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多指标评价阳春砂不同部位的差异性

中国中药杂志 2024年第5期49卷 1217-1224页

作者：黄贵发罗毓钟文峰陈清怡邓成程莫日江林伟雄田清清广东一方制药有限公司广东佛山528244 湖南一方天江药业有限公司湖南常德415000

为研究阳春砂种仁和果壳的质量差异,探讨砂仁去壳使用的合理性,测定原儿茶酸、香草酸、表儿茶素、槲皮苷、挥发油、水浸出物、醇浸出物含量,并采用DPPH、ABTS和羟自由基法评价种仁和果壳的抗氧化活性。以正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-... 详细信息

为研究阳春砂种仁和果壳的质量差异,探讨砂仁去壳使用的合理性,测定原儿茶酸、香草酸、表儿茶素、槲皮苷、挥发油、水浸出物、醇浸出物含量,并采用DPPH、ABTS和羟自由基法评价种仁和果壳的抗氧化活性。以正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)和层次分析(AHP)结合熵权法评价种仁和果壳的质量差异。10个指标在种仁和果壳中均有显著性差异(P<0.05)。表儿茶素、槲皮苷、挥发油在种仁中含量更高;原儿茶酸、香草酸、水浸出物和醇浸出物含量在果壳中含量更高。种仁在DPPH和ABTS自由基上表现更强的清除能力,果壳在羟自由基上表现更好的清除效果。OPLS-DA结果表明种仁和果壳有明显的区分度,且变量投影重要性指标(VIP)筛选出挥发油、水浸出物、DPPH自由基清除率、槲皮苷、ABTS自由基清除率、羟自由基清除率和香草酸为主要差异指标。以AHP法结合熵权法计算得到的综合得分表明种仁质量更优。总体而言,阳春砂种仁质量更佳,但果壳中存在优势成分且有一定的抗氧化功效,故建议砂仁一定程度带壳使用,或将果壳进行其他的开发利用。

关键词：阳春砂不同部位含量测定抗氧化活性综合评价

HPLC-MS/MS法同时测定月季花配方颗粒中10种成分的含量

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中成药 2024年第5期46卷 1435-1440页

作者：李志娇郑振秋张晓博巩长芹临沂市检验检测中心山东临沂276001 齐鲁制药有限公司山东济南250000

目的建立HPLC-MS/MS法同时测定月季花配方颗粒中金丝桃苷、异槲皮苷、没食子酸、鞣花酸、槲皮苷、芦丁、阿福豆苷、萹蓄苷、槲皮素-3-O-6-反式-香豆酰基-β-D-葡萄糖苷、槲皮素3-O-2″-没食子酰基-β-D-葡萄糖苷的含量。方法分析采用Wat... 详细信息

目的建立HPLC-MS/MS法同时测定月季花配方颗粒中金丝桃苷、异槲皮苷、没食子酸、鞣花酸、槲皮苷、芦丁、阿福豆苷、萹蓄苷、槲皮素-3-O-6-反式-香豆酰基-β-D-葡萄糖苷、槲皮素3-O-2″-没食子酰基-β-D-葡萄糖苷的含量。方法分析采用Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱(1.8μm,2.1 mm×150 mm);流动相甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温40℃;电喷雾离子源;负离子扫描;多反应监测模式。结果10种成分在各自范围线性关系良好(r>0.9958),平均加样回收率97.3%~99.6%,RSD 0.8%~2.7%。结论该方法简便快速,灵敏度高,专属性强,可用于月季花配方颗粒的质量控制。

关键词：月季花配方颗粒化学成分含量测定 HPLC-MS/MS

基于化学模式识别对桃仁及其炮制品的差异性研究

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天然产物研究与开发 2024年

作者：郑蓉慧孙冬梅段志文刘晓霞冯涌微位翠杰陈向东李振雨广东一方制药有限公司广州中医药大学

基于超高液相色谱法建立桃仁及其炮制品的指纹图谱及含量测定方法，并结合化学模式识别法比较分析其差异性。采用ACQUITY UPLC HSS T3（150 mm×2.1 mm，1.8 μm）色谱柱，以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱，流速为0.30 mL/min... 详细信息

