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液相色谱-稳定同位素质谱联用鉴定咖啡饮料中咖啡因天然来源

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分析化学 2018年第11期46卷 1802-1807页

作者：丁博王志元陈文锐谢建军佘志刚广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室中山大学化学学院

建立了液相色谱-稳定同位素质谱联用（LC-IRMS）检测咖啡因的δ13C分析方法,用于鉴定咖啡饮料中咖啡因天然来源的真实性。样品中咖啡因经液相色谱分离纯化,色谱条件为:XBridge Shild RP C18色谱柱（50 mm×2.1 mm,3.5μm）,柱温50℃,流... 详细信息

建立了液相色谱-稳定同位素质谱联用（LC-IRMS）检测咖啡因的δ13C分析方法,用于鉴定咖啡饮料中咖啡因天然来源的真实性。样品中咖啡因经液相色谱分离纯化,色谱条件为:XBridge Shild RP C18色谱柱（50 mm×2.1 mm,3.5μm）,柱温50℃,流动相为超纯水,流速400μL/min;再通过LC-IsoLink实现目标物全部氧化为CO;气体,最终以气态形式进入稳定同位素质谱仪,直接检测样品中咖啡因的δ;C。检测44个不同产地来源的咖啡豆样品中咖啡因的δ;C,其范围是-25.3‰～-30.9‰,δ;C平均值δaverage=-27.9‰,标准偏差s=1.3‰,以3倍δ;C标准偏差s为判断依据,检测16个咖啡饮料样品的咖啡因δ13C,结果表明,1个咖啡饮料样品中咖啡因δ;C在3倍标准差线附近（δaverage-3s,-31. 7‰）,判别其咖啡因为非咖啡豆来源。LC-IRMS同位素质谱测定咖啡因δ;C的分析方法,可用于鉴别咖啡饮料天然来源的真实性。

关键词：液相色谱-稳定同位素质谱联用咖啡饮料咖啡因

QuEChERS净化技术结合高效液相色谱-串联质谱法测定食用贝类产品中4种脂溶性贝类毒素

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现代食品科技 2015年第12期31卷 338-344页

作者：刘青曾广丰王志元李文斌胡志玲韩深刘萤广东出入境检验检疫局技术中心广东广州510623 广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室广东广州510623 迪马科技有限公司北京100029 北京出入境检验检疫局技术中心北京100026

建立了QuEChERS净化技术结合高效液相色谱-串联质谱法测定食用贝类产品中4种脂溶性贝类毒素(OA,SPX1,DTX1,AZA1)的快速方法。贝类样品匀质后用85%乙腈水萃取,采用QuEChERS净化技术对其进行富集净化后,用HPLC-MS/MS进行检测。以乙腈-水溶... 详细信息

建立了QuEChERS净化技术结合高效液相色谱-串联质谱法测定食用贝类产品中4种脂溶性贝类毒素(OA,SPX1,DTX1,AZA1)的快速方法。贝类样品匀质后用85%乙腈水萃取,采用QuEChERS净化技术对其进行富集净化后,用HPLC-MS/MS进行检测。以乙腈-水溶液(2 mmo/L乙酸铵,0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,经C18色谱柱分离,在多反应监测(MRM)模式下扫描。采用标准曲线外标法定量,OA和DTX1的方法检出限为10μg/kg,在1.0~100μg/L范围内线性关系良好;AZA1和SPX1的方法检出限为1.0μg/kg,在1.0~20μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r2)均大于0.999。高、中、低三个添加水平的平均回收率在81.9%~93.1%之间,RSD小于5%。应用该方法对进出口的贻贝、北极贝、象拔蚌、牡蛎等15个样品进行检测,发现5个样品的SPX1测定结果为阳性。该方法操作简便、灵敏度高、重现性好,适用于贝类产品中脂溶性贝类毒素的检测。

