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慢性乙型肝炎患者外周血CD8+T淋巴细胞表面程序性死亡受体-1表达上调的意义

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中华肝脏病杂志 2008年第9期16卷 706-707页

作者：叶翩翁志宏张淑玲赵雷董继华庞然华中科技大学同济医学院附属协和医院传染科华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室

程序性死亡受体-1(PD-1)主要表达于活化的淋巴细胞和单核细胞,尤其是体内活化的T淋巴细胞表面,负性调节其活化、增殖和细胞因子的产生,使人类免疫缺陷病毒(HIV)、HCV、HBV等慢性感染过程中患者的病毒特

关键词：肝炎，乙型，慢性 T淋巴细胞，细胞毒性程序性死亡受体-1

AT富集序列特异性结合蛋白1在人膀胱移行细胞癌组织中的表达及其与上皮间质转化的关系

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中华实验外科杂志 2013年第6期30卷 1145-1148页

作者：吴晓飞朱朝辉万锋成超邢诗安华中科技大学同济医学院附属协和医院外科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室武汉430022

目的观察AT富集序列特异性结合蛋白1（SATBl）与上皮一间质转化（EMT）相关基因在人膀胱移行细胞癌中的表达，探讨SATB1与EMT相关基因表达与膀胱癌病理分级、临床分期及淋巴结转移的关系。方法分别用免疫组织化学和实时定量逆转录聚合... 详细信息

目的观察AT富集序列特异性结合蛋白1（SATBl）与上皮一间质转化（EMT）相关基因在人膀胱移行细胞癌中的表达，探讨SATB1与EMT相关基因表达与膀胱癌病理分级、临床分期及淋巴结转移的关系。方法分别用免疫组织化学和实时定量逆转录聚合酶链反应（RT—qPCR）检测82例膀胱癌组织标本中的SATB1、E-钙黏蛋白（E—cadherin）及Snail的表达，每例标本均选用癌组织中心、癌旁组织，并选择癌组织远端正常黏膜作为对照。结果免疫组织化学显示SATB1、E—cadherin及Snail在膀胱各组标本的阳性表达率分别为：膀胱癌为90．24％、18．29％、80．49％，癌旁组织为17．07％、79．27％、30．49％，正常膀胱组织为8．54％、91．46％、15．85％，SATB1和Snail阳性表达率在膀胱癌组明显高于癌旁组织和正常膀胱组织组，E—cadhefin阳性表达率膀胱癌组明显低于癌旁组织和正常膀胱组织组，各组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；SATBl、E—cadhefin及Snail在膀胱癌不同病理分级中的阳性表达率分别为G．组76．19％、23．81％、61．90％，G，组92．00％、20．00％、76．00％，G，组97．22％、13．89％、94．44％，差异有统计学意义（P〈0．05）；在膀胱癌不同临床分期中，SATBl、E—cadherin及Snail阳性表达率分别为：Tis～T．组为78．00％、24．24％、66．67％，T2～T4组为97．96％、14．29％、89．80％；在淋巴结转移组和非淋巴结转移组的阳性表达率为92．86％、25．00％、96．43％、88．89％、14．81％、72．22％，随着临床分期的增高和淋巴结转移的出现，SATBl和Snail表达水平逐渐升高，E—cadherin表达水平逐渐降低，各组间差异有统计学意义（P〈0．05）；RT—qPCR结果显示，SATBl和Snail基因在膀胱癌中的表达明显高于癌旁组织和正常膀胱黏膜组织，而E-cadherin在膀胱癌中的表达明显低于癌旁组织和正常膀胱黏膜组织，各组差异有统计学意义（P〈0．05），与免疫组织化学结果相符。结论SATBl和EMT相关基因表达异常与膀胱癌的分级、分期和淋巴结转移密切相关，SATBl表达与E—cadherin表达呈负相关，与Snail呈正相关，SATBl可能通过诱导EMT调节膀胱移行上皮癌的侵袭和转移过程。

关键词：膀胱移行细胞癌上皮-间质转化 AT富集序列特异性结合蛋白1 E-钙黏蛋白

大黄素对急性淤胆型肝炎模型大鼠的治疗作用及机制

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中华医学杂志 2009年第10期89卷 699-703页