基于超高液相色谱法建立桃仁及其炮制品的指纹图谱及含量测定方法，并结合化学模式识别法比较分析其差异性。采用ACQUITY UPLC HSS T3（150 mm×2.1 mm，1.8 μm）色谱柱，以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱，流速为0.30 mL/min，柱温为20 ℃，进样体积为2 μL，检测波长为210 nm，建立其指纹图谱及D-苦杏仁苷含量测定方法。采用方差分析（variance analysis，VA）、聚类分析（hierarchical clustering analysis，HCA）和偏最小二乘法-判别分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）对桃仁及其炮制品进行差异性分析。结果显示18批桃仁及其炮制品饮片UPLC指纹图谱相似度均在0.990以上，桃仁和燀桃仁的指纹图谱确认8个共有峰，炒桃仁确认7个共有峰，指认3个成分。通过化学模式识别分析，桃仁及其炮制品之间存在显著性差异，可聚为桃仁、燀桃仁、炒桃仁三类。含量测定结果显示桃仁、燀桃仁、炒桃仁饮片中D-苦杏仁苷含量的平均值分别为3.194%、3.048%、2.250%。本研究所建立的UPLC指纹图谱及含量测定方法专属性强，稳定性高，分离度良好，可用于桃仁、燀桃仁、炒桃仁的鉴别及D-苦杏仁苷含量的准确测定。

关键词：桃仁燀桃仁炒桃仁指纹图谱 D-苦杏仁苷化学模式识别

猪伪狂犬病毒抗体gD-ELISA检测方法建立及其与中和抗体相关性分析

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中国动物传染病学报 2024年

作者：曾梦意黎家明潘静华陈秀巧颜广智刘明杰陈盛楠黄良宗佛山大学佛山市南海东方澳龙制药有限公司广东方道基因生物科技有限公司

为开发一种能测定中和抗体水平并有效评估猪伪狂犬疫苗免疫效果的ELISA试剂盒，本研究创新性采用HEK293T细胞表达的猪伪狂犬病毒（PRV）gD重组蛋白作为包被抗原建立gD-ELISA检测方法。该方法与衣原体（CP）、口蹄疫病毒（FMDV）、猪流... 详细信息

为开发一种能测定中和抗体水平并有效评估猪伪狂犬疫苗免疫效果的ELISA试剂盒，本研究创新性采用HEK293T细胞表达的猪伪狂犬病毒（PRV）gD重组蛋白作为包被抗原建立gD-ELISA检测方法。该方法与衣原体（CP）、口蹄疫病毒（FMDV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪圆环病毒（PCV）、猪乙型脑炎病毒（JEV）、猪细小病毒（PPV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）无交叉反应，特异性好；PR阳性血清稀释64 000倍仍可检出，灵敏性高；批间和批内重复变异系数均小于10.58%，重复性好；与商品化抗体检测试剂盒平行检测180份猪血清样品，总符合率为83.33%；与中和试验结果比较，gD-ELISA符合率均为100%，相关系数r为0.903，相关性更高。本研究建立的gD-ELISA更适合作为中和试验的替代方法，为PRV中和抗体效价检测和疫苗免疫效果评估提供了新工具。

关键词：猪伪狂犬病毒中和抗体 gD-ELISA

基于蛋白质组学和网络药理学探讨小儿化痰止咳颗粒治疗过敏性咳嗽的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：杜友启徐旖旎廖佳佳龙朝文邰诗蝶杜友文李松甘诗泉沈祥春陶玲杨熟英付凌云贵州医科大学贵州省科晖制药有限公司

目的：基于蛋白质组学、网络药理学共同探讨小儿化痰止咳颗粒（XEHT）在治疗过敏性咳嗽（Allergic Cough， AC）可能涉及的药理作用机制。方法：通过腹腔注射1 mL 含2 mg卵蛋白（OVA）和100 mg氢氧化铝的混悬液致敏后，以1% OVA雾化构... 详细信息

