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MDM2通过p53/Bcl-2/Bax轴调控H_(2)O_(2)诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤

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中华急诊医学杂志 2024年第8期33卷 1110-1116页

作者：郑杰陈博文梅鸿刘鑫鑫廖贞亮余琨余虹冯帮海陈淼傅小云覃松遵义医科大学附属医院重症医学科遵义563000 贵州医科大学附属医院重症医学科贵阳550004 遵义市中医院重症医学科遵义563000

目的探索H_(2)O_(2)诱导的氧化损伤时MDM2的功能及与p53的关系。方法使用0.5 mmol/L H_(2)O_(2)建立MLE-12 HALI细胞模型,分为:健康对照组、H_(2)O_(2)损伤组、H_(2)O_(2)+MDM2 overexpressed组、H_(2)O_(2)+MDM2-shRNA组。通过腺病毒载体感染MLE-12细胞过表达、沉默MDM2;采用免疫共沉淀(Co-IP)分析MDM2与p53的相互作用;采用Western blotting检测HALI建模后MDM2、p53、Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平;检测各组细胞凋亡率。结果通过转录组测序后发现p53信号通路与HALI密切相关。与正常组相比,H_(2)O_(2)损伤组MDM2表达较低(P<0.05);与H_(2)O_(2)损伤组相比,MDM2过表达后MLE-12细胞凋亡率降低(P<0.05),p53、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平下降,MDM2、Bcl-2蛋白表达上调(P<0.05)。与H_(2)O_(2)损伤组相比,当MDM2沉默时,细胞凋亡率增加(P<0.05),p53、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平上调,MDM2、Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05)。Co-IP实验显示MDM2与p53蛋白结合。结论这些结果表明,MDM2可通过p53/Bcl-2/Bax轴抑制MLE-12细胞凋亡从而发挥对HALI的保护作用。

关键词：凋亡鼠双微立体基因2 高氧急性肺损伤 p53

粪菌移植抑制NF-κB/NLRP3改善大鼠脓毒症相关脑病

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中华急诊医学杂志 2024年第6期33卷 792-799页

作者：袁晓宇赵红睿王国华徐峰苏州大学附属第一医院急诊医学科苏州215006 南通大学附属医院急诊医学科南通226006 南通大学急诊教研室南通226004 南通大学特种医学研究院南通226019

目的探索粪菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)通过调节肠道菌群对SAE大鼠的神经保护作用。方法30只SD大鼠分为假手术、SAE、SAE+FMT、SAE+FMT+NF-κB激动剂,SAE+FMT+NLRP3激动剂组。通过16S rRNA测序、神经行为学评分、水... 详细信息

目的探索粪菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)通过调节肠道菌群对SAE大鼠的神经保护作用。方法30只SD大鼠分为假手术、SAE、SAE+FMT、SAE+FMT+NF-κB激动剂,SAE+FMT+NLRP3激动剂组。通过16S rRNA测序、神经行为学评分、水迷宫测试、尼氏染色、定量逆转录聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹试验等分析大鼠肠道菌群,神经功能及炎症反应改变。采用SPSS软件对组间多样本行单因素方差分析,进一步两两比较采用Tukey检验。结果①与假手术组相比,SAE大鼠α多样性降低(P<0.01),而FMT治疗后的SAE大鼠的α多样性升高(P<0.05),SAE组有益菌Bacteroidete,Clostridiales相比假手术组减少,FMT后增加。②与假手术组相比,SAE大鼠mNSS降低(P<0.01),学习记忆能力降低(P<0.01),海马CA1区神经元数量减少(P<0.01),而FMT治疗后的SAE大鼠的mNSS评分提高(P<0.01),学习记忆能力增加(P<0.05),神经元数量增加(P<0.05)。③与假手术组相比,SAE组大鼠肝肾功能指标、炎症相关因子、血脑屏障蛋白、NLRP3通路蛋白、NF-κB通路蛋白表达增加(P<0.05),FMT降低以上指标(P<0.05),④NF-κB和NLRP3激动剂干预后抵消了FMT的作用(P<0.05)。结论FMT通过调节肠道菌群并抑制脑内NF-κB/NLRP3信号通路。这为SAE的治疗提供了新的见解,同时强调了在临床治疗中考虑肠道微生物的重要性。

