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医学院校计算机基础混合式教学满意度调查研究——以锦州医科大学为例

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中国高等医学教育 2022年第8期 33-34页

作者：姜涌韩智涌高昱姚琳吕冰锦州医科大学生物信息工程学院锦州医科大学图书馆辽宁锦州121000

目的:为提升医学生计算机综合应用能力,我校实施计算机基础课程混合式教育教学改革,本研究旨在从学生对课程满意度方面评估本次教学改革的效果,从而为医学院校深化计算机基础教学改革提供参考与借鉴。方法:以锦州医科大学2019级和2020... 详细信息

目的:为提升医学生计算机综合应用能力,我校实施计算机基础课程混合式教育教学改革,本研究旨在从学生对课程满意度方面评估本次教学改革的效果,从而为医学院校深化计算机基础教学改革提供参考与借鉴。方法:以锦州医科大学2019级和2020级临床医学专业学生为调查对象,以问卷形式调查学生对混合式教学工程中课程设计、教学内容、教学效果的满意度情况。结果:学生对混合式教学总体持肯定态度,但仍然存在不足之处,混合式教学应注重师生互动,更注重学生学习兴趣的培养。结论:计算机课程应该在传统教学的同时,更注重信息化教学的手段和方式,在理论学习的同时,更注重学生能力的培养,使学生找到医学技术和计算机技术的切合点,将二者有机融合,以此来促进社会信息化医疗体系的发展。

关键词：计算机基础课程混合式教学教学满意度

和厚朴酚对脂多糖诱导心肌细胞自噬和凋亡的影响

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中药药理与临床 2024年第7期 57-62页

作者：孟楚浛鲁美丽隋海娟张玲锦州医科大学心脑血管药物研究重点实验室锦州医科大学基础医学院

目的:探讨和厚朴酚对脂多糖诱导心肌细胞损伤、自噬和凋亡的影响及潜在作用机制。方法:以10μg/mL脂多糖作用H9C2细胞建立心肌细胞损伤模型，分为空白对照组、模型对照组、和厚朴酚12.5、25.0、50.0μmol/L组和和厚朴酚50.0μmol/L+3-MA... 详细信息

目的:探讨和厚朴酚对脂多糖诱导心肌细胞损伤、自噬和凋亡的影响及潜在作用机制。方法:以10μg/mL脂多糖作用H9C2细胞建立心肌细胞损伤模型，分为空白对照组、模型对照组、和厚朴酚12.5、25.0、50.0μmol/L组和和厚朴酚50.0μmol/L+3-MA(自噬抑制剂3-MA 10 mmol/L)组。CCK-8法检测细胞活力；ELISA法检测炎性因子水平；DCFH法测活性氧(ROS)水平；LC3免疫荧光染色观察自噬；流式细胞术检测细胞凋亡率；Western blot法检测与自噬、凋亡及PI3K/AKT/mTOR通路相关的蛋白表达。结果:与空白对照组比较，模型对照组细胞活力降低，LAMP2蛋白表达显著下调(P<0.01),而炎症因子含量、ROS水平、自噬细胞数量、细胞凋亡率显著增加，LC3II/I、Beclin 1、P62、Cleaved caspase 3/Caspase 3、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT的蛋白表达均显著上调(P<0.01);与模型对照组相比，和厚朴酚可明显降低炎症因子含量、ROS水平、细胞凋亡率、P62表达，下调Cleaved caspase 3/Caspase 3蛋白表达及PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白表达(P<0.01),提高细胞活力、自噬细胞数量及上调LC3II/I、Beclin 1和LAMP2蛋白表达(P<0.01),且和厚朴酚对细胞活力、炎症因子水平、ROS水平、自噬细胞数量和细胞凋亡率的调节均呈浓度依赖性；与和厚朴酚50.0μmol/L组相比，和厚朴酚50.0μmol/L+3-MA组的炎症因子含量、ROS水平、细胞凋亡率显著升高，P62和Cleaved caspase 3/Caspase 3蛋白表达显著上调(P<0.01),细胞活力、自噬细胞数量显著降低，LC3II/I、Beclin 1、LAMP2、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT的蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:和厚朴酚可激发自噬，减少脂多糖诱导的心肌细胞损伤、ROS水平和细胞凋亡率，且效应与药物浓度成正相关，这些作用可能与和厚朴酚抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路，上调自噬、促进自噬流有关。

关键词：和厚朴酚脂多糖自噬凋亡磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路

GRP78-c-Src信号通路介导周期性牵张力作用下牙周膜成纤维细胞成骨分化的机制研究

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华西口腔医学杂志 2024年第3期42卷 304-312页

