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市售婴幼儿配方奶粉和婴幼儿米粉中梭状芽胞杆菌的分离和综合鉴定分析

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中国食品卫生杂志 2024年第4期36卷 433-439页

作者：陆峥刘玉竹张鹏航张诣陈倩张晓媛北京市疾病预防控制中心营养与食品卫生所北京市预防医学研究中心食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室北京100013

目的对57件市售婴幼儿配方奶粉、50件婴幼儿米粉进行梭状芽胞菌分离鉴定分析及毒素基因检测,获得梭状芽胞杆菌的污染水平数据,并评估各鉴定方法。方法通过分离菌株的生长特性、革兰染色、普通显微镜下形态特征等表型特征,应用微生物飞... 详细信息

目的对57件市售婴幼儿配方奶粉、50件婴幼儿米粉进行梭状芽胞菌分离鉴定分析及毒素基因检测,获得梭状芽胞杆菌的污染水平数据,并评估各鉴定方法。方法通过分离菌株的生长特性、革兰染色、普通显微镜下形态特征等表型特征,应用微生物飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)、16S rRNA基因测序技术、全基因组测序技术对分离菌株进行综合鉴定,通过PCR对分离的梭状芽胞杆菌进行肉毒毒素基因检测,对肉毒毒素基因PCR阳性片段进行测序和比对分析。结果57份市售婴儿配方奶粉中有26份样品中检出38株梭状芽胞杆菌,其中9份样品中同时检出超过两种细菌。50份市售婴幼儿米粉中有5份样品检出5株梭状芽胞杆菌。奶粉中分离的一株楔形梭菌E型肉毒梭菌毒素基因PCR扩增阳性,扩增片段测序比对结果显示这段序列并不是E型肉毒梭菌毒素基因,全基因组测序结果也证实。43株梭状芽胞杆菌均未检出肉毒梭菌的毒素基因。结论梭状芽胞杆菌鉴定需要多种方法的综合分析。市售婴幼儿配方奶粉、婴幼儿米粉中存在梭状芽胞杆菌的污染,应加强婴幼儿配方食品中重要梭状芽胞杆菌的监测,为风险评估提供数据支持。

关键词：梭状芽胞杆菌婴幼儿配方奶粉婴幼儿米粉肉毒毒素基因食源性致病菌

超高效液相色谱-串联质谱法测定进口冷链食品外包装表面的三聚氰酸

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中国食品卫生杂志 2023年第12期35卷 1715-1721页

作者：姚凯张晶张昕邵兵北京市疾病预防控制中心食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室北京100013

目的建立用于测定进口冷链食品外包装表面的三聚氰酸的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)分析方法。方法以50%乙腈水溶液作为提取溶剂,对样品进行振荡提取,离心后取上层清液进样,采用Waters ACQUITY BEH HILIC(2.1×100 mm,1.7μm)... 详细信息

目的建立用于测定进口冷链食品外包装表面的三聚氰酸的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)分析方法。方法以50%乙腈水溶液作为提取溶剂,对样品进行振荡提取,离心后取上层清液进样,采用Waters ACQUITY BEH HILIC(2.1×100 mm,1.7μm)色谱柱进行分离,乙腈和10 mmol/L醋酸铵水溶液作为流动相等梯度洗脱,UHPLC-MS/MS检测三聚氰酸。结果方法线性良好(相关系数>0.9990),检出限和定量限分别为5.0~20.0和20.0~50.0μg/kg,低、中和高添加水平下的平均回收率为80.0%~96.6%,日内和日间相对标准偏差均低于12.3%。结论建立的方法前处理过程简便,回收率和灵敏度高且精密度良好,适用于进口冷链食品包装外表面三聚氰酸的检测。

关键词：进口冷链食品外包装三聚氰酸超高效液相色谱串联质谱

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定小麦制品中4种交链孢霉毒素

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中国食品卫生杂志 2019年第1期31卷 35-40页

作者：王硕孙灵利刘烨安阳张向明邵兵北京市朝阳区疾病预防控制中心北京100021 北京市疾病预防控制中心食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室北京100013

目的建立测定4种小麦制品(挂面、馒头、面包和饼干)中4种交链孢霉毒素的超高效液相色谱-串联质谱法。方法 4种小麦制品加入NaCl后,经酸化乙腈提取,固相萃取柱(SPE)净化后,以HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)为分析柱,以0.15 mmol/L... 详细信息