关键词：粪菌移植肠道菌群微生物 NF-κB/NLRP3 脓毒症相关脑病炎症神经保护脑肠轴

晶体液联合血浆进行液体复苏对低蛋白血症脓毒症患者预后的影响

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中华危重病急救医学 2024年第8期36卷 808-812页

作者：许伟伟李晶菁南通大学江苏南通226001 东台市人民医院重症医学科江苏东台224200 南通大学附属医院全科医学科江苏南通226001

目的评估单独使用晶体液和晶体液联合血浆输注两种液体复苏方案对低蛋白血症脓毒症患者预后的疗效差异。方法采用回顾性研究,选取2017年1月至2022年12月江苏省东台市人民医院重症医学科收治的低蛋白血症脓毒症患者作为研究对象,根据入... 详细信息

目的评估单独使用晶体液和晶体液联合血浆输注两种液体复苏方案对低蛋白血症脓毒症患者预后的疗效差异。方法采用回顾性研究,选取2017年1月至2022年12月江苏省东台市人民医院重症医学科收治的低蛋白血症脓毒症患者作为研究对象,根据入院时液体复苏方案分为单一组(单纯使用晶体液)和联合组(晶体液联合血浆)。收集患者一般资料、以及复苏前(入院第1天)及复苏第3天的凝血功能指标。主要研究终点是28 d病死率。将单一组和联合组分别根据复苏时的初始白蛋白水平(30 g/L)进行分层,比较不同白蛋白水平患者28 d病死率的差异。绘制患者28 d Kaplan-Meier生存曲线。结果共纳入164例低蛋白血症脓毒症患者,其中单一组60例,联合组104例。①两组患者年龄、性别、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)、序贯器官衰竭评分(SOFA)、以及复苏前血小板计数(PLT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、D-二聚体、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)、国际标准化比值(INR)、纤维蛋白降解产物(FDP)、血清乳酸(Lac)、白蛋白水平差异均无统计学意义,具有可比性。②联合组第3天PT、AT-Ⅲ水平均较复苏前明显改善,且联合组第3天AT-Ⅲ较单一组改善更明显〔(79.80±17.95)%比(66.67±18.69)%,P0.05〕。白蛋白30 g/L者〔63.1%(41/65)比36.2%(25/69)、36.7%(11/30),均P<0.05〕。④Kaplan-Meier生存曲线分析显示,单一组与联合组28 d累积生存率差异无统计学意义(Log-Rank检验:χ^(2)=2.067,P=0.151)。单一组中位生存率时白蛋白水平为27.1 g/L〔95%可信区间(95%CI)为24.203~29.997〕,联合组为28.7 g/L(95%CI为26.065~31.335)。结论晶体液联合血浆进行液体复苏可以改善低蛋白血症脓毒症患者外源性凝血功能障碍,但不能改善28 d死亡结局。脓毒症患者初始白蛋白水平越高,病死率越低。

关键词：脓毒症液体复苏病毒灭活血浆晶体液低蛋白血症

纳布啡用于重症加强治疗病房非机械通气患者的镇痛效果:多中心随机对照试验

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中华急诊医学杂志 2024年第1期33卷 59-64页

作者：周一刘韶华覃松张国秀芦乙滨段晓光王海旭张瑞芳张曙光罗永刚方宇傅小云陈涛任乐宁孙同文郑州大学第一附属医院急诊医学部郑州450052 遵义医科大学附属医院重症医学科遵义563003 河南科技大学第一附属医院急诊医学部洛阳471003 信阳市中心医院重症医学科信阳464000

