节最大活动度;应用放射免疫法和ELISA法检测膝关节液中氧化应激指标和炎症因子水平;番红O-固绿染色分析膝关节中胶原纤维含量;采用Mankin组织学评分分析关节炎病变程度;蛋白质免疫印迹法检测膝关节SIRT1和FOXO1水平。结果与结论:①与模型组比较,白藜芦醇低剂量组和高剂量组大鼠膝关节最大屈伸角度明显增加,且高剂量组明显高于低剂量组(P<0.05);②与模型组比较,白藜芦醇低剂量组和高剂量组大鼠膝关节液中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平显著增加;而丙二醛水平显著下降,且高剂量组明显优于低剂量组(P<0.05);③与模型组比较,白藜芦醇低剂量组和高剂量组大鼠膝关节液炎症因子白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平明显下降,且高剂量组明显低于低剂量组(P<0.05);④与模型组比较,白藜芦醇低剂量组和高剂量组大鼠膝关节胶原纤维含量增加,且高剂量组明显高于低剂量组(P<0.05);⑤与模型组比较,白藜芦醇低剂量组和高剂量组大鼠膝关节SIRT1表达水平显著增加,乙酰化FOXO1水平显著下调,且高剂量组变化幅度明显优于低剂量组(P<0.05);⑥提示白藜芦醇可显著改善膝骨关节炎大鼠关节液中的氧化应激和炎症因子水平,缓解关节炎症状,且呈剂量依赖性,可能是通过SIRT1/FOXO1通路实现的。

关键词：膝骨关节炎白藜芦醇 SIRT1/FOXO1通路炎症水平氧化应激

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参苓白术散调控TLR4/NLRP3通路对酒精性肝病治疗作用的机制研究

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中国中药杂志 2024年第5期49卷 1275-1285页

作者：蔡世揿周素芳周丽芳李玉茹周相宇吕方怡贵州中医药大学第一附属医院贵州贵阳550000 贵州中医药大学第一附属医院消化内科贵州贵阳550000

该研究旨在探究参苓白术散(SBP)对酒精性肝病(ALD)细胞自噬的调控作用,以及其通过TLR4/NLRP3通路的干预效果。通过高度白酒灌胃法建立慢性酒精性肝病大鼠模型,并采用乙醇刺激BRL3A大鼠肝细胞建立ALD细胞模型;通过HPLC对SBP进行成分测定... 详细信息

该研究旨在探究参苓白术散(SBP)对酒精性肝病(ALD)细胞自噬的调控作用,以及其通过TLR4/NLRP3通路的干预效果。通过高度白酒灌胃法建立慢性酒精性肝病大鼠模型,并采用乙醇刺激BRL3A大鼠肝细胞建立ALD细胞模型;通过HPLC对SBP进行成分测定;对酒精性肝病大鼠肝组织进行苏木精-伊红(HE)染色和油红O染色,进行病理评估;采用ELISA检测脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)水平,利用qRT-PCR评估髓样分化因子88(MyD88)、Toll样受体4(TLR4)的mRNA表达;采用CCK-8分析不同药物对BRL3A细胞增殖活性的影响;通过Western blot分析核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、核因子κB(NF-κB、P65)、磷酸化核因子(p-P65)、半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)、核孔糖蛋白(P62)、苄氯素1(Beclin1)和微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ)蛋白表达。结果显示SBP能改善肝脏脂质沉积,降低肝功能,缓解肝脏组织炎症反应,降低LPS、TNF-α、IL-1β和IL-18;此外,SBP可以通过TLR4/NLRP3信号通路干预长期酒精摄入导致的肝脏过度自噬,并降低LC3Ⅱ和Beclin1表达,升高P62的表达,并促进自噬溶酶体生成。该研究结果表明,参苓白术散可以显著改善慢性酒精性肝病的肝功能和血脂异常,通过抑制TLR4/NLRP3通路,调控长期高度白酒喂养引发的过度自噬反应。

关键词：酒精性肝病自噬参苓白术散 TLR4/NLRP3通路

基于网络药理学和动物实验探讨柠檬苦素抗肝纤维化的作用机制

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中国现代应用药学 2024年第4期41卷 460-468页

作者：肖玉洪安祯祥王芳王锦雯邵霞袁颖贵州中医药大学第一临床医学院贵阳550001 达州市达川区中医医院四川达州635000 贵州中医药大学第一附属医院贵阳550001

目的通过网络药理学方法探讨柠檬苦素治疗肝纤维化的作用机制,并运用分子对接和动物实验进行验证。方法首先,利用SwissTargetPrediction、GeneCards和DisGeNet等数据库筛选柠檬苦素和肝纤维化的靶点,并运用微生信网站获得柠檬苦素与肝... 详细信息