目的建立测定4种小麦制品(挂面、馒头、面包和饼干)中4种交链孢霉毒素的超高效液相色谱-串联质谱法。方法 4种小麦制品加入NaCl后,经酸化乙腈提取,固相萃取柱(SPE)净化后,以HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)为分析柱,以0.15 mmol/L碳酸氢铵水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,以负离子电喷雾模式电离(ESI^-),多反应离子监测(MRM)方式进行定性及定量检测,外标法定量。结果在0.040～50μg/L的线性范围内,4种交链孢霉毒素的回归方程均呈良好的线性关系,相关系数(r)>0.99。交链孢菌酮酸、交链孢酚、腾毒素和交链孢酚单甲醚的方法检出限分别为0.10、0.01、0.03和0.01μg/kg,3个加标水平的回收率为85.7%～102%,相对标准偏差(RSD)为0.8%～11.0%。应用该方法对流通环节的挂面、馒头、面包和饼干进行检测,4种交链孢霉毒素均有检出,其浓度为0.02～185.00μg/kg。结论该方法灵敏度高、简便,适用于小麦制品中多种交链孢霉毒素的同时测定。

关键词：交链孢霉毒素小麦制品超高效液相色谱-串联质谱霉菌毒素食品污染物

北京市食源性金黄色葡萄球菌耐药及分子分型研究

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中国食品卫生杂志 2014年第5期26卷 428-434页

作者：王迪张晓嫒陈倩陆峥王丽丽北京市疾病预防控制中心营养与食品卫生所食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室北京100013

目的分析北京市食源性金黄色葡萄球菌对常用抗生素的耐药情况及其分子分型特征,预防和控制由该菌引起的食源性疾病,为临床合理用药提供依据。方法收集2010—2012年北京地区食源性致病菌监测网分离到的金黄色葡萄球菌187株,采用微量肉汤... 详细信息

目的分析北京市食源性金黄色葡萄球菌对常用抗生素的耐药情况及其分子分型特征,预防和控制由该菌引起的食源性疾病,为临床合理用药提供依据。方法收集2010—2012年北京地区食源性致病菌监测网分离到的金黄色葡萄球菌187株,采用微量肉汤稀释法检测金黄色葡萄球菌对8种常用抗生素的敏感性。采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型。结果 116株金黄色葡萄球菌表现出对抗生素耐药,耐药率为62.03%,对抗生素的耐药率为红霉素(ERY)45.45%、苯唑西林(OXA)27.81%、克林霉素(CLI)20.86%、四环素(TET)13.90%、氯霉素(CHL)11.76%、环丙沙星(CIP)6.42%、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑(TPM/SMZ)5.88%。其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)52株、对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)135株。分离到的MRSA中34株菌表现出多重耐药。全部菌株共分为129种PFGE带型,优势带型不明显。结论食源性金黄色葡萄球菌的耐药和多重耐药普遍存在,PFGE带型分布分散与耐药谱的关联性较差。

关键词：金黄色葡萄球菌耐药微量肉汤稀释法脉冲场凝胶电泳食源性致病菌分子分型

毛细管电泳技术在疾病预防控制领域的应用、发展与挑战

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色谱 2020年第9期38卷 999-1012页

作者：林长缨丁晓静北京市疾病预防控制中心食物中毒溯源技术北京市重点实验室北京市预防医学研究中心北京100013

自1989年出现商品化的仪器以来,毛细管电泳(CE)技术在多个应用领域都取得了长足的进步与发展,重复性和准确性方面也有很大提升。能力验证样品分析的满意结果也显示了CE具备法规要求的准确定量能力。在疾病预防控制领域(简称“疾控”)CE... 详细信息