作者：丁艳赵雷黄志华梅红董海峰董继华华中科技大学同济医学院附属妇女儿童医疗保健中心消化科武汉430016 华中科技大学同济医学院附属协和医院感染科华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科

目的初步探讨大黄素对急性淤胆型肝炎模型大鼠的治疗作用及机制。方法SD大鼠分为5组：大黄素组、熊去氧胆酸组、地塞米松组、模型组、正常对照组，各24只。除正常对照组外，其余4组均给予α-异硫氰酸萘酯（ANIT）50mg／kg一次灌胃大鼠... 详细信息

目的初步探讨大黄素对急性淤胆型肝炎模型大鼠的治疗作用及机制。方法SD大鼠分为5组：大黄素组、熊去氧胆酸组、地塞米松组、模型组、正常对照组，各24只。除正常对照组外，其余4组均给予α-异硫氰酸萘酯（ANIT）50mg／kg一次灌胃大鼠建立淤胆型肝炎动物模型，并给予相应的药物干预。造模后24、48、72h3个时间点采集标本（每时间点8只），检测肝功能和肝脏病理学检查。实时荧光定量PCR检测肝组织中细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子1（CINC-1）、巨噬细胞炎症蛋白2（MIP-2）mRNA表达，Western印迹法检测肝组织中细胞间黏附分子1（ICAM-1）蛋白表达。结果大黄素组24、48、72h各时问点总胆红素[TB，（32．8±3．7）μmol／L、（61．0±16．4）μmol／L、（10．8±4．5）μmol／L]，直接胆红素[DB，（26．03±3．10）μmol／L、（49．40±18．16）μmol／L、（8．04±3．03）μmol／L]，丙氨酸氨基转移酶[ALT，（314±50）U／L、（664±97）U／L、（200±60）U／L]均明显低于模型组（均P〈0．05），天冬氨酸氨基转移酶（AST）48、72h时间点、碱性磷酸酶（ALP）48h、γ-谷氨酰转移酶（GGT）72h、总胆汁酸（TBA）48、72h时间点均明显低于同时间点模型组（均P〈0．05）；TB24、48h，DB、ALT24h，TBA24h[（204±55）μmol／L]、72h，均明显低于同时间点熊去氧胆酸组（均P〈0．05）；TB、TBA24、48h，ALT、AST、GGT各时间点，时间点均明显低于同时间点地塞米松组（均P〈0．05）。各时间点大黄素组的CINC-1、MIP-2mRNA表达和ICAM．1蛋白表达水平均明显低于同时间点模型组（均P〈0．05）。结论大黄素治疗ANIT诱导的急性淤胆型肝炎模型大鼠的作用以降低TB、DB、ALT最为显著，起效比熊去氧胆酸快，其对ALT、AST、GGT、TBA的作用优于地塞米松。其作用机制可能与抑制CINC-1、MIP-2、ICAM．1的活化有关。

关键词：大黄素肝炎动物炎症趋化因子类细胞黏附分子

雷公藤内酯醇对多发性骨髓瘤U266细胞组蛋白去甲基化酶的调节作用

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中草药 2012年第10期43卷 1975-1980页

作者：文璐陈燕曾令兰杨立靖易莎张纯华中科技大学同济医学院附属协和医院血液科湖北武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室湖北武汉430022

目的研究雷公藤内酯醇对多发性骨髓瘤U266细胞组蛋白去甲基化酶的影响,探讨其表观遗传调控作用。方法采用MTT法检测细胞增殖活性;Annexin V-FITC/PI双标法流式细胞术检测细胞凋亡;RT-PCR法检测U266细胞组蛋白赖氨酸去甲基化酶1(LSD1)mRN... 详细信息

