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鹿茸多肽对骨质疏松模型大鼠的改善作用及对SIRT1/FOXO1信号通路的影响

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吉林大学学报（医学版） 2024年第1期50卷 120-127页

作者：迟雪婷黄晓巍陈芳园周高峰王晋冀律广富林喆龚庆长春中医药大学药学院临床药学与中药药理教研室吉林长春130117 长春中医药大学东北亚中医药研究院基础研究所吉林长春130117 长春中医药大学吉林省人参科学研究院中药药理组吉林长春130117 长春中医药大学附属医院骨科中心吉林长春130021

目的:探讨鹿茸多肽(VAP)对骨质疏松(OP)模型大鼠的保护作用,并阐明其可能的作用机制。方法:60只12周龄SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组(1 mg·kg^(-1)·d^(-1)阿仑膦酸钠灌胃)、低剂量(100 mg·kg^(-1)·d^(-1))VAP组、中剂量(2... 详细信息

目的:探讨鹿茸多肽(VAP)对骨质疏松(OP)模型大鼠的保护作用,并阐明其可能的作用机制。方法:60只12周龄SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组(1 mg·kg^(-1)·d^(-1)阿仑膦酸钠灌胃)、低剂量(100 mg·kg^(-1)·d^(-1))VAP组、中剂量(200 mg·kg^(-1)·d^(-1))VAP组和高剂量(300 mg·kg^(-1)·d^(-1))VAP组,每组10只。除对照组外,其余各组大鼠肌肉注射地塞米松(2 mg·kg^(-1))复制OP大鼠模型,对照组大鼠肌肉注射等体积生理盐水,每周2次,连续11周。双能X射线骨密度仪检测各组大鼠股骨骨密度(BMD),酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清中血钙(Ca^(2+))、血磷(P)、骨保护素(OPG)、碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)水平,生化法检测各组大鼠血清中丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性,HE染色观察各组大鼠骨组织病理形态表现,Western blotting法检测各组大鼠骨组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)、过氧化氢酶(CAT)、Runt相关转录因子2(RUNX2)和叉头框蛋白O1(FOXO1)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠股骨BMD明显降低(P<0.05);与模型组比较,阳性药组、中剂量VAP组和高剂量VAP组大鼠股骨BMD明显升高(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,模型组大鼠血清中Ca^(2+)、P和OPG水平及SOD活性明显降低(P<0.05),ALP、OCN和MDA水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,低剂量VAP大鼠血清中OPG水平明显升高(P<0.05),阳性药组、中剂量VAP组和高剂量VAP组大鼠血清中Ca^(2+)、P和OPG水平及SOD活性明显升高(P<0.05或P<0.01),阳性药组和各剂量VAP组大鼠血清中ALP、OCN和MDA水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。HE染色,与对照组比较,模型组大鼠骨组织中骨细胞数量减少且排列混乱,骨小梁纤细,出现大片断裂,髓腔扩大;与模型组比较,阳性药组、中剂量VAP组和高剂量VAP组大鼠骨组织中骨小梁粗壮,排列紧密。Western blotting法,与对照组比较,模型组大鼠骨组织中SIRT1、CAT、RUNX2和FOXO1蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,阳性药组、中剂量VAP组和高剂量VAP组大鼠骨组织中SIRT1、CAT、RUNX2和FOXO1蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:VAP对OP模型大鼠具有保护作用,其作用机制可能与介导SIRT1/FOXO1信号通路抗氧化应激作用有关。

关键词：骨质疏松症地塞米松鹿茸多肽氧化应激沉默信息调节因子1 叉头框蛋白O1 信号通路

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人参-黄芪药对不同配比化学成分分析及抗氧化活性研究

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中国新药杂志 2024年第11期33卷 1164-1173页

作者：曹国世李波李佳尉忠贤赵彧陈越赵大庆张红印严铭铭长春中医药大学长春130117 长春中医药大学附属医院长春130021 吉林省中药保健食品科技创新中心长春130117

目的:比较不同配比人参-黄芪药对中指标性成分差异,探究其抗氧化活性。方法:制备人参、黄芪提取物及不同配伍比例(1∶1,1∶2,1∶4,m/m)的人参-黄芪药对提取物,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和2,2'-... 详细信息

