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茯苓多糖提取物调控CYP2E1及NF-κB炎症通路改善小鼠酒精性肝病

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中国中药杂志 2022年第1期47卷 134-140页

作者：姜悦航张越王妍妍张文馨王梦文刘超群彭代银俞年军王雷陈卫东安徽中医药大学安徽合肥230012 中药复方安徽省重点实验室安徽合肥230012 中药饮片制造新技术与研发安徽省重点实验室安徽合肥230012 安徽省中医药科学院药物制剂研究所安徽合肥230012

建立酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)模型,研究茯苓多糖(Poria cocos polysaccharides,PCP)提取物对ALD小鼠细胞色素P4502E1(CYP2E1)及核因子κB(NF-κB)炎症信号通路的影响,探讨其对ALD的保护作用及机制。60只SPF级雄性C57BL/6N小鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组(联苯双酯200 mg·kg^(-1))、茯苓多糖低剂量组(50 mg·kg^(-1))、茯苓多糖高剂量组(200 mg·kg^(-1)),建立Gao-binge模型并给药。观察肝脏形态及病理学变化,计算脏器指数,检测各组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,试剂盒分别测定小鼠肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,ELISA法检测白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,免疫荧光染色观察巨噬细胞激活情况,Western blot分析主要代谢酶CYP2E1及Toll样受体4(TLR4)、磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白的表达。与模型组相比,PCP给药组可显著改善肝组织病理损伤情况。免疫荧光结果显示,与模型组相比,给药组肝组织炎性巨噬细胞数量减少,并且各给药剂量组ALT、AST、MDA、IL-6、TNF-α的含量显著降低(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.01)。茯苓多糖提取物对小鼠酒精性肝损伤具有保护作用,其机制可能是调控代谢酶CYP2E1的表达和抑制TLR4/NF-κB炎症信号通路,减轻氧化应激和炎症损伤,抑制ALD的发展。

关键词：茯苓多糖酒精性肝病 CYP2E1 NF-κB

UPLC-QE-MS结合UPLC表征绿萼梅不同发育时期的成分差异及抗氧化活性研究

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天然产物研究与开发 2023年第11期35卷 1915-1928页

作者：吴瑞杨亚湉钱程程张伟欧金梅安徽中医药大学药学院中药饮片制造新技术安徽省重点实验室合肥230012 道地药材国家重点实验室北京100700

梅花为蔷薇科植物梅Prunus mume(Sieb.)Sieb.et Zucc.的干燥花蕾,绿萼梅为临床入药的主要品种。该研究为明确不同发育时期绿萼梅的化学组成及差异,采用超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱质谱(UPLC-QE-MS)检测其化学组成,共检测得到328... 详细信息

梅花为蔷薇科植物梅Prunus mume(Sieb.)Sieb.et Zucc.的干燥花蕾,绿萼梅为临床入药的主要品种。该研究为明确不同发育时期绿萼梅的化学组成及差异,采用超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱质谱(UPLC-QE-MS)检测其化学组成,共检测得到328个化合物,包含67个黄酮、50个苯丙素、104个萜类、26个酚类、24个生物碱、11个有机酸及其衍生物、8个氨基酸衍生物及其他38个化合物。半定量结果显示绿萼梅中主要化学成分的含量随发育时期呈逐渐下降趋势。采用紫外-可见分光光度法对不同发育时期绿萼梅样品中总黄酮和总苯丙素含量进行测定,采用UPLC法测定不同发育时期8个指标性成分(新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、异绿原酸B、槲皮苷)含量,分析结果表明花蕾期与全开期之间成分含量差异显著,绿原酸可作为不同发育时期之间的差异质量标志物。DPPH自由基清除法检测不同发育时期绿萼梅的抗氧化活性,结果表明抗氧化能力与其成分含量密切相关,且随着花的发育逐渐减弱。该文结果可为梅花的化学成分动态变化规律和最佳采收期的确定提供分析方法和数据支撑。

关键词：绿萼梅发育时期黄酮苯丙素抗氧化活性绿原酸

超高效液相色谱-串联质谱法测定知母主根和须根中18种成分

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中国实验方剂学杂志 2020年第17期26卷 126-133页