目的探讨纳布啡应用于重症加强治疗病房(intensive care unit,ICU)非机械通气患者镇痛的有效性和安全性。方法本研究为多中心随机对照临床试验,选择2018年12月至2021年8月河南省和贵州省共4家医院ICU收治的、有镇痛需求的非机械通气患... 详细信息

目的探讨纳布啡应用于重症加强治疗病房(intensive care unit,ICU)非机械通气患者镇痛的有效性和安全性。方法本研究为多中心随机对照临床试验,选择2018年12月至2021年8月河南省和贵州省共4家医院ICU收治的、有镇痛需求的非机械通气患者为研究对象,按随机数字表法将患者分为纳布啡组与芬太尼组。纳布啡组给予持续静脉泵入纳布啡[0.05~0.20 mg/(kg·h)],芬太尼组给予持续静脉泵入芬太尼[0.5~2.0μg/(kg·h)],镇痛目标为重症监护疼痛观察量表(critical-care pain observation tool,CPOT)评分0.05)。纳布啡组与芬太尼组用药后各时间点CPOT评分比较差异无统计学意义(P>0.05),两组用药后各时间点CPOT评分均较用药前明显降低,且用药后2 h均可达到镇痛目标并维持。两组用药后各时间点RASS评分比较差异无统计学意义(P>0.05),均较用药前明显降低,用药后2 h达到目标镇静效果。纳布啡组与芬太尼组患者ICU住院时间差异无统计学意义[5.0(4.0,7.5)d vs.5.0(4.0,8.0)d,P=0.504]。纳布啡组患者谵妄、恶心呕吐、腹胀、瘙痒、眩晕等不良事件发生率低于芬太尼组(均P0.05)。纳布啡组患者呼吸抑制发生率与芬太尼组差异无统计学意义(P>0.05),但需要机械通气比例明显低于芬太尼组[1.9%(2/105)vs.8.6%(9/105),P=0.030]。结论纳布啡可用于ICU非机械通气患者的镇痛,2 h可达到目标镇痛效果,且具有一定镇静作用,不良反应发生率低。

关键词：纳布啡芬太尼镇痛镇静不良事件

脓毒症大鼠血小板受体CD62P的表达及替格瑞洛的心脏保护作用

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中华急诊医学杂志 2024年第2期33卷 172-178页

作者：郭沛雨郭飞黄海单亮青岛大学附属医院重症医学科青岛266061 青岛大学医学部青岛266061

目的探讨脓毒症大鼠血小板受体CD62P表达情况以及替格瑞洛的抗炎作用及其对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用。方法采用SD雄性大鼠32只,以随机数字表法将大鼠分为4组:假手术组(sham)、脓毒症组(cecal ligation and puncture,CLP)、低剂量... 详细信息