目的:比较不同配比人参-黄芪药对中指标性成分差异,探究其抗氧化活性。方法:制备人参、黄芪提取物及不同配伍比例(1∶1,1∶2,1∶4,m/m)的人参-黄芪药对提取物,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸+[2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline)-6-sulfonate+,ABTS+]和等化学法检测人参-黄芪药对清除自由基能力;建立H_(2)O_(2)诱导的HepG2细胞氧化损伤模型,通过荧光探针法与ELISA法分析人参-黄芪药对对HepG2细胞模型中氧化因子分泌水平的影响;建立D-半乳糖诱导小鼠衰老模型分析人参-黄芪药对不同配比的体内抗氧化活性;采用紫外分光光度法和HPLC-ELSD法,分析比较各提取物中活性成分(总酚酸、总皂苷、总多糖、总黄酮、总蛋白)及7种主要化学成分的含量差异。结果:人参-黄芪药对不同配比提取物,均显示出较好的抗氧化活性,人参-黄芪(1∶2)药对具有较强的清除自由基能力。体外细胞模型实验中,人参-黄芪药对给药后可显著提高细胞活力、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)含量,降低丙二醛(malondialdehyde,MDA)浓度,其中,人参-黄芪(1∶2)给药浓度为400μg·mL^(-1)时,细胞活力最高可达(92.88±2.81)%。体内实验表明,人参-黄芪(1∶2)可以增强模型小鼠血液和肝脏中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶含量,降低丙二醛浓度。人参-黄芪药对活性成分分析结果表明,人参-黄芪(1∶2)配比时总黄酮和总皂苷含量最高。结论:与单药材提取物相比,人参-黄芪药对不同配比提取物均具有良好的清除自由基能力及体内体外抗氧化作用,其中人参-黄芪(1∶2)药对的抗氧化活性最好。

关键词：人参黄芪药对化学成分抗氧化活性

基于UHPLC-MS/MS法分析补肾利咽汤物质基准的特征图谱暨多指标成分的筛选与含量测定研究

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世界科学技术-中医药现代化 2024年第3期26卷 704-720页

作者：赵威马永璠刘忠义宋丽敏刘艳华张守琳初洪波长春中医药大学药学院长春130117 长春中医药大学第一附属医院长春130021 长春中医药大学第一附属医院实验中心长春130021

目的采用超高效液相-质谱(UHPLC-MS/MS)法同时测定补肾利咽汤(BSLYT)中化学成分,建立BSLYT物质基准的高效液相色谱指纹图谱及莫诺苷、马钱苷、木蝴蝶苷A、木蝴蝶苷B、黄芩苷、落新妇苷等6种主要成分的含量测定方法,为质量控制提供参考... 详细信息

目的采用超高效液相-质谱(UHPLC-MS/MS)法同时测定补肾利咽汤(BSLYT)中化学成分,建立BSLYT物质基准的高效液相色谱指纹图谱及莫诺苷、马钱苷、木蝴蝶苷A、木蝴蝶苷B、黄芩苷、落新妇苷等6种主要成分的含量测定方法,为质量控制提供参考。方法利用质谱数据,建立指纹图谱。用外标法计算BSLYT样品中主要成分的含量,并结合化学计量学方法分析不同批次样品的差异。结果质谱共指认出了69种化合物,经过与高效液相色谱比对,共指认出13种化合物。15批BSLYT物质基准特征图谱的相似度在0.90以上,共指认了27个共有峰。聚类分析(CA)将物质基准分为2类,即S1、S2、S5、S8、S9、S13、S15为一类,S3、S4、S6、S7、S10-S12、S16为一类。通过主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLSDA),筛选出影响物质基准分类的化学成分,分别归属于木蝴蝶、山茱萸和土茯苓。多指标成分含量测定6个成分,分别为莫诺苷、马钱苷、木蝴蝶苷A、木蝴蝶苷B、黄芩苷、落新妇苷含量范围分别在0.31%-0.51%、0.12%-0.22%、0.09%-0.19%、0.09%-0.24%、0.07%-0.18%、0.08%-0.29%。结论本文建立的指纹图谱和多指标含量测定方法准确、稳定,为补肾利咽汤的物质基准及相关制剂的质量控制提供依据。