作者：邵志愿黄琪吴德玲张伟李露廖延武安徽中医药大学药学院安徽省现代中药重点实验室合肥230012 中药饮片制造新技术安徽省重点实验室安徽亳州236816

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法分析知母主根和须根中螺甾皂苷类(知母皂苷AⅠ,知母皂苷AⅡ,知母皂苷AⅢ,知母皂苷Ⅲ,菝葜皂苷元),呋甾皂苷(新知母皂苷BⅡ,知母皂苷BⅡ,知母皂苷BⅢ,知母皂苷Ⅰa,知母皂苷Ⅰ,知母皂苷C,知母皂苷E),黄... 详细信息

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法分析知母主根和须根中螺甾皂苷类(知母皂苷AⅠ,知母皂苷AⅡ,知母皂苷AⅢ,知母皂苷Ⅲ,菝葜皂苷元),呋甾皂苷(新知母皂苷BⅡ,知母皂苷BⅡ,知母皂苷BⅢ,知母皂苷Ⅰa,知母皂苷Ⅰ,知母皂苷C,知母皂苷E),黄酮(淫羊藿次苷Ⅰ,宝藿苷Ⅰ),双苯吡酮(新芒果苷、芒果苷、异芒果苷),氢醌糖苷(β-熊果苷)5类共18种成分的方法,从而分析不同来源知母主根和须根差异性,为知母资源可持续发展提供参考。方法:取样品0.25 g用稀乙醇25 mL回流提取30 min,色谱分离采用Waters ACQUITY UPLC?BEH HILIC C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相0.1%甲酸水-乙腈,梯度洗脱,体积流量0.2 mL·min-1。采用电喷雾离子源(ESI+,ESI-),多反应离子监测(MRM)进行检测,利用外标法计算知母样品中所测成分的含量,通过SMICA14.1软件对知母主根和须根样品间的差异进行分析。结果:所测成分在各自的线性范围内呈良好的线性关系,精密度、重复性、稳定性良好,加样回收率在95.22%~101.42%,RSD均实验结果表明,以18种成分为主成分进行多元统计分析时,知母主根与须根有较大差异。结论:该研究为知母须根资源再利用和知母质量控制提供了实验依据。

关键词：知母主根知母须根超高效液相色谱-串联质谱法

黄精多糖理化性质及其对D-半乳糖诱导小鼠氧化损伤的保护作用

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食品工业科技 2023年第18期44卷 425-433页

作者：刘旺白金波张王娟刘春阳李木子张金和徐国兵解松子安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 中药研究与开发安徽省重点实验室安徽合肥230012 中药饮片制造新技术安徽重点实验室安徽合肥230012 安徽省食品药品检验研究院安徽合肥230012

本研究从黄精根茎部位提取、分离纯化一种均一多糖组分,分析其理化性质和对氧化损伤的保护作用,并探讨其潜在的保护机制。采用水提醇沉、DEAE-纤维素阴离子交换柱与Sephadex G-100凝胶层析柱从黄精根茎提取、分离得到均一多糖组分PSP。... 详细信息

本研究从黄精根茎部位提取、分离纯化一种均一多糖组分,分析其理化性质和对氧化损伤的保护作用,并探讨其潜在的保护机制。采用水提醇沉、DEAE-纤维素阴离子交换柱与Sephadex G-100凝胶层析柱从黄精根茎提取、分离得到均一多糖组分PSP。采用苯酚硫酸法、间羟基联苯法、高效凝胶渗透色谱和傅里叶红外光谱等分析PSP的理化性质,并通过D-半乳糖诱导氧化损伤小鼠模型探究PSP的体内抗氧化作用。结果表明,PSP的碳水化合物含量为94.42%±14.73%,其分子量为5566.41 Da,含有β型的呋喃环或吡喃环果糖,以及较长的支链和较多的分支。与模型组相比,PSP高剂量组血清、脑组织、肝脏组织的SOD、GSH-Px与T-AOC水平显著升高(P<0.05),MDA水平显著降低(P<0.05);HE染色发现PSP处理组的肝脏损伤明显得到改善,且肝脏中Nrf2和HO-1的表达显著增强(P<0.05)。因此,结果表明黄精多糖PSP可能通过Nrf2/HO-1信号通路保护小鼠的氧化损伤。