目的探讨脓毒症大鼠血小板受体CD62P表达情况以及替格瑞洛的抗炎作用及其对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用。方法采用SD雄性大鼠32只,以随机数字表法将大鼠分为4组:假手术组(sham)、脓毒症组(cecal ligation and puncture,CLP)、低剂量给药组(low dose,LD):给药剂量为10 mg/kg、高剂量给药组(high dose,HD):给药剂量为50 mg/kg,每组8只。假手术组大鼠仅进行开关腹并剥离盲肠处理,脓毒症组、低剂量给药组和高剂量给药组的大鼠采用CLP法构建脓毒症大鼠模型,给药组分别按照10 mg/kg及50 mg/kg用量进行替格瑞洛灌胃给药,假手术组及脓毒症组则按照1 mL/kg进行生理盐水灌胃处理。分别于手术前12 h及手术后12 h两次对大鼠进行灌胃给药。各组大鼠造模后24 h经腹主动脉取血并采集病理标本。应用流式细胞术检测各组大鼠血小板表面受体CD62P的表达情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测IL-6、TNF-α水平;检测心肌损伤标志物:CKMB、LDH水平;并检测转氨酶、肌酐、白细胞水平;对心肌组织进行HE染色观察病理形态;通过TUNEL法观察心肌细胞凋亡情况。结果①流式结果可见与sham组相比,CLP组的CD62P表达水平明显增加(P<0.01),两组给药组与CLP组相比CD62P的表达水平均明显降低,HD组更为显著(P<0.01)。②ELISA结果显示与sham组相比CLP组的IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.01),HD组较CLP组显著降低(P<0.05),LD组IL-6水平下降不明显。CLP组的TNF-α水平与sham组相比明显升高(P<0.01)。③CLP组和两组替格瑞洛干预组与sham组相比,CKMB和LDH的表达水平均有显著增加(P<0.01),给药组与CLP组相比CKMB、LDH均有明显下降(P<0.05),HD组下降更明显(P<0.01)。;④与sham组相比,CLP组大鼠血WBC,ALT,CR值升高明显,而使用替格瑞洛进行干预后,大鼠的WBC、ALT、CR值下降明显(P<0.05),且差异与剂量明显相关。⑤病理结果显示:sham组心肌细胞形态正常,CLP组心肌细胞损伤最重,LD组及HD组心肌细胞损伤较CLP组明显减轻。⑥Tunel染色显示与Sham组可见的少量阳性细胞比较,CLP组可见大量被染色的阳性细胞,LD组和HD组心肌细胞凋亡与CLP组相比明显减少。结论脓毒症激活血小板,刺激CD62P的过度表达,进而诱导炎症反应的过度激活,引起心肌细胞的凋亡和损伤,导致脓毒性心肌损伤;替格瑞洛的心脏保护作用可能与抑制血小板活化后CD62P表达的减少有关,且CD62P的表达与替格瑞洛之间存在剂量依赖关系。

关键词：脓毒症 CD62P P选择素替格瑞洛心肌损伤血小板血小板受体脓毒性心肌病

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重症超声在重症相关操作中应用专家共识

中华内科杂志 2024年第5期63卷 439-461页

作者：张青刘丽霞霍焱张宏民晁彦公曾琴兵司向岑仲然朱然尚秀玲尹万红段军张丽娜刘志勇朱英何伟武钧蔡书翰陈文劲吕立文任宏张建许强宏朱炜华孙建华刘海涛艾山木张萌鲁梅珊王小亭中国医学科学院、北京协和医学院、北京协和医院重症医学科北京100730 河北医科大学第四医院重症医学科石家庄050010 清华大学第一附属医院重症医学科北京100016 中山大学附属第一医院重症医学科广州361003 南方医科大学珠江医院重症医学科广州510260 中国医科大学附属第一医院重症医学科沈阳110001 福建省立医院重症医学科福州350001 四川大学华西医院重症医学科成都610041 中日友好医院重症医学科北京100029 中南大学湘雅医院重症医学科长沙410008 杭州市第一人民医院重症医学科杭州310020 首都医科大学附属北京同仁医院重症医学科北京100176 上海交通大学医学院附属瑞金医院重症医学科上海200025 武汉大学中南医院重症医学科武汉430071 首都医科大学宣武医院神经外科ICU 北京100053 广西壮族自治区人民医院急诊科南宁530016 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心重症医学科上海200127 浙江医院重症医学科杭州310013 昆明医科大学第二附属医院重症医学科昆明650101 哈尔滨医科大学第三医院重症医学科哈尔滨150040 重庆市急救医疗中心、重庆大学附属中心医院急诊部重庆400014 重庆市人民医院、重庆大学附属人民医院重症医学科重庆401121

重症医学的发展伴随着重症相关操作,重症相关操作亦使重症医学得到更深入的发展。通过相关操作可使临床医生了解重症患者的病理生理学,重症相关操作在重症相关诊断、治疗中均起到积极的作用。但重症相关操作带来医源性损伤不容忽视,有... 详细信息