关键词：补肾利咽汤物质基准超高效液相-质谱指纹图谱含量测定化学计量学

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地锦草总黄酮的降尿酸活性研究

地锦草总黄酮的降尿酸活性研究

作者：田璐长春中医药大学

学位级别：硕士

目的:高尿酸血症是一种由嘌呤代谢紊乱所引起的代谢类疾病。地锦草作为一种分布广泛的中草药地锦草主要成分为黄酮、鞣质类,如槲皮素、芹菜素、山奈酚、鞣花酸、没食子酸等。本研究借助代谢组学和转录组学手段,对地锦草总黄酮提取物治... 详细信息

目的:高尿酸血症是一种由嘌呤代谢紊乱所引起的代谢类疾病。地锦草作为一种分布广泛的中草药地锦草主要成分为黄酮、鞣质类,如槲皮素、芹菜素、山奈酚、鞣花酸、没食子酸等。本研究借助代谢组学和转录组学手段,对地锦草总黄酮提取物治疗高尿酸血症大鼠的基因表达差异及代谢物质变化水平进行深入研究探讨,为地锦草醇提物治疗高尿酸血症提供理论基础。方法:采用乙醇浸提法,结合单因素考察和Box-Behnken设计响应面分析法,优化地锦草总黄酮提取条件,并以紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量。构建高尿酸血症大鼠模型,分组后给予不同剂量的地锦草总黄酮提取物治疗。通过测量SUA、SCr和BUN水平,以及对肾脏进行组织学分析,评估地锦草对高尿酸血症大鼠的治疗效果。选取大鼠肾脏组织,利用转录组学技术分析基因表达差异,并进行差异基因富集分析,揭示地锦草治疗高尿酸血症的分子机制。采用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术进行代谢物检测,并通过生物信息学分析,探究地锦草治疗过程中的代谢物变化。结果:1.通过Box-Behnken设计响应面分析法优化,确定最佳提取条件为醇浓度71.56%、料液比1:12.32、温度79.18℃。2.通过灌胃地锦草总黄酮提取物,与模型组相比HUA大鼠SUA水平显著降低、UUA水平显著上升,SCr、BUN水平与正常组相比无显著性差异。3.从转录组学层面来看,高尿酸血症导致大鼠肾脏的基因表达发生明显变化。这些变化不仅揭示了免疫系统的激活状态,还显示出肾脏代谢功能的受损。这种受损状态可能导致尿酸的积累,进一步加剧肾脏的损害。地锦草被用于治疗时,上调基因主要涉及代谢过程的优化,可能帮助肾脏恢复正常的代谢功能;而下调基因则关联到细胞附着机制的调控,这有助于减轻炎症反应,稳定细胞结构。这些发现表明,地锦草通过促进肾脏代谢功能并调节细胞间相互作用来发挥治疗作用。通路分析进一步印证了高尿酸血症对肾脏的免疫和代谢影响,并揭示了地锦草治疗的作用机制。地锦草能够通过调整与代谢和炎症相关的通路减轻HUA对肾脏的损害,并恢复其正常功能。4.代谢组学结果显示地锦草主要通过调控氨基酸代谢、癌症中心碳代谢以及ABC运输蛋白的调节来发挥作用。通过抑制氨基酸的过量合成、促进氨基酸分解代谢以及调节能量代谢的稳定性,地锦草能够降低尿酸的生成并加速其排出。此外,地锦草还可能通过提高ABC运输蛋白的活性,进一步促进尿酸从肾脏中排除,从而有效减轻肾脏负担。结论:优化后的地锦草总黄酮提取工艺,重复性良好,成本低,可为今后大规模提取地锦草总黄酮提供理论基础。药理实验证明地锦草总黄酮具有降尿酸作用,其作用机制可能为调控肾脏代谢功能并调节细胞间相互作用、氨基酸代谢、癌症中心碳代谢以及对ABC运输蛋白的调节。