自1989年出现商品化的仪器以来,毛细管电泳(CE)技术在多个应用领域都取得了长足的进步与发展,重复性和准确性方面也有很大提升。能力验证样品分析的满意结果也显示了CE具备法规要求的准确定量能力。在疾病预防控制领域(简称“疾控”)CE也展现出很多独具特色的应用,成为不可或缺的技术之一。在聚合酶链式反应产物分析、核酸序列测定、DNA变异和分型分析、食源性致病微生物分析及疫苗分析等工作中CE发挥了重要作用。应对突发疫情或公共卫生事件如食物中毒时,除了通过非靶标分析尽快锁定目标物外,还需要对大量样品做出快速而准确的分析,高通量和高灵敏的CE就十分适合解决这一问题。在公共卫生理化检验以确保食品、保健食品、特殊医学用途食品、化妆品和消毒产品等的安全中,CE也发挥了不可或缺的作用。作为一种使用较少危险化学品的环境友好方法,在需要按照标准或规范进行的疾控实验室常规检测中,CE仍受制于标准方法的缺失,未能发挥其应有的作用。但简单、快速、经济、耐用、高效的CE分离一旦与高灵敏通用检测器联用,必将更加从容地应对疾控领域中的各种挑战,发挥更大的作用。本文综述了2010~2019年CE在疾控领域的应用,分析了CE在疾控领域发展的机遇和挑战,对CE在疾控领域的发展前景进行了展望。

关键词：毛细管电泳核酸病原微生物疫苗疾病预防控制能力验证食物中毒应急分析

北京市食源性耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌的分子特征研究

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中国卫生检验杂志 2014年第22期24卷 3286-3288页

作者：王迪张晓嫒陈倩陆峥王丽丽北京市疾病预防控制中心营养与食品卫生所食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室北京100013

目的分析近年来北京市食品中对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)的脉冲场凝胶电泳(PFGE)图谱特征。方法收集2010年-2012年北京地区食品中分离到的金黄色葡萄球,采用微量肉汤稀释法进行耐药检测,对分离到的MRSA进行PFGE分型。结果 52... 详细信息

目的分析近年来北京市食品中对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)的脉冲场凝胶电泳(PFGE)图谱特征。方法收集2010年-2012年北京地区食品中分离到的金黄色葡萄球,采用微量肉汤稀释法进行耐药检测,对分离到的MRSA进行PFGE分型。结果 52株对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌对其他抗生素耐药率为红霉素(ERY)53.85%;四环素(TET)23.08%;克林霉素(CLI)23.08%;氯霉素(CHL)9.62%;甲氧苄啶/磺胺甲恶唑(TPM/SMZ)9.62%;环丙沙星(CIP)1.92%。其中34株菌表现为多重耐药,占MRSA菌株65.38%,表现出16种耐药谱。52株对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌共分为34种PFGE带型,优势带型不明显。结论北京市食源性MRSA的耐药谱多样,多重耐药普遍存在。PFGE带型分布广泛,菌株PFGE带相同但耐药谱存在差异,而耐药谱相同的菌株中带型间又存在差异,两者间未表现出相关性。

关键词：食品金黄色葡萄球菌抗生素耐药脉冲场凝胶电泳

2014—2018年北京市人源性肠致病性大肠埃希菌耐药特征及分子特征研究

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中国食品卫生杂志 2019年第4期31卷 371-374页

作者：王丽丽张寻陈倩北京市疾病预防控制中心食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室北京100013 北京市预防医学研究中心北京100013

目的了解北京市门诊腹泻病例肠致病性大肠埃希菌(enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)分离株抗生素敏感性情况及分子分型特征。方法采用微量肉汤稀释法对2014—2018年北京市门诊腹泻病例EPEC分离株进行8类14种抗生素敏感性检测。参... 详细信息

目的了解北京市门诊腹泻病例肠致病性大肠埃希菌(enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)分离株抗生素敏感性情况及分子分型特征。方法采用微量肉汤稀释法对2014—2018年北京市门诊腹泻病例EPEC分离株进行8类14种抗生素敏感性检测。参照PulseNet中非O157大肠埃希菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型方法,对不同区县不同采样时间分离的菌株采用随机抽样原则,对140株菌基因组经限制性内切酶XbaⅠ酶切后进行分子分型和聚类分析。结果2014—2018年北京市门诊腹泻病例EPEC分离株总耐药率为84.8%(391/461),氨苄西林、四环素、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑耐药率较高,分别为66.4%(294/443)、54.0%(249/461)、45.6%(210/461)。461株菌分为200种耐药谱,耐3类及3类以上抗生素的菌株数达249株(54.0%),有1株菌对7类12种抗生素耐药。常见耐药谱为萘啶酸耐药,占4.3%(20/461)。环丙沙星、萘啶酸、四环素、亚胺培南耐药率和耐药谱种类呈逐年缓慢上升趋势。其中140株菌共产生136种PFGE带型,带型分布较为分散,无优势带型,菌株之间的相似系数为53.3%~100.0%。结论2014—2018年北京市腹泻病例EPEC耐药情况严重,耐药谱复杂广泛,多重耐药菌株及耐药谱种类呈逐年增多趋势。菌株的基因型呈多态性分布。