关键词：黄精多糖分离纯化 D-半乳糖氧化损伤

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知母须根中1个新的二苯甲酮类化合物

中国中药杂志 2019年第7期44卷 1392-1396页

作者：廖振东许凤清吴德玲张伟黄琪安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 现代中药安徽省重点实验室安徽合肥230012 中药饮片制造新技术安徽省重点实验室安徽合肥230012

采用硅胶、Sephadex LH-20结合高压半制备高效液相色谱技术研究知母Anemarrhena asphodeloides的须根中的化学成分。通过理化性质和波谱数据鉴定了5个化合物:methyl 2-[2,4-dihydroxy-3-(4-hydroxybenzoyl)-6-methoxypheyl]acetate(1)、4-[formyl-5-(methoxymethyl)-1H-pyrrol-1-yl] butanoate(2)、川芎哚(3)、丁香脂酚-4′-β-D-葡萄糖苷(4)和4′,6-dihydroxy-4-methoxybenzophenone-2-O-(2″),3-C-(1″)-1″-desoxy-α-L-fructofuranoside(5)。其中化合物1为新化合物,化合物2～5均为首次从该植物中得到。并检测新化合物1对H_2O_2诱导的SH-SY5Y细胞损伤的神经保护活性。

关键词：知母须根化学成分 SH-SY5Y细胞

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS和网络药理学探究茯苓抗乳腺癌作用机制

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天然产物研究与开发 2022年第10期34卷 1764-1773页

作者：孙明杰王妍妍姚亮王雷吕婷婷郝丽君张越陈卫东安徽中医药大学药学院省部共建安徽道地中药材品质提升协同创新中心中药资源保护与开发研究所中药复方安徽省重点实验室中药饮片制造新技术安徽省重点实验室合肥230012 直接口服中药饮片亳州市重点实验室亳州236000

本研究结合UPLC-Q-TOF-MS/MS技术和网络药理学探究茯苓抗乳腺癌的作用机制,并通过细胞实验初步验证。基于UPLC-Q-TOF-MS/MS数据获取茯苓活性成分37个,通过数据库获取成分靶点301个。联合GEO数据库筛选出乳腺癌差异基因725个,进而获得茯... 详细信息

本研究结合UPLC-Q-TOF-MS/MS技术和网络药理学探究茯苓抗乳腺癌的作用机制,并通过细胞实验初步验证。基于UPLC-Q-TOF-MS/MS数据获取茯苓活性成分37个,通过数据库获取成分靶点301个。联合GEO数据库筛选出乳腺癌差异基因725个,进而获得茯苓治疗乳腺癌的潜在作用靶点30个。PPI分析发现茯苓抗乳腺癌主要作用于PPARG、PPARA等靶点。KEGG富集分析发现其发挥作用主要与PPAR信号通路相关。分子对接显示,核心成分与核心靶点对接稳定,且核心成分相应碳链上的羧基、羟基及酯基是靶点结合的主要功能基团。细胞验证实验结果表明,茯苓提取物能明显抑制乳腺癌细胞的增殖与迁移,同时降低细胞中乳酸含量;细胞免疫荧光结果表明PPARG蛋白主要分布在细胞核上,且经茯苓提取物刺激后荧光强度明显增强。综上,初步研究茯苓对乳腺癌的多靶点、多通路治疗作用,其机制可能与调节PPARG等靶点,抑制肿瘤细胞增殖及迁移,影响肿瘤细胞代谢等有关。

关键词：茯苓乳腺癌网络药理学 UPLC-Q-TOF-MS/MS 作用机制

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菟丝子本草考证

中药材 2022年第2期45卷 476-484页

作者：汪小莉张雨婷张影麻泽芊程冉冉金传山吴德玲安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 中药饮片制造新技术安徽省重点实验室安徽合肥230012

菟丝子为常用中药,历代本草记载含菟丝子的中药方剂多以酒浸、酒渍、酒蒸为主,而2020年版中国药典记载菟丝子炮制方法为盐炙。近年来,关于菟丝子的品名、基原、产地等方面已多有研究,但有关菟丝子炮制的研究目前尚不完善。本研究以历代... 详细信息