关键词：地锦草高尿酸血症代谢组学转录组学

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加味葛根颗粒的研制与开发

加味葛根颗粒的研制与开发

作者：李文莉长春中医药大学

学位级别：硕士

目的:加味葛根汤是在长春中医药大学附属医院经过多年应用的临床经验方,该药结合临床手法在治疗神经根型颈椎病中效果显著。但由于汤剂存在携带不便,不易储存等缺点,因此将其制成现代剂型-颗粒剂具有必要性。本课题研究了加味葛根颗粒... 详细信息

目的:加味葛根汤是在长春中医药大学附属医院经过多年应用的临床经验方,该药结合临床手法在治疗神经根型颈椎病中效果显著。但由于汤剂存在携带不便,不易储存等缺点,因此将其制成现代剂型-颗粒剂具有必要性。本课题研究了加味葛根颗粒的提取工艺、成型工艺,建立加味葛根颗粒质量标准及初步稳定性研究,并通过网络药理学进一步探讨加味葛根颗粒对神经根型颈椎病的治疗作用,为加味葛根汤院内制剂的开发应用提供科学理论依据。方法:本研究通过广泛查阅相关文献,深入探讨加味葛根汤的处方来源、药材基源、组方配伍以及功效主治等方面内容,对加味葛根汤制剂研究。提取工艺:选取出膏量和葛根素提取量作为核心评价指标,借助L9（3～4）正交实验法,确定了加味葛根颗粒的最佳水提工艺。成型工艺:使用单因素试验方法来研究辅料的种类、料辅比以及润湿剂的浓度,通过Box-Behnken试验设计优选成型工艺,并对颗粒进行物理质量属性表征。中试研究:根据最佳制备工艺进行三批中试研究。质量标准研究:参考2020版的《中国药典》中的四部颗粒剂检查标准,对加味葛根颗粒进行定性和定量检验;构建指纹图谱,以明确加味葛根颗粒的质量准则。稳定性研究:对加味葛根颗粒进行初步的稳定性评估。网络药理学:对加味葛根颗粒进行初步网络药理学研究。结果:加味葛根颗粒的最佳提取工艺是:首次加入8倍的水量,浸泡1小时,煎煮1小时后过滤,第二次加入7倍的水量,煎煮1小时,第三次加入7倍的水量,煎煮1小时,过滤,合并滤液,浓缩,在60～70°C的温度下进行减压干燥;最佳成型工艺的辅料为糊精,料辅比为1:1.5,润湿剂乙醇浓度为75%,60°C干燥,整粒即得加味葛根颗粒。根据最佳制备工艺,实验室小试制备10批颗粒,对颗粒进行物理质量属性表征,结果各批次物理指纹图谱与对照图谱质量的相似度均大于99%,表明各批次颗粒质量稳定;实验室放大三批研究,三批颗粒水分、粒度、溶化性、出膏率、葛根素含量均符合规定,表明该制备工艺稳定可行;由长春中医药大学附属医院进行中试研究,以中试样品建立加味葛根颗粒质量标准,按照2020年版《中国药典》0104颗粒剂制剂通则项下检查加味葛根颗粒的粒度、水分、装量差异、溶化性、微生物限度均符合规定;建立了处方中的葛根、麻黄、白芍、甘草、木瓜以及牛膝的薄层鉴别（TLC）方法;采用高效液相色谱法（HPLC）进行葛根素含量测定。明确规定每袋加味葛根颗粒中葛根素的含量下限,即不得低于23.2mg;加味葛根颗粒的指纹图谱,指认了原儿茶酸、葛根素、芍药苷等6个峰,10批样品相似度在98%以内,所建立的方法稳定、可行,可用于评价加味葛根颗粒的质量。对加味葛根颗粒进行初步的稳定性研究。加速和长期稳定性试验的结果表明,加味葛根颗粒有良好的稳定性。检查结果均达到了既定的质量标准,并未观察到明显的异常变化,这为后续的保质期确定提供了初步的依据。网络药理学共收集到加味葛根颗粒201个活性成分,剔除重复值后获得264个成分靶点,神经根型颈椎病相关靶点164个,药物成分和疾病的共有靶点20个。结论:本研究深入探讨了提取和成型的工艺流程,成功筛选出了加味葛根颗粒剂最稳健可行的制备方法。通过质量标准的探索和对其早期稳定性的研究,为加味葛根汤的研发提供了坚实的科学支持,通过网络药理学对加味葛根颗粒治疗神经根型颈椎病进行药效学验证,结果表明其在神经根型颈椎病的治疗中起着非常重要的作用。实现了院内制剂的转化。