目的研究雷公藤内酯醇对多发性骨髓瘤U266细胞组蛋白去甲基化酶的影响,探讨其表观遗传调控作用。方法采用MTT法检测细胞增殖活性;Annexin V-FITC/PI双标法流式细胞术检测细胞凋亡;RT-PCR法检测U266细胞组蛋白赖氨酸去甲基化酶1(LSD1)mRNA、组蛋白去甲基化酶(JMJD2B)mRNA表达的变化;激光共聚焦显微技术观察LSD1亚细胞定位情况及蛋白量的变化;Western blotting法检测在雷公藤内酯醇干预下LSD1和JMJD2B蛋白表达的变化。结果雷公藤内酯醇以剂量、时间相关方式抑制U266细胞增殖,与细胞培养24 h的IC50为153.2 nmol/L;以剂量相关方式诱导U266细胞凋亡,雷公藤内酯醇80 nmol/L作用U266细胞24 h后,细胞出现典型的凋亡形态学改变,总凋亡率达32.9%。;以剂量相关方式抑制JMJD2B蛋白的表达,同时促进LSD1蛋白表达。结论雷公藤内酯醇在抑制U266细胞增殖、诱导其凋亡的同时,明显改变LSD1、JMJD2B的表达,其诱导U266细胞凋亡和抗肿瘤效应可能与其调节LSD1、JMJD2B表达有关。

关键词：雷公藤内酯醇多发性骨髓瘤U266细胞细胞凋亡细胞增殖组蛋白去甲基化酶表观遗传

Corilagin对小鼠小胶质细胞株照射后炎性反应因子表达的抑制作用

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中华放射医学与防护杂志 2010年第6期30卷 682-686页

作者：罗鸣伍钢范丽张瑞光任精华董继华董晓荣华中科技大学同济医学院附属协和医院肿瘤中心武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室

目的研究抗炎药物Corilagin抑制放射引起小胶质细胞（BV-2）炎性反应的作用及其防护的分子机制.方法细胞抑制实验（MTT）检测Corilagin对BV-2细胞的抑制率;Corilagin预处理小胶质细胞,12 h后,以0和32 Gy 2个放射剂量照射BV-2细胞,Real... 详细信息

目的研究抗炎药物Corilagin抑制放射引起小胶质细胞（BV-2）炎性反应的作用及其防护的分子机制.方法细胞抑制实验（MTT）检测Corilagin对BV-2细胞的抑制率;Corilagin预处理小胶质细胞,12 h后,以0和32 Gy 2个放射剂量照射BV-2细胞,Real-time PCR检测小胶质细胞照射后不同时间点炎性反应因子IL-1β、TNF-α表达水平;硝酸还原酶法检测细胞上清液中一氧化氮（NO）的含量;Western blot检测各组细胞核转录因子NF-κB p65蛋白表达;激光共聚焦显微镜观察各组细胞标志物Iba-1的表达、NF-κB p65核转位及Nemo的表达.结果 1～10μg/ml浓度范围内Corilagin对BV-2细胞增殖几乎无影响;照射后小胶质细胞表面标志物Iba-1表达明显,提示小胶质细胞激活,且炎性反应因子NO、TNF-α、IL-1β表达上调,而Corilagin（5μg/ml）可以显著抑制上述炎性反应因子的表达（tIL-1β=6.341,tTNF-α=3.411,tNO=3.134,P＜0.05）;Corilagin可抑制NF-κB活化蛋白Nemo,并显著抑制NF-κB p65的转位.结论 Corilagin可能通过NF-κB信号转导途径抑制照射后小胶质细胞的活化,从而下调炎性反应因子表达,保护神经元.

关键词： Corilagin 小胶质细胞 NF-κB 放射性脑损伤

43例以血栓形成为首发表现的恶性肿瘤临床回顾

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中西医结合研究 2022年第5期14卷 323-325页

作者：王伟仙周樊华杨盛力黄早早华中科技大学同济医学院附属协和医院感染科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院中医科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院肿瘤中心武汉430022 华中科技大学同济医学院附属梨园医院杨春湖社区卫生服务中心武汉430077

目的分析以血栓形成为早期临床表现的恶性肿瘤临床特点,以期提高临床医师对恶性肿瘤的早期诊断与治疗能力。方法回顾性分析854例肿瘤合并血栓的住院患者,筛选出43例血栓确诊早于肿瘤的患者,根据血栓的流行病学及危险因素分析,选取相... 详细信息