关键词：患者肠致病性大肠埃希菌耐药性脉冲场凝胶电泳分子分型

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北京市食源性沙门菌血清型和分子特征研究

中国卫生检验杂志 2013年第16期23卷 3177-3180页

作者：张晓嫒骆海朋王迪王丽丽陆峥陈倩北京市疾病预防控制中心营养与食品卫生所食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室北京100013

目的分析近年来北京市食源性沙门菌的血清型和脉冲场凝胶电泳(PFGE)图谱特征。方法对2004年-2010年北京市自食品中分离到的100株沙门菌进行血清分型和PFGE分型。结果 100株沙门菌共分为25个血清型,其中位居前三位的血清型是肠炎沙门菌... 详细信息

目的分析近年来北京市食源性沙门菌的血清型和脉冲场凝胶电泳(PFGE)图谱特征。方法对2004年-2010年北京市自食品中分离到的100株沙门菌进行血清分型和PFGE分型。结果 100株沙门菌共分为25个血清型,其中位居前三位的血清型是肠炎沙门菌、德尔卑沙门菌和阿贡纳沙门菌,分别占18%,17%,10%。在分离来源上90%的沙门菌分离自肉类制品。100株菌共分为62种PFGE带型,带型分布较为分散,优势带型不明显。其中肠炎沙门菌共有9种PFGE带型,其优势带型为***0003;德尔卑沙门菌共有11种PFGE带型,其优势带型为***0001和***0032。PFGE图谱的聚集性与沙门菌的血清型有一定的联系,相同血清型沙门菌的PFGE带型聚集成簇。结论北京市食源性沙门菌的血清型和PFGE带型分布广泛,生肉制品是其主要的来源。

关键词：食品沙门菌血清型脉冲场凝胶电泳

一例孕产妇单核细胞增生李斯特菌感染的溯源调查及发病机制探讨

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中国食品卫生杂志 2022年第2期34卷 287-291页

作者：肖贵勇马晓曼王佳佳王焱焱赵敬敬訾天琪陈倩北京市丰台区疾病预防控制中心北京100071 北京市疾病预防控制中心北京市预防医学研究中心食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室北京100013

目的针对一例孕产妇李斯特菌病开展病例调查和溯源分析,探讨感染来源和单增李斯特菌病的发病机制,为防控李斯特菌病提供依据。方法开展现场流行病学调查,收集病例信息,采集病例血液标本、家庭冰箱内食品及厨房环境样本、家庭附近农贸市... 详细信息

目的针对一例孕产妇李斯特菌病开展病例调查和溯源分析,探讨感染来源和单增李斯特菌病的发病机制,为防控李斯特菌病提供依据。方法开展现场流行病学调查,收集病例信息,采集病例血液标本、家庭冰箱内食品及厨房环境样本、家庭附近农贸市场的食品样本,针对不同来源样本中的单增李斯特菌进行检测。结果病例经常食用从农贸市场购买的中式凉拌菜(5~7次/周),在家自制或二次加工中式凉拌菜。其家庭冰箱冷藏室储存食物生熟不分,且生食水果在冰箱中出现腐烂现象。厨房的两块菜板生熟不分、清洗消毒不及时,厨房操作面存在交叉污染。检测结果显示,11份样本中共分离出3株单增李斯特菌,1株来自该病例的血液标本,2株来自厨房冰箱内食品涂抹和菜板涂抹。提示该病例由于食用污染食品导致感染并通过胎盘屏障感染胎儿。结论本起事件是丰台区首次在食品和环境中尝试溯源单增李斯特菌病的感染来源。病例家庭冰箱内生肉和胡萝卜、厨房环境涂抹样本中均检出单增李斯特菌,明确了食品与环境交叉污染导致病例单增李斯特菌感染发病;医院的早期识别及处置是避免新生儿不良结局出现的重要保障。

关键词：单增李斯特菌交叉污染感染途径发病机制

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