关键词：加味葛根颗粒葛根素制备工艺质量标准稳定性网络药理学

复方前列康胶囊的制备、成分分析及相关活性研究

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复方前列康胶囊的制备、成分分析及相关活性研究

作者：曹珺长春中医药大学

学位级别：硕士

目的:本研究针对这一临床有效方剂,采用现代中药制药技术及分析技术,对其生产工艺、质量标准、药效成分、网络药理学及活性进行研究,为了将其进一步开发为中药新药,需要提供实验基础和数据支持。方法:运用现代中药提取及制剂技术,筛选... 详细信息

目的:本研究针对这一临床有效方剂,采用现代中药制药技术及分析技术,对其生产工艺、质量标准、药效成分、网络药理学及活性进行研究,为了将其进一步开发为中药新药,需要提供实验基础和数据支持。方法:运用现代中药提取及制剂技术,筛选出最佳提取工艺路线,最终获得复方前列康胶囊最佳生产工艺。采用薄层色谱法,建立TLC鉴别;采用高效液相法,建立胶囊剂主要有效成分盐酸小檗碱的含量测定方法。采用Q-Orbitrap HRMS高分辨液质联用系统对复方前列康胶囊中的化学成分进行结构解析,深入阐明复方前列康胶囊提取物的药效物质。基于液质分析结果,采用TCMSP数据库筛选复方前列康胶囊潜在活性成分,构建中药-活性成分-靶点网络,旨在探究慢性前列腺炎的作用机制。构建角叉菜胶致大鼠足肿胀模型观察其抗炎作用;构建大鼠前列腺炎模型,应用ELISA法检测前列腺组织中相关炎症因子的含量。选用人前列腺上皮细胞(RWPE-1细胞)作研究对象,探究了复方前列康胶囊提取物治疗慢性前列腺炎的活性作用。结果:获得复方前列康胶囊的最佳提取工艺为:取人参药材粉成细粉,备用;取黄柏、苦参、车前子、金樱子和茯苓,水煎煮3次,每次1.5小时,煎液浓缩成稠膏;将上述稠膏及药粉混匀,干燥,打粉,备用。在成型性工艺研究最佳优选方案为:提取物与糊精5:1混合,以80%乙醇为润湿剂14目制粒,选择干燥温度为50～60℃,确定了胶囊的型号。药材的薄层色谱鉴定方法专属性良好、稳定可靠。高效液相色谱法表明,所建立的含量测定方法准确、稳定、可靠。首次通过Q-Orbitrap HRMS高分辨液-质联用技术鉴定出复方前列康胶囊中55种化学成分,初步确认了复方前列康胶囊的药效物质成分。筛选结果表明小檗碱、氧化苦参碱、人参皂苷Rd2、高车前素、亚油酸为潜在活性成分。KEGG通路富集发现PI3K-Akt信号通路是整个网络中核心的通路节点,M APK1是核心靶点节点。活性作用研究表明复方前列康胶囊的提取物能够减轻大鼠炎症,提高细胞的吞噬能力,抑制细胞凋亡,降低细胞内ROS水平,对炎症因子的含量有显著降低作用,下调PI3K、Akt、Bax和p38 MAPK的表达含量。结论:本实验运用现代中药制药技术及中药分析技术,对其生产工艺、质量标准、药效成分、网络药理学及活性进行研究,通过上述这些工作,为进一步的药物研发和临床应用奠定了坚实的基础。

关键词：复方前列康胶囊慢性前列腺炎提取工艺胶囊剂工艺质量标准物质基础网络药理学活性作用

基于cAMP/RAF1信号通路探讨加味酸枣仁汤治疗抑郁症的机制研究

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基于cAMP/RAF1信号通路探讨加味酸枣仁汤治疗抑郁症的机制研究

作者：龚梦姣长春中医药大学

学位级别：硕士

目的:运用网络药理学与分子对接分析加味酸枣仁汤治疗抑郁症的作用机制,并开展动物实验探究加味酸枣仁汤对CUMS大鼠的行为学影响,及对肝脏脂质代谢、cAMP/RAF1信号通路相关蛋白的影响。方法:1.网络药理学:利用HERB与swiss ADME平台检索... 详细信息