目的分析以血栓形成为早期临床表现的恶性肿瘤临床特点,以期提高临床医师对恶性肿瘤的早期诊断与治疗能力。方法回顾性分析854例肿瘤合并血栓的住院患者,筛选出43例血栓确诊早于肿瘤的患者,根据血栓的流行病学及危险因素分析,选取相关临床指标,对这部分患者进行分层分析。另外将43例患者列入A组(即以血栓为首发症状的肿瘤患者),另将811例患者列入B组(即肿瘤合并血栓患者),分析比较2组患者基线特征及实验室检查等方面的数据。结果 A组患者(43例)经病理学确诊为恶性肿瘤。其中40~60岁占53.5%,肺癌为例数最多的瘤种,为20例(46.5%);43例患者中,Ⅳ期患者超过半数,为31例(72.1%);病理类型以腺癌为主,肿瘤确诊时间大多是在确诊血栓1个月内。60.5%患者均为多个部位血栓形成,其中,下肢部位血栓发生率最高,为20.9%。数据分析结果显示,A组患者的红细胞、血小板、D-二聚体高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论临床上如遇不明原因的静脉血栓形成患者,尤其是年龄40~60岁,多个部位血栓形成,且红细胞、血小板、D-二聚体水平明显增高者,应高度警惕恶性肿瘤的可能性,可考虑进行肿瘤筛查。

关键词：恶性肿瘤静脉血栓久病必瘀

人pre-miR-145真核表达载体的构建及其对胃癌细胞游走、侵袭活性的影响

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中华实验外科杂志 2011年第4期28卷 571-573页

作者：张桓瑜梁铸林郑丽端童强松董继华华中科技大学同济医学院附属协和医院外科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院病理科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室武汉430022

目的构建人微小RNAl45（miR-145）前体的真核表达载体，探讨其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法根据人pre-miR-145序列，合成两条互补的寡核苷酸链，退火后连接人pPG-miR-EGFP载体，转化扩增后进行测序鉴定；重组质粒在阳离子脂质体Lip... 详细信息

目的构建人微小RNAl45（miR-145）前体的真核表达载体，探讨其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法根据人pre-miR-145序列，合成两条互补的寡核苷酸链，退火后连接人pPG-miR-EGFP载体，转化扩增后进行测序鉴定；重组质粒在阳离子脂质体Lipofectamine2000的介导下，瞬时转染人胃癌细胞株SGC-7901，实时定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞中miR．145表达水平，黏附实验和Transwell小室实验检测癌细胞游走、侵袭能力。结果所构建的pPG—miRl45-EGFP载体中插入基因片段与设计序列完全匹配；重组质粒转染SGC．7901细胞后，miR-145表达分别上调20．45倍（P〈0．01），细胞黏附能力分别下降51．5％（P〈0．01），细胞侵袭能力分别下降30．4％（P〈0．01）。结论成功构建人pre—miR-145真核表达载体，转染胃癌细胞过表达后，能抑制癌细胞的游走和侵袭能力。

关键词：微小RNA145 胃癌表达载体

丹参酮ⅡA抑制电离辐射诱导胶质BV-2细胞激活的实验研究

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中华放射医学与防护杂志 2010年第5期30卷 535-539页

作者：董晓荣董继华张瑞光范丽刘莉张涛伍钢华中科技大学同济医学院附属协和医院肿瘤研究中心武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室武汉430022

目的探讨丹参酮ⅡA能否抑制电离辐射诱导小胶质细胞激活及其机制.方法用1.0μg/ml丹参酮ⅡA处理小胶质细胞12 h,体外接受137Cs γ射线照射2、4、8、16和32 Gy后,用实时PCR检测致炎因子的变化,Western blot检测NF-κB p65表达的变化,... 详细信息