目的通过网络药理学方法探讨柠檬苦素治疗肝纤维化的作用机制,并运用分子对接和动物实验进行验证。方法首先,利用SwissTargetPrediction、GeneCards和DisGeNet等数据库筛选柠檬苦素和肝纤维化的靶点,并运用微生信网站获得柠檬苦素与肝纤维化的共同靶点。然后运用STRING数据库和Cytoscape软件构建共同靶点的蛋白质相互作用网络,并利用CytoNCA插件筛选核心靶点;使用Metascape数据库对共同靶点进行GO功能注释和KEGG通路富集分析,以预测其可能的作用机制。最后运用AutoDock Vina软件对柠檬苦素与核心靶蛋白进行分子对接验证,并将网络药理学预测结果进行动物实验验证。结果预测结果表明柠檬苦素可能作用于AKT1、VEGFA、HIF1A等86个靶点,参与激素应答、蛋白磷酸化、血管生成等生物过程和PI3K/AKT通路、HIF-1通路、VEGF通路等与肝纤维化相关的信号通路。蛋白质相互作用分析结果显示核心靶点包括AKT1、VEGFA、HIF1A、PIK3CA等11个靶点。分子对接结果表明柠檬苦素与AKT1、VEGFA、HIF1A 3个核心靶蛋白具有较强的结合活性和稳定的结合构象。动物实验显示,与模型组比较,柠檬苦素高剂量(high-dose group of limonin,LH)组、柠檬苦素低剂量(low-dose group of limonin,LL)组中血清透明质酸(hyaluronidase,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)含量(LL组中LN除外)均下降(P<0.01或P<0.05),肝组织炎症和纤维化程度均减轻;Western blotting和实时荧光定量PCR(qPCR)检测显示LH、LL组肝组织中AKT、HIF-1α、VEGF蛋白和mRNA表达水平(LL组中VEGF除外)均下调(P<0.01或P<0.05)。结论柠檬苦素主要作用于AKT1、VEGFA、HIF1A等核心靶点来干预肝纤维化血管新生,其机制可能与其抑制AKT/HIF-1α/VEGF信号通路有关。

关键词：网络药理学分子对接柠檬苦素肝纤维化血管新生

基于Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路探究参红通络方对心肌缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 104-110页

作者：赖颖蓉赵倩琳姜丽红长春中医药大学中医学院长春130117 长春中医药大学附属医院长春130117

目的:探讨参红通络方加减对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠细胞凋亡的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、参红通络方剂低、中、高剂量组和辛伐他汀组。除空白组外,采用线栓结扎冠状动脉左前降支方式制备心肌缺血再灌注... 详细信息

目的:探讨参红通络方加减对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠细胞凋亡的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、参红通络方剂低、中、高剂量组和辛伐他汀组。除空白组外,采用线栓结扎冠状动脉左前降支方式制备心肌缺血再灌注损伤大鼠模型(MI/RI模型),造模成功后第1天起,空白组(生理盐水1.0 mL·kg^(-1))、模型组(生理盐水1.0 mL·kg^(-1))、参红通络方剂低、中、高剂量组(1.031、2.063、4.126 g·kg^(-1)参红通络方标准浓缩液)和辛伐他汀组(辛伐他汀0.71 mg·kg^(-1)),定时灌胃给药,每日1次,连续2周。苏木素-伊红(HE)染色法观察心肌细胞病理形态学变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色法检测大鼠心肌细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和胱天蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平。结果:与空白组比较,模型组HE染色可见心肌细胞排列紊乱,纤维不完整,心肌细胞小灶性坏死,并伴有炎性细胞浸润;血清CK-MB、IL-6和TNF-α水平明显上升(P药剂量的增加而明显降低,Bcl-2表达水平随参红通络方给药剂量的增加而明显升高(P<0.05)。结论:参红通络方加减可通过减轻心肌组织病理损伤并降低心肌细胞凋亡,可能与抑制Caspase-3、Bax表达、促进Bcl-2水平表达有关。

关键词：参红通络方心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡 B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2) Bcl-2相关X蛋白(Bax) 胱天蛋白酶-3(Caspase-3)

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α7烟碱型乙酰胆碱受体对围手术期神经认知功能的影响研究进展

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解放军医学杂志 2024年第3期49卷 343-348页

作者：司尚坤徐迎雪张维亮季加富张栋斌山东中医药大学中医学院山东济南250014 山东中医药大学附属医院麻醉科山东济南250014

α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)在中枢神经系统和免疫系统中广泛表达,发挥神经-免疫调节作用。一方面,α7nAChR参与神经递质的传递、兴奋性信号的传导和突触可塑性的维持,对于保持神经认知功能的正常与稳定具有重要意义;另一方面,α7n... 详细信息