目的：基于蛋白质组学、网络药理学共同探讨小儿化痰止咳颗粒（XEHT）在治疗过敏性咳嗽（Allergic Cough， AC）可能涉及的药理作用机制。方法：通过腹腔注射1 mL 含2 mg卵蛋白（OVA）和100 mg氢氧化铝的混悬液致敏后，以1% OVA雾化构建豚鼠过敏性咳嗽模型，随机分为模型组、XEHT低、中、高剂量组(1、5、20 g·kg-1)与孟鲁斯特钠组(1 mg·kg-1)每组6只，正常组6只。给药组按剂量灌胃给予相应药液，正常组和模型组灌胃给予同体积生理盐水，1次/d，连续给药10天后，以1% OVA雾化刺激豚鼠，观察咳嗽次数；苏木精-伊红染色法（HE）染色观察肺组织病理变化；酶联免疫吸附法（ELISA）检测肺泡灌洗液（BALF）中C-反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及血清中免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）的含量；免疫组织化学（IHC）观察肺部组织中IL-6和TNF-α的蛋白表达；透射电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）测定肺组织中IL-6、白细胞介素-1β（IL-1β）、TNF-α的mRNA水平。采用非标记蛋白质组学技术（Label Free）检测各干预组间差异蛋白；网络药理学预测XEHT治疗过敏性咳嗽的作用靶点，将蛋白组学以及网络药理学的结果进行KEGG富集分析并寻找相同的作用通路。结果：与正常组比较，模型组咳嗽次数显著增加（P＜0.01），BALF中CRP、TNF-α含量显著升高、SOD显著降低（P<0.01）、IL-6、MDA明显升高（P＜0.05），血清中IgA、IgG的含量升高（P＜0.05、P＜0.01），肺组织充血及炎症细胞浸润明显，IL-6和TNF-α蛋白表达水平明显升高（P＜0.01），Ⅱ型上皮细胞可见大范围低电子密度水肿区，细胞器明显肿胀、空泡化，胞核固缩或染色质稀疏、溶解，IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA表达水平显著升高（P<0.01），差异有统计学意义；与模型组比较，各给药组咳嗽次数显著减少（P＜0.01）、BALF中CRP、TNF-α、IL-6、MDA含量减少（P<0.05、P<0.01），SOD活性明显增加（P<0.05），孟鲁司特钠、XEHT中剂量组血清IgA、IgG含量不同程度降低（P<0.05、P<0.01），各给药组肺组织充血及炎症细胞浸润及Ⅱ型上皮细胞损伤不同程度缓解，IL-6和TNF-α蛋白表达水平显著降低（P＜0.01），孟鲁司特钠、XEHT中、高剂量组IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA表达减少（P<0.05、P<0.01），XEHT低剂量组IL-6、TNF-α mRNA表达不同程度减少（P<0.05、P<0.01），差异有统计学意义。Phospholipase D、mTOR以及ErbB信号通路在蛋白组学和网络药理学KEGG通路富集中存在交集。结论：蛋白质组学结合网络药理学分析共同揭示了XEHT改善AC的作用与调控Phospholipase D、mTOR以及ErbB信号通路密切相关。

关键词：过敏性咳嗽小儿化痰止咳颗粒蛋白质组学网络药理学作用机制

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化橘红提取物的制备工艺优化及其降脂作用

现代食品科技 2024年

作者：李锦坤金刚亮王艳慧冼少华赵俊鑫余俊朗刘浩帆谭耀康温骏炜熊平华南农业大学材料与能源学院广州市香雪制药股份有限公司国药集团德众(佛山)药业有限公司

采用单因素试验和L9（3～4）正交试验设计法，以加水量、提取次数、提取时间和提取温度为考察对象，以化橘红柚皮苷质量分数和干浸膏质量分数为考察指标，确定化橘红最佳提取工艺参数；并通过饲喂高脂饲料建立混合型高脂血症小鼠模型，... 详细信息

采用单因素试验和L9（3～4）正交试验设计法，以加水量、提取次数、提取时间和提取温度为考察对象，以化橘红柚皮苷质量分数和干浸膏质量分数为考察指标，确定化橘红最佳提取工艺参数；并通过饲喂高脂饲料建立混合型高脂血症小鼠模型，探讨化橘红提取物对实验小鼠高脂血症的降脂作用。结果表明，化橘红水提物的优选制备工艺参数为：以水作为溶媒，料液比1:30，提取温度70℃，提取3次，每次60 min。在此工艺条件下，化橘红水提物柚皮苷质量分数为56.15 mg/g，传统工艺主要以乙醇为溶媒，此工艺可为化橘红水提提供参考。与模型组相比，化橘红高剂量组胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平分别降低了47.11%,36.84%和65.18%，肝指数和Lee's指数显著降低，血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）水平分别降低了56.68%和56.63%，且可以改善肝细胞肿胀变性，减轻脂滴沉积以及脂肪空泡形成。结果说明，化橘红提取物对混合型高脂血症模型小鼠有降脂作用。

关键词：化橘红提取物工艺优化降血脂

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枸橼酸钾酸碱度检测方法的改进

药物分析杂志 2010年第3期30卷 545-546页

作者：黄志远台山市新宁制药有限公司广东台山529200

目的:改进枸橼酸钾酸碱度的检测方法。方法:采用酸度计测定pH值。测定范围为8.0～10.0.结果与结论:与酸碱批示剂法比较.此法准确度高,能直接通过数值判断结果是否符合规定,更加简便快速。