目的:运用网络药理学与分子对接分析加味酸枣仁汤治疗抑郁症的作用机制,并开展动物实验探究加味酸枣仁汤对CUMS大鼠的行为学影响,及对肝脏脂质代谢、cAMP/RAF1信号通路相关蛋白的影响。方法:1.网络药理学:利用HERB与swiss ADME平台检索并筛选出加味酸枣仁汤的有效活性成分,在swiss target prediction网站对作用靶点进行预测,以“depression”“major depressive disorder”为检索词在Drugbank、Gene Cards、OMIM、pharm GKB及TTD疾病数据库检索抑郁症靶点,利用微生信获取加味酸枣仁汤与抑郁症的交集靶基因。通过DAVID平台对交集靶基因进行富集分析,筛选出加味酸枣仁汤治疗抑郁症可能发挥作用的通路。运用STRING平台对富集在cAMP信号通路中的基因进行蛋白互作分析,利用Cytoscape3.8.0软件中的Cyto Hubba插件,依据最大团中心性算法筛选出核心靶点信息。构建加味酸枣仁汤-成分-靶点-通路-疾病网络关系图,并筛选degree值≥50的成分作为关键成分。最后将部分核心靶点与degree值最大的关键成分进行分子对接验证。2.动物实验:随机抽取10只大鼠作为正常组,其余大鼠采用孤养结合慢性不可预知温和应激法复制抑郁模型,连续刺激21天后进行行为学检测,筛选造模成功的大鼠50只,随机分为模型组、氟西汀组、加味酸枣仁汤低剂量组、加味酸枣仁汤中剂量组、加味酸枣仁汤高剂量组。正常组与模型组灌胃等体积生理盐水,其余各治疗组大鼠灌胃相应药物进行干预治疗。治疗21天后,通过观察一般情况、糖水偏好度和旷场实验评分来评价大鼠的抑郁状态;计算肝脏指数;ELISA法检测肝组织中甘油三酯、游离脂肪酸含量及海马组织中环磷酸腺苷(human cyclic adenosine,cAMP)含量;Western Blot检测海马组织中磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(phosphorylated cAMP response element binding protein,p-CREB)、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、RAF1(rapidly accelerated fibrosarcoma,Raf1)、磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)2蛋白表达水平,以此来研究加味酸枣仁汤对抑郁症的治疗作用及机制。结果:1.网络药理学结果:(1)加味酸枣仁汤有效活性成分共489个,与抑郁症的交集靶基因有487个,其中有66个靶基因富集在cAMP信号通路中。(2)GO、KEGG富集分析显示加味酸枣仁汤主要通过化学突触传递、凋亡过程的负调控、蛋白磷酸化等生物途径在质膜、细胞质、突触等部位参与神经递质受体活性、蛋白丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸激酶活性、酶结合等分子功能,通过钙信号通路、cAMP与MAPK等信号通路等发挥作用,具有多成分、多靶点多通路的特征。(3)(+)-杏黄罂粟碱与RAF1、MEK1、ERK2、ERK1蛋白的结合能均实验结果:(1)经CUMS刺激的各组大鼠毛发杂乱无光泽,早期易惊恐,攻击性强,随着时间延长,活动减少,对外界应激反抗力弱,糖水偏好度与旷场实验评分显著降低;给药治疗21天后,加味酸枣仁汤各剂量组与氟西汀组大鼠毛发恢复光滑,精神状态正常,对外界刺激反应有不同程度恢复。糖水偏好度与旷场实验评分显著提升。(2)造模21天后,模型组大鼠肝脏指数较正常组显著上升,肝组织TG、FFA含量显著增加(P0.05),BDNF蛋白表达水平显著降低(P<0.01);给药治疗后,氟西汀组与加味酸枣仁汤各剂量组p-CREB、BDNF蛋白表达水平较模型组均有极显著性升高(P<0.01)。(5)模型组大鼠海马组织中的RAF1、p-ERK2蛋白表达水平显著增加(P<0.01);给药治疗后,氟西汀组与加味酸枣仁汤各剂量组RAF1、p-ERK2蛋白表达水平较模型组明显降低,结果有统计学意义