重症医学的发展伴随着重症相关操作,重症相关操作亦使重症医学得到更深入的发展。通过相关操作可使临床医生了解重症患者的病理生理学,重症相关操作在重症相关诊断、治疗中均起到积极的作用。但重症相关操作带来医源性损伤不容忽视,有些操作会产生严重的后果。随着近年来重症超声在重症医学科的快速发展,重症超声有其独特的优势,具有无创、床旁、可视化、无辐射、可重复、易学等优点,已在临床广泛应用。为更好地规范重症相关操作,北京重症超声研究会重症超声研究组组织了重症相关专家撰写本共识,旨在提高临床医护工作者重症相关操作水平,减少相关并发症。

关键词：重症医学重症超声重症相关操作共识

体外膜肺氧合辅助心肺复苏启动和终止的时间特征分析

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中华急诊医学杂志 2024年第7期33卷 926-932页

作者：张华忠陈旭锋张忠满梅勇胡德亮孙峰李伟张刚吕金如南京医科大学第一附属医院急诊与危重症医学科南京210029

目的调查分析体外膜肺氧合辅助心肺复苏(extracorporeal cardiopulmonary resuscitation,ECPR)启动和终止的时间特征。方法回顾性分析南京医科大学第一附属医院体外生命支持中心2015年4月至2023年10月收治的ECPR患者的资料,以90 d存活/... 详细信息

目的调查分析体外膜肺氧合辅助心肺复苏(extracorporeal cardiopulmonary resuscitation,ECPR)启动和终止的时间特征。方法回顾性分析南京医科大学第一附属医院体外生命支持中心2015年4月至2023年10月收治的ECPR患者的资料,以90 d存活/死亡、院内心脏骤停/院外心脏骤停(out-of-hospital/in-hospital cardiac arrest,IHCA/OHCA)比例、日间/夜晚时段启动、是否程序性终止进行分组,比较年龄、性别、查尔森合并症指数、院际联动、初始心律、ECPR初始血气pH和乳酸值、无灌流时间、心脏骤停至ECMO(extracorporeal membrane oxygenation)转流时间(CA-Pump On时间)、ECPR启动/终止和ECMO治疗时间、90 d存活率等的差异。结果200例ECPR患者纳入分析,心源性病因占70.5%,男性多于女性,90 d存活68例(34.0%),其中61例(89.7%)神经功能预后良好。90 d存活组的无灌流时间显著低于死亡组,ECPR初始血气pH值高、乳酸值低,且IHCA和初始可电击心律的比例高。OHCA组的无灌流时间显著高于IHCA组,ECPR初始血气pH值低、乳酸值高,77.4%为非程序性终止,90 d存活率16.1%。⑷各时间段均有ECPR启动,IHCA-ECPR随机启动,OHCA-ECPR凌晨启动少,启动时间对ECPR结局无明显影响。有75.5%的ECPR在日间时段终止ECMO,56.8%的死亡病例发生在ECPR后的3 d内,程序性终止组有19.0%的患者因综合因素死亡。结论对IHCA、初始可电击心律和无灌流时间短的患者实施ECPR具有潜在高获益。ECPR启动时间无规律且对结局无影响,死亡事件易发生在ECPR启动后的早期,ECPR终止时间多集中在日间工作时段,应加强全天候ECPR团队的建设。

关键词：体外膜肺氧合辅助心肺复苏启动和终止时间特征回顾性分析

光甘草定调控NETs抑制细胞焦亡缓解脓毒症肺损伤机制

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中华急诊医学杂志 2024年第2期33卷 179-185页

作者：杨铃清马辰东王雷王敏李增亮张利鹏内蒙古医科大学附属医院重症医学科呼和浩特010050

目的探讨传统中药光甘草定对脓毒症肺损伤中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)形成及细胞焦亡影响。方法将24只雄性Wistar大鼠,按照随机数字表法分为3组:脓毒症组采用盲肠结扎穿孔术(cecalligation and puncture... 详细信息