关键词： QuEChERS 脂溶性贝类毒素高效液相色谱-串联质谱食用贝类产品

离子交换高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉和鸡肝中的高氯酸盐

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食品科学 2016年第20期37卷 167-171页

作者：邵琳智吴映璇欧阳少伦林峰广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心广东广州510623 广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室广东广州510623

建立测定鸡肉和鸡肝中高氯酸盐的离子交换高效液相色谱-串联质谱法。试样加^(18)O标记高氯酸根离子后采用1%乙酸溶液-乙腈提取,固相萃取柱净化后,经IC-Pak^(TM)Anion HR(4.6 mm×75 mm,6μm)色谱柱分离,以乙腈-100 mmol/L乙酸铵溶液为... 详细信息

建立测定鸡肉和鸡肝中高氯酸盐的离子交换高效液相色谱-串联质谱法。试样加^(18)O标记高氯酸根离子后采用1%乙酸溶液-乙腈提取,固相萃取柱净化后,经IC-Pak^(TM)Anion HR(4.6 mm×75 mm,6μm)色谱柱分离,以乙腈-100 mmol/L乙酸铵溶液为流动相,采用电喷雾离子源串联质谱,在负离子扫描方式下以多反应监测模式检测,内标法定量。结果表明:高氯酸盐在0.2~10μg/L质量浓度范围内线性关系良好,定量限为3.0μg/kg。在3个加标水平下的平均回收率为91.8%~96.0%,相对标准偏差为1.8%~6.5%。该方法操作简便、灵敏度高、抗干扰能力强、回收率和重复性良好,适用于鸡肉和鸡肝中高氯酸盐的测定。

关键词：高氯酸盐同位素稀释技术固相萃取高效液相色谱-串联质谱鸡肉和鸡肝

转基因甜菜品系H7-1的数字PCR定量检测方法

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现代食品科技 2017年第7期33卷 261-269页

作者：刘二龙李婷高东微刘津黄埔出入境检验检疫局广东广州510730 广东检验检疫技术中心广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室广东广州510623

为实现转基因甜菜品系H7-1的标识管理和精准定量,根据H7-1的5’边界序列和甜菜谷氨酰胺合成酶基因(glutamine synthetase,GS)设计引物和探针建立双重数字PCR检测体系。该方法的特异性、灵敏度、精密度和准确度均进行了测试。结果显示:... 详细信息

为实现转基因甜菜品系H7-1的标识管理和精准定量,根据H7-1的5’边界序列和甜菜谷氨酰胺合成酶基因(glutamine synthetase,GS)设计引物和探针建立双重数字PCR检测体系。该方法的特异性、灵敏度、精密度和准确度均进行了测试。结果显示:建立的转基因甜菜H7-1数字PCR检测方法特异于H7-1品系检测,在20μL反应体中H7-1品系特异性序列和内源基因GS的定量下限(limit of quantitation,LOQ)分别为3.1拷贝/μL和6.3拷贝/μL,检测下限(limit of detection,LOD)检出限分别为0.6拷贝/μL和1.3拷贝/μL,精密度和准确度在可接受范围内,该定量方法不依赖于标准曲线建立,可便捷的应用于转基因甜菜H7-1成分的精确定量检测。

关键词：转基因甜菜 H7-1品系数字PCR

高效液相色谱-串联质谱法测定乳制品中的莫奈太尔及其代谢物

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食品科学 2019年第10期40卷 325-330页

作者：吴映璇林峰陈思敏广东检验检疫技术中心广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室广东广州510623

建立测定乳制品中莫奈太尔及其代谢物的高效液相色谱-串联质谱法。试样加水-饱和氯化钠-乙腈溶液提取,正己烷净化,经Inertsil C_8(2.1 mm×100 mm,3μm)色谱柱分离,以甲醇-0.5 mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源... 详细信息

