复方前列康胶囊的制备、成分分析及相关活性研究

作     者：曹珺 

作者单位：长春中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：严铭铭;于文静

授予年度：2024年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：复方前列康胶囊 慢性前列腺炎 提取工艺 胶囊剂工艺 质量标准 物质基础 网络药理学 活性作用 

摘      要：目的:本研究针对这一临床有效方剂,采用现代中药制药技术及分析技术,对其生产工艺、质量标准、药效成分、网络药理学及活性进行研究,为了将其进一步开发为中药新药,需要提供实验基础和数据支持。 方法: 运用现代中药提取及制剂技术,筛选出最佳提取工艺路线,最终获得复方前列康胶囊最佳生产工艺。采用薄层色谱法,建立TLC鉴别;采用高效液相法,建立胶囊剂主要有效成分盐酸小檗碱的含量测定方法。采用Q-Orbitrap HRMS高分辨液质联用系统对复方前列康胶囊中的化学成分进行结构解析,深入阐明复方前列康胶囊提取物的药效物质。基于液质分析结果,采用TCMSP数据库筛选复方前列康胶囊潜在活性成分,构建中药-活性成分-靶点网络,旨在探究慢性前列腺炎的作用机制。构建角叉菜胶致大鼠足肿胀模型观察其抗炎作用;构建大鼠前列腺炎模型,应用ELISA法检测前列腺组织中相关炎症因子的含量。选用人前列腺上皮细胞(RWPE-1细胞)作研究对象,探究了复方前列康胶囊提取物治疗慢性前列腺炎的活性作用。 结果: 获得复方前列康胶囊的最佳提取工艺为:取人参药材粉成细粉,备用;取黄柏、苦参、车前子、金樱子和茯苓,水煎煮3次,每次1.5小时,煎液浓缩成稠膏;将上述稠膏及药粉混匀,干燥,打粉,备用。在成型性工艺研究最佳优选方案为:提取物与糊精5:1混合,以80%乙醇为润湿剂14目制粒,选择干燥温度为50～60℃,确定了胶囊的型号。药材的薄层色谱鉴定方法专属性良好、稳定可靠。高效液相色谱法表明,所建立的含量测定方法准确、稳定、可靠。首次通过Q-Orbitrap HRMS高分辨液-质联用技术鉴定出复方前列康胶囊中55种化学成分,初步确认了复方前列康胶囊的药效物质成分。筛选结果表明小檗碱、氧化苦参碱、人参皂苷Rd2、高车前素、亚油酸为潜在活性成分。KEGG通路富集发现PI3K-Akt信号通路是整个网络中核心的通路节点,M APK1是核心靶点节点。活性作用研究表明复方前列康胶囊的提取物能够减轻大鼠炎症,提高细胞的吞噬能力,抑制细胞凋亡,降低细胞内ROS水平,对炎症因子的含量有显著降低作用,下调PI3K、Akt、Bax和p38 MAPK的表达含量。 结论:本实验运用现代中药制药技术及中药分析技术,对其生产工艺、质量标准、药效成分、网络药理学及活性进行研究,通过上述这些工作,为进一步的药物研发和临床应用奠定了坚实的基础。