作者：胡静崔智华黄克强苏荣健赵颂锦州医科大学生命科学研究院公共实验平台锦州121001 中国医科大学口腔医学院附属口腔医院种植中心沈阳110002 锦州医科大学附属口腔医院正畸科锦州121001 锦州医科大学基础医学院锦州121001

目的探讨在周期性牵张力作用下葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对牙周膜成纤维细胞成骨分化的影响,并阐述其机制。方法应用FlexCell 5000细胞应力装置模拟牙齿正畸受力环境;应用流式细胞术细胞分选技术获得牙周膜成纤维细胞GRP78高表达细胞和GR... 详细信息

目的探讨在周期性牵张力作用下葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对牙周膜成纤维细胞成骨分化的影响,并阐述其机制。方法应用FlexCell 5000细胞应力装置模拟牙齿正畸受力环境;应用流式细胞术细胞分选技术获得牙周膜成纤维细胞GRP78高表达细胞和GRP78低表达细胞;采用基因转染技术敲减GRP78、c-Src的表达以及过表达c-Src;蛋白质印迹实验检测成骨转录因子Runt相关基因2(RUNX2)、锌指结构转录因子(Osterix)以及成骨标志蛋白骨钙蛋白(OCN)、骨桥蛋白(OPN)的表达;免疫共沉淀实验检测GRP78与c-Src激酶的相互作用;茜素红染色实验检测细胞矿化结节的形成。结果GRP78在牙周膜成纤维细胞呈异质性表达,流式分选实验获得GRP78高表达和GRP78低表达细胞。周期性牵张力处理后,与GRP78低表达细胞相比,GRP78高表达细胞成骨分化能力及c-Src激酶磷酸化水平均升高,差异具有统计学意义(P<0.05);GRP78与c-Src激酶存在相互作用;与对照组相比,过表达c-Src组细胞成骨分化能力升高(P<0.05),sic-Src组细胞成骨分化能力降低(P<0.05)。结论GRP78通过与c-Src激酶相互作用并上调其表达,进而促进周期性牵张力诱导的牙周膜成纤维细胞成骨分化。

关键词：周期性牵张力成骨分化牙周膜成纤维细胞葡萄糖调节蛋白78

单核细胞趋化蛋白1对肺癌A549细胞迁移和侵袭的影响及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2024年第3期50卷 666-675页

作者：王远王志娟张明姝王艺慧张晴叶丽平锦州医科大学基础医学院病理学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学生物人类学研究所辽宁锦州121001

目的:探讨单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)对肺癌A549细胞迁移和侵袭的影响,并阐明其作用机制。方法:采用免疫组织化学法检测80例非小细胞肺癌(NSCLC)及癌旁正常肺组织中MCP-1蛋白表达情况。体外培养人肺癌A549细胞,MCP-1-小干扰RNA(siRNA)实... 详细信息