菟丝子为常用中药,历代本草记载含菟丝子的中药方剂多以酒浸、酒渍、酒蒸为主,而2020年版中国药典记载菟丝子炮制方法为盐炙。近年来,关于菟丝子的品名、基原、产地等方面已多有研究,但有关菟丝子炮制的研究目前尚不完善。本研究以历代本草为基础,结合植物形态和调查研究,对其品名、基原、产地、采收时间等进行整理,在此基础上对其炮制方法进行系统考证,正本清源。本文可为菟丝子的进一步研究开发和利用提供理论参考。

关键词：菟丝子本草考证基原采收时间炮制加工

UPLC-MS/MS同时测定白芷中34种植物生长调节剂残留量

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中国现代应用药学 2023年

作者：褚悟男李翔韩玲玲蒲婧哲翟宏焱王浩张亚中国家药监局中药质量研究与评价重点实验室(合肥) 中药饮片制造新技术安徽省重点实验室安徽中医药大学药学院安徽省食品药品检验研究院

目的基于UPLC-MS/MS建立同时测定白芷中34种植物生长调节剂的残留量的分析方法。方法样品通过乙腈高速匀浆提取,不使用净化方法直接进样,采用Waters Acquity UPLC HSS T3(2.1 mm×150 mm,1.8μm)色谱柱,流动相0.1%甲酸水溶液含10 mmol... 详细信息

目的基于UPLC-MS/MS建立同时测定白芷中34种植物生长调节剂的残留量的分析方法。方法样品通过乙腈高速匀浆提取,不使用净化方法直接进样,采用Waters Acquity UPLC HSS T3(2.1 mm×150 mm,1.8μm)色谱柱,流动相0.1%甲酸水溶液含10 mmol·L-1甲酸铵(A)-乙腈(B),用基质匹配标液外标法进行定量。结果 34种植物生长调节剂在基质中的线性关系良好,相关系数均>0.995,检出限为0.01～9.26μg·kg-1,平均回收率为72.4%～100.6%,RSD均<15%。采用该法对35批白芷样品中的植物生长调节剂残留情况进行筛查。结论建立的植物生长调节剂多残留检测方法灵敏度高,准确性好,有针对性,且前处理简单快速,可用于筛查和检测白芷中植物生长调节剂多残留量。

关键词：植物生长调节剂白芷残留量超高效液相色谱-串联质谱法

UHPLC-MS/MS同时测定白芷中34种植物生长调节剂残留量

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中国现代应用药学 2023年第6期40卷 783-791页

作者：褚悟男李翔韩玲玲蒲婧哲翟宏焱王浩张亚中安徽中医药大学药学院合肥230012 安徽省食品药品检验研究院合肥230051 国家药监局中药质量研究与评价重点实验室合肥230051 中药饮片制造新技术安徽省重点实验室合肥230051

目的基于UHPLC-MS/MS建立同时测定白芷中34种植物生长调节剂残留量的分析方法。方法样品通过乙腈高速匀浆提取,浓缩后直接进样,采用Waters Acquity UPLC HSS T3(2.1 mm×150 mm,1.8μm)色谱柱,流动相0.1%甲酸水溶液含10 mmol·L^(–1)... 详细信息

目的基于UHPLC-MS/MS建立同时测定白芷中34种植物生长调节剂残留量的分析方法。方法样品通过乙腈高速匀浆提取,浓缩后直接进样,采用Waters Acquity UPLC HSS T3(2.1 mm×150 mm,1.8μm)色谱柱,流动相0.1%甲酸水溶液含10 mmol·L^(–1)甲酸铵(A)-乙腈(B),用基质匹配标液外标法进行定量。结果34种植物生长调节剂在基质中的线性关系良好,相关系数均>0.995,检出限为0.01~9.26μg·kg^(-1),平均回收率为72.4%~100.6%,RSD均<15%。采用该法对35批白芷样品中的植物生长调节剂残留情况进行筛查,其中19批样品中检测出6种植物生长调节剂。结论建立的植物生长调节剂多残留检测方法灵敏度高,准确性好,有针对性,且前处理简单快速,可用于筛查和检测白芷中植物生长调节剂多残留量。

关键词：植物生长调节剂白芷残留量超高效液相色谱-串联质谱法