α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)在中枢神经系统和免疫系统中广泛表达,发挥神经-免疫调节作用。一方面,α7nAChR参与神经递质的传递、兴奋性信号的传导和突触可塑性的维持,对于保持神经认知功能的正常与稳定具有重要意义;另一方面,α7nAChR作为胆碱能抗炎通路的重要组成部分,参与调节中枢系统炎症反应、氧化应激、细胞凋亡和自噬等生理、病理过程,发挥免疫调节和神经保护作用,是改善围手术期神经认知功能的潜在靶点。本文对α7nAChR的生物学特征及其对围手术期神经认知功能的影响进行综述,以期为临床改善手术患者的围手术期神经认知功能提供新的思路和方法。

关键词： α7烟碱型乙酰胆碱受体围手术期,神经认知功能胆碱能抗炎通路中枢神经系统疾病

基于GEO数据库、网络药理学及分子对接探讨扶脾柔肝颗粒治疗肝癌的作用机制

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中国老年学杂志 2024年第10期44卷 2336-2343页

作者：肖玉洪安祯祥贵州中医药大学第一临床医学院贵州贵阳550002 贵州中医药大学第一附属医院

目的采用GEO数据库、网络药理学和分子对接探讨扶脾柔肝颗粒(FRG)治疗肝细胞癌(HCC)的物质基础及其作用机制。方法首先,通过中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)、GEO数据库获取FRG治疗HCC的活性成分与潜在靶点。其次,使用Cytoscape... 详细信息

目的采用GEO数据库、网络药理学和分子对接探讨扶脾柔肝颗粒(FRG)治疗肝细胞癌(HCC)的物质基础及其作用机制。方法首先,通过中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)、GEO数据库获取FRG治疗HCC的活性成分与潜在靶点。其次,使用Cytoscape软件构建“中药-活性成分-潜在靶点”网络,利用Network Analyzer插件筛选关键成分。采用String数据库和Cytoscape软件构建潜在靶点蛋白质互作(PPI)网络,利用CytoNCA插件筛选核心靶点。使用Metascape数据库对潜在靶点进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析和基因本体论(GO)功能富集分析。最后,采用AutoDock Vina软件将关键成分与核心靶蛋白进行分子对接。通过KM Plotter数据库分析核心靶基因对HCC患者总生存率(OS)的影响。结果预测结果显示FRG与HCC有63个共同靶点。“中药-活性成分-潜在靶点”网络分析显示关键成分为山奈酚、β-谷甾醇、汉黄芩素等;PPI网络分析显示核心靶点为雌激素受体(ESR)1、雄激素受体(AR)、前列腺素G/H合酶(PTGS)2、原癌基因MYC、原癌基因FOS。KEGG富集分析主要涉及癌症通路、p53通路、白细胞介素(IL)-17通路和缺氧诱导因子(HIF)-1通路等。分子对接结果显示关键成分与核心靶点之间具有较强的亲和力。核心基因的OS分析结果显示,与肝癌中ESR1基因高表达比较,ESR1低表达的OS明显更低(P一步实验研究提供理论依据。

关键词： GEO数据库网络药理学分子对接扶脾柔肝颗粒肝癌

经典名方柴胡桂枝干姜汤的关键信息考证与临床运用分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第12期30卷 136-146页

作者：王雪洁梁绿圆曹佳蕾刘澜李维笑王艺萍魏炳琦马丙祥史文丽河南中医药大学儿科医学院郑州450046 河南中医药大学中医学院郑州450000 河南中医药大学第一附属医院郑州450000

柴胡桂枝干姜汤临床疗效确切,自汉代至今广为流传记载,是一首被历代医家推崇的柴胡类方,已被收录于2023年8月国家中医药管理局公布的《古代经典名方目录(第二批)——汉族医药》。笔者采用文献计量学的方法,搜集并纳入明确记载方名及药... 详细信息

柴胡桂枝干姜汤临床疗效确切,自汉代至今广为流传记载,是一首被历代医家推崇的柴胡类方,已被收录于2023年8月国家中医药管理局公布的《古代经典名方目录(第二批)——汉族医药》。笔者采用文献计量学的方法,搜集并纳入明确记载方名及药物组成的柴胡桂枝干姜汤相关古籍文献数据共有37处,涉及中医古籍34部。该文从柴胡桂枝干姜汤的方源方名、组成、药物基原、剂量、制法用法、古今主治功效及临床应用分析等方面进行梳理考证。考证结果显示柴胡桂枝干姜汤出自汉代张仲景所著《伤寒论》,药物基原古今基本一致,古籍中药物剂量大多数与《伤寒论》所载用量一致,柴胡桂枝干姜汤功效为和解少阳,温化水饮。主治病证范围广泛,但总以太阳少阳枢机不利为主。该方现代应用范围涉及消化系统、呼吸系统、皮肤科、神经系统等,对于疑难杂症亦有良效。通过对柴胡桂枝干姜汤古籍文献的挖掘梳理,确定其关键信息,以期为经典名方的临床应用及新药研发提供科学参考。