目的:探讨单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)对肺癌A549细胞迁移和侵袭的影响,并阐明其作用机制。方法:采用免疫组织化学法检测80例非小细胞肺癌(NSCLC)及癌旁正常肺组织中MCP-1蛋白表达情况。体外培养人肺癌A549细胞,MCP-1-小干扰RNA(siRNA)实验分为空白组、阴性对照组(si-NC组)、MCP-1-siRNA-1组和MCP-1-siRNA-2组;MCP-1过表达实验分为对照组、空载对照组(OE-NC组,转染MCP-1过表达空载质粒)、过表达MCP-1组(OE-MCP-1组,转染MCP-1过表达质粒)、过表达MCP-1+细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路抑制剂PD98059组(OE-MCP-1+PD98059组,共转染MCP-1过表达质粒和PD98059)和PD98059组(转染PD98059)。分别将MCP-1-siRNA和质粒转染至肺癌A549细胞,Western blotting法验证各组A549细胞转染效率。细胞划痕实验和Transwell小室实验观察各组A549细胞迁移率和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组A549细胞中磷酸化ERK(p-ERK)、总ERK(t-ERK)和上皮-间质转化(EMT)相关蛋白表达水平。结果:与癌旁组织比较,NSCLC组织中MCP-1蛋白阳性表达率明显升高(P<0.05);NSCLC组织中MCP-1蛋白表达水平与TNM分期和淋巴结转移有关联(P<0.05)。与si-NC组比较,MCP-1-siRNA-1组和MCP-1-siRNA-2组A549细胞中MCP-1蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);与对照组和OE-NC组比较,OE-MCP-1组A549细胞中MCP-1蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。细胞划痕实验,与si-NC组比较,MCP-1-siRNA-1组和MCP-1-siRNA-2组细胞迁移率均明显降低(P<0.01);与OE-NC组比较,OE-MCP-1组细胞迁移率明显升高(P<0.01);与OE-MCP-1组比较,OE-MCP-1+PD98059组细胞迁移率明显降低(P<0.01);与OE-MCP-1+PD98059组比较,PD98059组细胞迁移率明显降低(P<0.01)。Transwell小室实验,与si-NC组比较,MCP-1-siRNA-1组和MCP-1-siRNA-2组侵袭细胞数明显减少(P<0.01);与OE-NC组比较,OE-MCP-1组侵袭细胞数明显增加(P<0.01);与OE-MCP-1组比较,OE-MCP-1+PD98059组侵袭细胞数明显减少(P<0.01);与OE-MCP-1+PD98059组比较,PD98059组侵袭细胞数明显减少(P<0.01)。Western blotting法,与si-NC组比较,MCP-1-siRNA-1组和MCP-1-siRNA-2组A549细胞中p-ERK、波形蛋白(Vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平均明显升高(P<0.01);与OE-NC组比较,OE-MCP-1组A549细胞中p-ERK、Vimentin和N-cadherin蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);与OE-MCP-1组比较,OE-MCP-1+PD98059组A549细胞中p-ERK、Vimentin和N-cadherin蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与OE-MCP-1+PD98059组比较,PD98059组A549细胞中p-ERK、 Vimentin和N-cadherin蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:MCP-1蛋白可上调肺癌A549细胞中EMT相关蛋白表达,促进肺癌A549细胞的迁移和侵袭,其作用机制与激活ERK信号通路有关。

关键词：单核细胞趋化蛋白1 细胞外信号调节激酶癌,非小细胞肺细胞侵袭细胞迁移

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基础医学实验竞赛在促进医学院校医学微生物实验教学效果的研究——以安徽医科大学为例

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科技风 2024年第4期 124-127页

作者：周畅李群王林定安徽医科大学实验教学中心病原与免疫学实验室安徽合肥230032 安徽医科大学基础医学院微生物学教研室安徽合肥230032 安徽医科大学基础医学院免疫学教研室安徽合肥230032

医学微生物学是基础医学的基础学科,在医学院校的基础教学中有着举足轻重的地位,医学微生物实验是医学微生物学的重要组成部分。传统的医学微生物实验教学一直循规蹈矩,机械式地重复简单的实验操作,造成教学模式僵化、学生积极性不高、... 详细信息

医学微生物学是基础医学的基础学科,在医学院校的基础教学中有着举足轻重的地位,医学微生物实验是医学微生物学的重要组成部分。传统的医学微生物实验教学一直循规蹈矩,机械式地重复简单的实验操作,造成教学模式僵化、学生积极性不高、教学效果不理想的局面。深化教学体制改革,构建高效课堂是当下高校教学的目标。开展实验技能竞赛就是一种有效的教学手段,通过开展基础医学实验竞赛,提升学生对实验课程的重视程度。本文以安徽医科大学开展基础医学实验竞赛为例,通过教学方法、实验内容、学习受众、考核形式等方面分析,探讨在医学院校中实验竞赛对医学微生物实验教学效果的促进作用。通过问卷调查和统计学生理论、实验成绩方式对教学效果进行评价,同时对今后的实验教学和竞赛工作的重心方向进行展望。

关键词：医学微生物实验实验竞赛教学效果医学院校基础医学实验教学

志贺氏杆菌分泌蛋白Dnak的表达纯化与多克隆抗体的制备及应用

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中国人兽共患病学报 2024年第3期40卷 236-242页

作者：贾雪娇刘梦琦刘洋刘长城李小凤胡屹硕李香雨李润林李永刚赵微锦州医科大学基础医学院病原生物学实验室锦州121001

目的表达轮状病毒感染的乳鼠体内志贺氏杆菌分泌蛋白Dnak(Hsp70),并制备Dnak多克隆抗体。方法以提取的志贺氏杆菌基因组为模板PCR扩增Dnak片段,与pET-24a(+)和PCDNA3.1分别连接构建原核表达质粒pET24a(+)-Dnak和真核表达质粒PCDNA3.1-Dn... 详细信息