建立测定乳制品中莫奈太尔及其代谢物的高效液相色谱-串联质谱法。试样加水-饱和氯化钠-乙腈溶液提取,正己烷净化,经Inertsil C_8(2.1 mm×100 mm,3μm)色谱柱分离,以甲醇-0.5 mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源串联质谱,在负离子扫描方式下以多反应监测模式检测,外标法定量。结果表明:莫奈太尔及其代谢物在0.1～5.0μg/L范围内线性关系良好,定量限为2.0μg/kg。在3个加标水平下的平均回收率为79.5%～102.9%,相对标准偏差为2.0%～5.3%。该方法操作简便、快速、准确、灵敏度高、抗干扰能力强、回收率和重复性良好,适合于乳制品中莫奈太尔及其代谢物的测定。

关键词：莫奈太尔代谢物高效液相色谱-串联质谱法乳制品

进境美国苹果牛眼果腐病病原真菌(Neofabraea perennans)的鉴定

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果树学报 2016年第4期33卷 457-465页

作者：王卫芳胡佳温庆秋何瑞芳于璇胡学难何日荣广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心广州510623 广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室广州510623 广州出入境检验检疫局广州510623

【目的】探明进境截获的美国苹果牛眼果腐病的病原真菌种类,为评估病菌的入侵风险提供科学依据。【方法】对苹果（Malus domestica）腐烂果实的症状特点、病菌的形态特征与培养特性进行观察,对分离物的致病性和DNA序列进行分析。【结果... 详细信息

【目的】探明进境截获的美国苹果牛眼果腐病的病原真菌种类,为评估病菌的入侵风险提供科学依据。【方法】对苹果（Malus domestica）腐烂果实的症状特点、病菌的形态特征与培养特性进行观察,对分离物的致病性和DNA序列进行分析。【结果】32批次腐烂果实均表现果梗凹腐烂症状,病部较坚硬,病斑圆形褐色,中央色浅形似牛眼状。累计从病果上分离46株菌株,菌落圆形,气生菌丝稀少,白色至乳白色,加深至黄褐色至黑褐色,并形成深浅褐色相间同心轮纹,菌丝体最适生长温度15~20℃,经柯赫法则证实为病原菌。在病果及PDA上,病菌形成奶油色胶质状分生孢子盘,分生孢子梗瓶梗状,大型分生孢子及小型分生孢子圆柱形、直或下部稍弯曲、无色透明、单胞。基于β-微管蛋白基因序列的系统发育分析,8个代表性的分离物与已知的苹果牛眼果腐病菌Neofabraea perennans聚在同一簇。【结论】根据症状学、形态学与致病性及系统发育分析,将屡次从进境美国苹果中截获的苹果牛眼果腐病病原真菌鉴定为Neofabraea perennans,是我国高度关注的进境植物检疫性有害生物,对我国果树的生产存在安全隐患。

关键词：苹果牛眼果腐病蔷薇科 Neofabraea perennans 形态学分子 β-微管蛋白系统发育分析

固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛奶和羊奶中莫奈太尔及其代谢产物残留

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色谱 2018年第8期36卷 752-757页

作者：吴映璇谢敏玲姚仰勋蓝草广东检验检疫技术中心广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室广东广州510623

建立了高效液相色谱-串联质谱快速测定牛奶和羊奶中莫奈太尔及其代谢产物残留量的分析方法。样品经乙腈沉淀蛋白质,中性氧化铝固相萃取柱净化,以Inertsil C8-3(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱分离,甲醇-乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,采... 详细信息

建立了高效液相色谱-串联质谱快速测定牛奶和羊奶中莫奈太尔及其代谢产物残留量的分析方法。样品经乙腈沉淀蛋白质,中性氧化铝固相萃取柱净化,以Inertsil C8-3(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱分离,甲醇-乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾负离子监测模式检测,外标法定量。结果表明,在0.1~5.0μg/L范围内,待测物色谱峰面积与其质量浓度间的线性关系良好(相关系数均大于0.99),定量限为2.0μg/kg。莫奈太尔及其代谢产物在2类基质中3个水平(2.0、50和100μg/kg)下的加标回收率为90.1%~103.3%,相对标准偏差(RSD)为2.0%~6.2%(n=6)。该方法操作简便、快速,灵敏度高,抗干扰能力强,回收率和重复性良好,能够满足牛奶和羊奶中莫奈太尔及其代谢产物残留量的检测要求。