目的探讨丹参酮ⅡA能否抑制电离辐射诱导小胶质细胞激活及其机制.方法用1.0μg/ml丹参酮ⅡA处理小胶质细胞12 h,体外接受137Cs γ射线照射2、4、8、16和32 Gy后,用实时PCR检测致炎因子的变化,Western blot检测NF-κB p65表达的变化,免疫荧光染色及共聚焦显微镜检测γ-H2AX和p65的表达变化.结果 16和32 Gy照射后小胶质细胞激活,形态学上从静息状态下的小胞体多突起转变为放疗后胞体变圆和突起皱缩,并释放致炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6、IFN-γ和COX-2与对照组相比,分别上调（5.0±0.60）、（2.1±0.20）、（2.4±0.25）、（1.6±0.30）和（3.6±0.50）倍（P＜0.05）.丹参酮ⅡA能明显减少致炎细胞因子IL-1β、IL-6、IFN-γ和COX-2的释放,与对照组相比,分别为（2.3±0.10）、（1.8±0.20）、（0.3±0.30）、（0.2±0.10）（t=5.56,P＜0.05）.Western blot分析提示,接受8和16 Gy电离辐射后,NF-κB的亚单位p65在细胞核的表达显著增加,而使用丹参酮ⅡA后可以减低电离辐射后p65在细胞核的表达;免疫荧光染色提示在未照射组p65表达于细胞质,电离辐射后p65转位至细胞核,而使用丹参酮ⅡA后可以抑制电离辐射后p65的核转位,使其表达于细胞质.结论电离辐射后迅速引起一系列的分子内信号传导,通过DNA双链断裂（DSB）触发信号传导激活NF-κB信号通路;丹参酮ⅡA可以抑制电离辐射后NF-κB信号通路下调致炎因子表达,从而抑制小胶质细胞激活.

关键词：电离辐射 DNA双链断裂小胶质细胞炎性反应丹参酮ⅡA

核苷类似物早期病毒学应答慢性乙型肝炎患者血清sTRAIL水平变化及意义

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中国免疫学杂志 2010年第2期26卷 174-177页

作者：魏屏王华曾令兰朱励华中科技大学同济医学院附属协和医院感染科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院传染病实验室武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室武汉430022

目的:探索核苷类似物早期病毒学应答慢性乙型肝炎患者(CHB)血清sTRAIL水平变化及意义。方法:60例CHB均接受核苷类似物抗病毒药物治疗(拉米夫定或替比夫定),根据治疗24周末HBVDNA水平将患者分为完全病毒学应答组、部分病毒学应答组、无... 详细信息

目的:探索核苷类似物早期病毒学应答慢性乙型肝炎患者(CHB)血清sTRAIL水平变化及意义。方法:60例CHB均接受核苷类似物抗病毒药物治疗(拉米夫定或替比夫定),根据治疗24周末HBVDNA水平将患者分为完全病毒学应答组、部分病毒学应答组、无病毒学应答组,设正常对照组。采集治疗前、治疗4、12、24周末患者的血清,检测血清sTRAIL水平,同时检测IFN-γ、ALT水平。结果:患者治疗前sTRAIL、IFN-γ及ALT水平均较正常对照组升高(P<0.05或P<0.01)。sTRAIL水平在完全应答组治疗4周末、部分应答组治疗12周末下降。与治疗前比,差异均有统计学意义(P<0.05),在治疗4周末完全应答组sTRAIL水平低于同期部分应答组(P<0.05)。IFN-γ水平在完全应答组治疗4周末、部分应答组治疗12周末升高,与治疗前比差异均有统计学意义(P<0.05),但完全应答组IFN-γ水平在治疗4周末与同期部分应答组差异无统计学意义。ALT水平在三组的治疗过程中均逐步下降,各时间点间差异均有统计学意义(p<0.05)。完全应答组治疗前sTRAIL水平与IFN-γ水平、ALT水平呈正相关(P<0.01),治疗后sTRAIL水平与IFN-γ水平呈负相关(P<0.05)。结论:CHB血清sTRAIL水平升高;核苷类似物抗病毒治疗早期病毒学应答者血清sTRAIL水平下降,尤其是完全应答者在疗程的第4周就有明显的变化。sTRAIL在CHB免疫损伤中起重要作用,在其核苷类似物抗病毒治疗免疫恢复中也起重要作用,可作为核苷类似物治疗CHB早期应答指标预测远期疗效。

关键词： TRAIL 慢性乙型肝炎核苷类似物早期应答