目的表达轮状病毒感染的乳鼠体内志贺氏杆菌分泌蛋白Dnak(Hsp70),并制备Dnak多克隆抗体。方法以提取的志贺氏杆菌基因组为模板PCR扩增Dnak片段,与pET-24a(+)和PCDNA3.1分别连接构建原核表达质粒pET24a(+)-Dnak和真核表达质粒PCDNA3.1-Dnak;pET24a(+)-Dnak原核表达质粒转化至*** BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,经镍柱纯化Dnak蛋白。以纯化后的重组蛋白为免疫原免疫C57BL/6小鼠制备多克隆抗体,采用间接ELISA检测效价,Western Blot法检测灵敏度和特异性。利用制备的多克隆抗体在GST Pull-down实验中检测Dnak与轮状病毒非结构蛋白Nsp2的相互作用。真核表达质粒PCDNA3.1-Dnak转染至HEK293T细胞,以制备的DnaK多克隆抗体为一抗,Western blot法检测Dnak在细胞中的表达。利用MEGA11及Genedoc软件分析此志贺氏杆菌与志贺菌属其他细菌Dnak氨基酸序列同源性。结果重组质粒pET24a(+)-Dnak与PCDNA3.1-Dnak经测序比对包含与此志贺氏杆菌(Shigella:PRJNA804371)序列一致的基因,证明质粒构建成功。诱导表达的重组Dnak蛋白主要以可溶性形式存在,相对分子质量约为75 kDa,浓度可达0.62 mg/mL;Dnak鼠多克隆抗体可与重组Dnak蛋白发生特异性反应,效价为1∶32000,至少可以在1∶6000稀释度下检测到Dnak蛋白。GST Pull-down实验可以检测到Dnak与轮状病毒非结构蛋白Nsp2发生相互作用。转染PCDNA3.1-Dnak重组质粒的HEK293T细胞可以表达Dnak蛋白。经MEGA11和Genedoc软件比对PRJNA804371株与宋内志贺菌(Shigella sonnei)、痢疾志贺菌(Shigella dysenteriae)、鲍氏志贺菌(Shigella boydii)、福氏志贺菌(Shigella flexneri)Dnak氨基酸序列同源性较高。结论成功表达志贺氏杆菌Dnak蛋白,具有良好反应性与免疫原性;制备的鼠多克隆抗体效价及灵敏度较高可满足后续实验需要。

关键词：志贺氏杆菌 Dnak 蛋白表达与纯化多克隆抗体轮状病毒

红景天苷通过IL-17A抑制TRAF6/NLRP3信号通路改善Müller细胞的功能

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中国现代应用药学 2024年

作者：刘宇沫谢元冬董禹彤刘天赐于洪丹锦州医科大学基础医学院锦州医科大学护理学院锦州医科大学辽宁省糖尿病感知功能障碍重点实验室

目的探讨红景天苷（salidroside,SAL）对高糖培养的视网膜Müller细胞异常激活的保护作用及其机制。方法采用含10%胎牛血清,1%青-链霉素的DME/F12（1:1）培养基培养Müller细胞。培养条件为37℃,5%CO2。用25、50、75、100、150 mmol·... 详细信息

目的探讨红景天苷（salidroside,SAL）对高糖培养的视网膜Müller细胞异常激活的保护作用及其机制。方法采用含10%胎牛血清,1%青-链霉素的DME/F12（1:1）培养基培养Müller细胞。培养条件为37℃,5%CO2。用25、50、75、100、150 mmol·L-1葡萄糖浓度培养Müller细胞,根据CCK-8实验考察细胞活力确定75 mmol·L-1葡萄糖为最佳浓度。实验分为对照、HG、HG+SAL、HG+IL-17A、HG+SAL+IL-17A、HG+IL-17A+siRNA-TRAF 6组。通过Elisa检测Müller细胞表达IL-17A水平,通过ROS检测试剂盒检查细胞内活性氧水平,MDA检测试剂盒检测细胞内MDA含量,SOD检测试剂盒检测SOD活力。细胞免疫荧光实验检测IL-17A和IL-17RA在细胞内的定位表达情况。免疫印迹实验检测IL-17A、IL-17RA、TRAF6、NLRP3、GFAP、VEGF的蛋白表达水平。结果与对照组相比,HG组Müller细胞表达IL-17A水平明显升高,ROS和MDA含量显著升高,SOD酶活力明显降低,IL-17A、IL-17RA、TRAF6、NLRP3、GFAP、VEGF蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;给予SAL后,与HG组相比,Müller细胞表达IL-17A水平显著下降,ROS和MDA含量显著降低,SOD酶活力明显升高,IL-17A、IL-17RA、TRAF6、NLRP3、GFAP、VEGF蛋白表达水平明显下降（P<0.05）。当给予IL-17A活性分子刺激后,相应指标又继续升高（P<0.05）,Müller细胞表现异常激活状态。通过细胞免疫荧光实验表明IL-17A和IL-17RA定位表达在细胞质和细胞膜上。结论红景天苷能改善高糖培养的Müller细胞功能,其可能的机制是通过下调IL-17A表达进而抑制TRAF6/NLRP3信号通路相关。