关键词：固相萃取高效液相色谱-串联质谱莫奈太尔代谢产物奶

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食品接触材料中烃类矿物油毒性和风险管理

中国食品卫生杂志 2019年第3期31卷 284-290页

作者：钟怀宁朱蕾卢倩陈燕芬潘静静李丹郑建国广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室广东广州510623 国家食品安全风险评估中心北京100022

烃类矿物油(mineral oil hydrocarbons,MOHs)是一类由多种烃类物质组成的复杂混合物。现阶段,针对烃类矿物油毒理学数据比较缺乏,毒理学动物试验数据能否外推至人体仍存在争议。对饱和烃矿物油(MOSH)的毒性主要关注其生物蓄积性,C16~C35... 详细信息

烃类矿物油(mineral oil hydrocarbons,MOHs)是一类由多种烃类物质组成的复杂混合物。现阶段,针对烃类矿物油毒理学数据比较缺乏,毒理学动物试验数据能否外推至人体仍存在争议。对饱和烃矿物油(MOSH)的毒性主要关注其生物蓄积性,C16~C35的MOSH能在人体和大鼠组织中蓄积并可形成微肉芽肿;而含有3~7个芳香环的芳香烃矿物油(MOAH)具有致突变和致癌性,以及是潜在的内分泌干扰物。欧洲食品安全局指出人群暴露于烃类矿物油的健康风险值得关注。食品接触材料是食品中烃类矿物油污染的重要来源,而由回收纸纤维制作的食品接触纸制品中烃类矿物油污染食品的问题尤为突出。为完善对烃类矿物油的风险管理,应基于化学成分而不是粘度指标,对特定组分烃类矿物油开展毒理学研究和膳食暴露评估。

关键词：矿物油食品接触材料迁移毒性风险管理

TaqMan探针实时荧光PCR快速检测苹果牛眼果腐病菌方法的建立

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植物检疫 2016年第2期30卷 55-62页

作者：林惠娇王卫芳易建平胡学难何日荣蒋湘黄埔出入境检验检疫局广东广州510730 广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室上海出入境检验检疫局

苹果牛眼果腐病菌(Neofabraea malicorticis、***、***和***)是我国检疫性植物病原真菌,为建立该病菌的实时荧光PCR检测法,根据病菌及其近缘种的翻译延伸因子(EF-1α)的保守序列设计了特异性探针,分别以苹果牛眼果腐病菌菌株和本研究构... 详细信息

苹果牛眼果腐病菌(Neofabraea malicorticis、***、***和***)是我国检疫性植物病原真菌,为建立该病菌的实时荧光PCR检测法,根据病菌及其近缘种的翻译延伸因子(EF-1α)的保守序列设计了特异性探针,分别以苹果牛眼果腐病菌菌株和本研究构建的EF-1α重组质粒DNA为阳性标准品检验探针的特异性和灵敏度。结果显示探针MAL-P、PER-P、ALB-P和KIE-P分别对***、***、***和***表现特异性阳性扩增,而与近缘种及其他常见的果腐病菌无交叉反应,单重探针和4种探针混合液的灵敏度分别达1 fg/μL和10 fg/μL DNA。总计从美国、智利、新西兰、法国进境截获的29批可疑病果的分离物中检测到PCR阳性荧光信号,包括20批***、8批***和1批***。该方法在6 h内即可完成整个检测流程,其特异性强、灵敏度高,适用于实际样品中苹果牛眼果腐病菌的快速检测。

关键词：苹果牛眼果腐病菌 Neofabraea属快速检测 Taqman探针实时荧光PCR