关键词：枸橼酸钾酸碱度酸度计

重组B群脑膜炎球菌疫苗大鼠安全性和免疫原性研究

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中国药学杂志 2024年第2期59卷 118-127页

作者：苏桂民纪国存郭通冀颖龙静王欣惠朱卫华杜琳北京市细菌性疫苗工程技术研究中心北京100176 北京智飞绿竹生物制药有限公司研发中心北京100176

目的对大鼠重复给予重组B群脑膜炎球菌疫苗,考察该创新疫苗的非临床安全性和免疫原性,为临床设计人用剂量及临床毒副反应的监测提供参考依据。方法使用SD大鼠,设计阴性对照组、佐剂对照组、疫苗低剂量组(每只1剂)和高剂量组(每只3剂)... 详细信息

目的对大鼠重复给予重组B群脑膜炎球菌疫苗,考察该创新疫苗的非临床安全性和免疫原性,为临床设计人用剂量及临床毒副反应的监测提供参考依据。方法使用SD大鼠,设计阴性对照组、佐剂对照组、疫苗低剂量组(每只1剂)和高剂量组(每只3剂)4个主试验组及3个卫星组。于第0、3、6、9、12周分别肌肉注射,进行临床观察和解剖观察,并对多种组织脏器进行病理学检查。检测体质量、食量、体温、血细胞计数、凝血功能、血液生化、眼科、T淋巴细胞亚群、细胞因子、血清特异性IgG抗体和杀菌抗体等指标。结果低、高剂量重组B群脑膜炎球菌疫苗均能产生高水平的结合抗体,免疫血清具有较强活性的杀菌抗体。低、高剂量组疫苗可引起大鼠中性粒细胞、单核细胞及淋巴细胞显著升高,血红蛋白和红细胞比容显著降低。与给药相关的改变还表现为血清球蛋白升高,白蛋白降低,与之伴随的A/G值降低。4周恢复期后均可恢复正常。与佐剂和疫苗免疫相关的组织病理学改变为注射局部可见轻微至中度肉芽肿性炎症、急性炎症,坐骨神经外膜单个核细胞/混合细胞浸润、增生,淋巴结髓索浆细胞数目及粒细胞系增多等。结论重组B群脑膜炎球菌疫苗对SD大鼠具有良好的免疫原性和安全性,未见免疫毒性反应,可见与铝佐剂和免疫反应相关的外周血液指标变化以及注射部位炎症。本试验剂量下,重组B群脑膜炎球菌疫苗未见不良反应剂量(no observed adverse effect level, NOAEL)为每只3剂。

关键词：重组B群脑膜炎球菌疫苗大鼠免疫原性安全性

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多肽酰肼偶联法合成戈舍瑞林

合成化学 2024年

作者：张建松李新宇付玉清张利香深圳市健元医药科技有限公司深圳市健翔生物制药有限公司

戈舍瑞林是一种在临床长期应用的促性腺激素释放激素药物，其目前报道的合成路线存在操作复杂、总收率低和重金属残留等缺点。本研究采用羟基树脂为起始树脂，活化成活泼羧酸树脂后与水合肼反应得到NH2NH-CO-OCH2-Resin结构，再依次偶... 详细信息

戈舍瑞林是一种在临床长期应用的促性腺激素释放激素药物，其目前报道的合成路线存在操作复杂、总收率低和重金属残留等缺点。本研究采用羟基树脂为起始树脂，活化成活泼羧酸树脂后与水合肼反应得到NH2NH-CO-OCH2-Resin结构，再依次偶联，得到的肽酰肼树脂用低浓度TFA切割后得到肽酰肼结构，最后用氰酸盐处理得到戈舍瑞林粗品，经过反相制备纯化得到高纯度的戈舍瑞林产品。采用多肽酰肼偶联法经过10次偶联合成戈舍瑞林，有效构建了肽序末端氨基脲结构，并确保D-Ser（t-Bu）侧链上t-Bu不被酸解脱除，所制备的戈舍瑞林总收率为50.11%，纯度为99.78%，最大单杂为0.09%。该方法反应条件温和，解决了重金属残留等问题，同时降低了合成的难度，收率明显提高，具有广泛的实用价值和应用前景。

关键词：戈舍瑞林促性腺激素释放激素酰肼偶联法固相合成多肽