关键词：抑郁症加味酸枣仁汤网络药理学脂质代谢作用机制 cAMP/RAF1信号通路

人参叶通过抑制细胞活性氧的积累延缓皮肤衰老

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食品工业科技 2024年第3期45卷 328-337页

作者：张慧娥杜连云初孟瑶宋欣宏叶萍王恩鹏长春中医药大学吉林长春130117 中国中医科学院西苑医院北京100091

目的:采用基于网络药理学的方法,通过分子对接和体外实验验证,揭示人参叶治疗UVB诱导皮肤衰老的生物活性化合物和分子机制。方法:通过TCMSP获取人参叶活性成分与靶点,GeneCards和OMIM检索皮肤衰老相关靶点。在线韦恩图获取交集靶点,Cyto... 详细信息

目的:采用基于网络药理学的方法,通过分子对接和体外实验验证,揭示人参叶治疗UVB诱导皮肤衰老的生物活性化合物和分子机制。方法:通过TCMSP获取人参叶活性成分与靶点,GeneCards和OMIM检索皮肤衰老相关靶点。在线韦恩图获取交集靶点,Cytoscape 3.7.0软件对“药物-成分-靶点-疾病”多层次网络数据进行全方位的可视化分析,DAVID数据库对共有靶点进行GO、KEGG富集分析,AutoDock将药物对接至预测的药物结合位点。体外实验检测UVB照射诱导HaCaT细胞衰老过程中氧化损伤相关指标及蛋白表达水平。结果:预测了人参叶的4个活性成分(谷甾醇、槲皮素、人参皂苷Rh2和山柰酚)和94个潜在靶点;人参叶可显著降低UVB辐射诱导的HaCaT衰老模型的氧化损伤,并降低p-JNK、p-ERK蛋白的表达。结论:人参叶中的谷甾醇、槲皮素、人参皂苷Rh2、山萘黄素等成分可通过p-JNK、p-ERK等蛋白激活MAPK、PI3K/Akt等信号通路,抑制脂质过氧化物产生达到保护HaCaT细胞的目的,从而实现多成分、多靶点、多通路影响皮肤衰老发生发展。

关键词：人参叶皮肤衰老 UVB辐射网络药理学分子对接

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基于网络药理学和实验验证的三黄膏治疗痔疮的作用机制研究

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中国现代应用药学 2024年第12期41卷 1591-1603页

作者：李文杰于倩郑怡杨亦柳张馨月李光哲严铭铭长春中医药大学长春130117 吉林省中药保健食品科技创新中心长春130117

目的基于网络药理学对三黄膏治疗痔疮的核心成分、靶点及信号通路进行预测,并借助分子对接和实验验证,对其作用机制进行初步探讨。方法经过文献研究和数据库筛选,得到三黄膏活性成分、靶点及痔疮相关靶点,通过Cytoscape软件构建关联... 详细信息

目的基于网络药理学对三黄膏治疗痔疮的核心成分、靶点及信号通路进行预测,并借助分子对接和实验验证,对其作用机制进行初步探讨。方法经过文献研究和数据库筛选,得到三黄膏活性成分、靶点及痔疮相关靶点,通过Cytoscape软件构建关联网络并筛选核心基因,然后对基因进行功能分析和通路富集分析。使用Autodock Vina进行分子对接验证,并通过酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组化验证三黄膏对核心靶点的调控作用。结果收集到三黄膏治疗痔疮活性成分77个及其潜在靶点61个,KEGG显示三黄膏可调控钙信号通路、神经活性配体-受体相互作用、cGMP-PKG信号通路等,影响CGRP、NK-1R、TRPV1、VEGF、IL-6和TNF-α 6个核心靶点,分子对接显示三黄膏与靶点蛋白间有较好的亲和性,动物实验验证了三黄膏可抑制IL-6、CGRP、P物质等的表达,促进VEGF的表达。结论三黄膏可能作用于CGRP、NK-1R等靶点,通过调控钙信号通路及PI3K-Akt等通路,发挥镇痛抗炎、活血化瘀作用来治疗痔疮。

关键词：三黄膏痔疮网络药理学分子对接实验验证