关键词：柴胡桂枝干姜汤经典名方文献考证古今应用

仙灵骨葆胶囊治疗早期股骨头缺血性坏死的疗效观察

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辽宁中医杂志 2024年

作者：刘英杰韩昆苏敬彬彭光远何晓辰河北中医学院河北中医学院第一附属医院中医药特色研究室河北省中医院骨伤一科河北以岭医院骨伤二科东台市中医院骨一科河北省人民医院康复医学科

目的探讨仙灵骨葆胶囊联合冲击波对早期股骨头缺血性坏死患者血清细胞因子水平和骨密度的影响。方法采用随机数字表法将2020年6月—2022年6月河北中医学院附属医院收治的100例早期股骨头缺血性坏死患者分为A组和B组，各50例。两组均... 详细信息

目的探讨仙灵骨葆胶囊联合冲击波对早期股骨头缺血性坏死患者血清细胞因子水平和骨密度的影响。方法采用随机数字表法将2020年6月—2022年6月河北中医学院附属医院收治的100例早期股骨头缺血性坏死患者分为A组和B组，各50例。两组均给予冲击波治疗，B组在此基础上给予仙灵骨葆胶囊。两组持续治疗1个月。比较两组治疗1个月后的临床疗效，治疗前、治疗1个月后的髋关节活动度、髋关节功能、疼痛程度、骨密度、影像学指标及血清细胞因子水平。结果治疗1个月后，B组总有效率高于A组（96.00%vs70.00%，P一步可提高患者髋关节功能及活动度，改善影像学指标，并有效缓解患者疼痛度，进而可提高临床疗效。

关键词：早期股骨头缺血性坏死冲击波仙灵骨葆胶囊骨密度

甲巯咪唑对甲状腺功能亢进症大鼠尿液代谢组学的影响研究

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中国药房 2024年第9期35卷 1064-1069页

作者：卢旭李玲叶涛彭佑锋何佳馨张宁贵州中医药大学药学院贵阳550025 贵州中医药大学第一附属医院药学部贵阳550001 贵州中医药大学第一附属医院康复科贵阳550001 贵州省大方县中医医院药剂科贵阳551699

目的研究甲巯咪唑对甲状腺功能亢进症大鼠尿液代谢组学的影响,并初步探讨其可能机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、模型组、甲巯咪唑组,每组10只。除对照组外其余各组大鼠连续灌胃左甲状腺素钠片(160 mg/kg)15 d复制甲状腺功能亢... 详细信息

目的研究甲巯咪唑对甲状腺功能亢进症大鼠尿液代谢组学的影响,并初步探讨其可能机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、模型组、甲巯咪唑组,每组10只。除对照组外其余各组大鼠连续灌胃左甲状腺素钠片(160 mg/kg)15 d复制甲状腺功能亢进症模型,且甲巯咪唑组在造模同时每天灌胃甲巯咪唑(3.6 mg/kg)。观察大鼠基本情况,测量体重和肛温;末次给药后,检测大鼠血清中三碘甲腺原氨酸(T_(3))、四碘甲腺原氨酸(T_(4))、游离三碘甲腺原氨酸(FT_(3))、游离四碘甲腺原氨酸(FT_(4))和促甲状腺激素(TSH)水平。于给药第15天收集各组大鼠24 h尿液,采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-TOF-MS)技术对大鼠尿液进行代谢组学分析,利用主成分分析和正交偏最小二乘-判别分析筛选差异代谢物,并通过HMDB、KEGG数据库进行代谢通路分析。结果与对照组相比,模型组大鼠肛温和血清中T_(3)、T_(4)、FT_(3)、FT_(4)水平,尿液中差异代谢物癸二酸、利胆酸3-O-葡萄糖醛酸和N6,N6,N6-三甲基-L-赖氨酸表达均显著升高/上调,体重、血清中TSH水平和尿液中脱氧胞苷和2-氧代-4-甲硫基丁酸表达均显著降低/下调(P<0.01)。与模型组相比,甲巯咪唑组大鼠上述指标水平均显著逆转(P<0.05或P<0.01)。上述5个差异代谢物主要涉及戊糖和葡萄糖醛酸相互作用、赖氨酸降解、半胱氨酸和甲硫氨酸代谢以及嘧啶代谢这4条代谢通路。结论甲巯咪唑可能是通过调节戊糖和葡萄糖醛酸相互作用、赖氨酸降解、半胱氨酸和甲硫氨酸代谢以及嘧啶代谢,从而发挥改善甲状腺功能亢进症的作用。

关键词：甲巯咪唑甲状腺功能亢进症尿液代谢组学差异代谢物超高效液相色谱-飞行时间质谱