目的探讨传统中药光甘草定对脓毒症肺损伤中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)形成及细胞焦亡影响。方法将24只雄性Wistar大鼠,按照随机数字表法分为3组:脓毒症组采用盲肠结扎穿孔术(cecalligation and puncture,CLP)建立脓毒症大鼠模型;光甘草定组(CLP+GLA)行CLP及光甘草定灌胃(30 mg/kg);假手术组(Sham)行盲肠探查术,仅进行盲肠翻动后关腹。12 h后留取血浆、肺泡灌洗液及肺组织标本检测。测定肺泡灌洗液蛋白含量;测定肺组织湿重/干重(W/D)比值;用苏木精-伊红(HE)染色后观察肺组织病理学改变;用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血浆中NETs标志物MPO-DNA复合物水平、焦亡相关炎症因子IL-18、IL-1β的表达水平;Western blot技术检测大鼠肺组织Caspase-1及Cleaved-caspase-1焦亡蛋白的变化。结果脓毒症组肺泡灌洗液总蛋白浓度较假手术组明显升高(P<0.01),光甘草定组肺泡灌洗液总蛋白浓度较脓毒症组下降(P<0.05)。脓毒症组肺水肿程度明显加重,光甘草定组较脓毒症组肺水肿减轻。光镜下观察肺组织病理结果显示:假手术组小鼠肺组织结构正常,肺泡清晰;脓毒症组肺泡壁广泛增厚,炎性细胞明显浸润;光甘草定组较脓毒症组肺组织损伤明显减轻。ELISA显示:脓毒症组血浆中NETs标志物MPO-DNA复合物水平和炎症因子IL-18、IL-1β含量较假手术组明显升高(P<0.001),光甘草定组NETs标志物MPO-DNA复合物水平和炎症因子IL-18、IL-1β炎症因子表达水平较脓毒症组均显著降低(MPO-DNA:P<0.01;IL-18、IL-1β:P<0.05)。Western blot技术结果显示:与假手术组大鼠相比,脓毒症组大鼠肺组织中Caspase-1及Cleaved-caspase-1蛋白阳性信号表达增强;光甘草定组肺组织Caspase-1阳性细胞分布与假手术组相似,Cleaved-caspase-1阳性信号表达高于假手术组。结论光甘草定通过抑制NETs生成及细胞焦亡,有效减轻肺部炎症,发挥对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用。

关键词：光甘草定中性粒细胞胞外诱捕网细胞焦亡脓毒症肺损伤

脑脊液葡萄糖及乳酸水平与创伤后癫痫的相关性研究

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中华急诊医学杂志 2024年第8期33卷 1197-1201页

作者：张丽楠王磊林乐清杭州师范大学附属医院重症医学科杭州310015

创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)是发生创伤后癫痫(post-traumatic epilepsy,PTE)的主要原因[1]。TBI后PTE患病率从1.3%到53.3%不等,随着TBI的严重程度增加,癫痫发作的风险也显著增加,但发生癫痫的潜伏期可以维持数年[2]。PT... 详细信息

创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)是发生创伤后癫痫(post-traumatic epilepsy,PTE)的主要原因[1]。TBI后PTE患病率从1.3%到53.3%不等,随着TBI的严重程度增加,癫痫发作的风险也显著增加,但发生癫痫的潜伏期可以维持数年[2]。PTE可以进一步加重脑水肿,因此,PTE发作不仅是TBI后早期发病率和病死率增加的原因,也是晚期导致患者死亡的主要原因[3]。目前临床上的预防主要用于单次发生的急性PTE,对于复发性慢性癫痫效果较差。尽管给予预防性治疗但仍有15%~40%的TBI患者伴随有慢性癫痫发作[4]。由于脑脊液提供了血液、炎症、感染以及退行性疾病的信息,可以对脑代谢有一些了解,具有一定的预后价值[5-6]。因此,本研究目的是寻找TBI后发生PTE的危险因素,以及脑脊液中葡萄糖与乳酸水平对PTE的预测价值。

关键词：预防性治疗乳酸水平脑代谢创伤性脑损伤预后价值脑脊液退行性疾病脑水肿