关键词：红景天苷 IL-17A Müller细胞激活 TRAF6/NLRP3信号通路

乳鼠志贺杆菌分泌蛋白GroEL多克隆抗体的制备与鉴定

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中国病原生物学杂志 2024年第2期19卷 137-143页

作者：刘梦琦贾雪娇刘洋刘长城李小凤胡屹硕赵微锦州医科大学基础医学院病原生物学实验室辽宁锦州121000

目的制备志贺杆菌分泌蛋白GroEL多克隆抗体,为探究乳鼠志贺杆菌上清蛋白GroEL在乳鼠肠道内的功能奠定基础。方法利用分子克隆技术构建原核表达蛋白质粒Pet28a(+)-GroEL,转化Escherichia coil BL21(DE3)后采用不同浓度IPTG诱导表达,优化... 详细信息

目的制备志贺杆菌分泌蛋白GroEL多克隆抗体,为探究乳鼠志贺杆菌上清蛋白GroEL在乳鼠肠道内的功能奠定基础。方法利用分子克隆技术构建原核表达蛋白质粒Pet28a(+)-GroEL,转化Escherichia coil BL21(DE3)后采用不同浓度IPTG诱导表达,优化诱导时间和温度,确定最佳蛋白表达条件;利用His标签亲和层析法纯化GroEL蛋白。将纯化蛋白与佐剂按照等比例充分混合后免疫C57BL/6小鼠,制备多克隆抗体血清,采用ELISA检测血清抗体的效价、灵敏度及特异性。构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-GroEL并转染293T细胞,48 h后采用制备的GroEL多克隆抗体进行Western blot验证。结果Pet28a(+)-GroEL转化*** BL21(DE3)菌在28℃、0.4 mmol/L IPTG诱导12h获得最佳蛋白表达,表达的重组蛋白分子质量约为63 ku,纯化后的蛋白浓度为0.735 mg/mL。Western blot检测显示该蛋白能被抗His标签鼠单克隆抗体识别。ELISA检测显示制备的抗GroEL多克隆抗体血清效价为1∶128000;Western blot检测显示该抗体可识别GroEL蛋白。结论重组表达的GroEL蛋白具有抗原性,制备的鼠抗GroEL多克隆抗体血清具有特异性且效价高,为研究乳鼠志贺杆菌GroEL蛋白与肠道病毒之间的作用机制奠定了基础。

关键词：志贺菌 GroEL蛋白蛋白纯化多克隆抗体制备轮状病毒

中华蜜蜂幼虫响应中蜂囊状幼虫病毒感染的MicroRNAs分析

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病毒学报 2024年

作者：李一肖宇婷马跃宇李明费东亮马鸣潇锦州医科大学畜牧兽医学院锦州医科大学实验动物中心

为了研究中蜂囊状幼虫病毒（Chinese sacbrood virus,CSBV）感染中华蜜蜂幼虫后体内MicroRNAs(miRNA)表达谱变化，探讨差异miRNAs(DEmiRNAs)在中蜂幼虫响应CSBV应答中的功能。本研究分别对感染CSBV24h和48h中蜂幼虫进行Illumina高通量... 详细信息

为了研究中蜂囊状幼虫病毒（Chinese sacbrood virus,CSBV）感染中华蜜蜂幼虫后体内MicroRNAs(miRNA)表达谱变化，探讨差异miRNAs(DEmiRNAs)在中蜂幼虫响应CSBV应答中的功能。本研究分别对感染CSBV24h和48h中蜂幼虫进行Illumina高通量测序，通过生物信息学软件分析DEmiRNAs及其靶基因，并进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。通过RT-qPCR对测序结果进行验证。结果显示：对CSBV感染前后中蜂幼虫测序共筛选出140个已知miRNAs和预测到5个新miRNAs。其中，L24I组（CSBV感染24h幼虫）和L24H组（健康幼虫）对比发现18个DEmiRNAs，其中有12个表达上调，有6个表达下调；L48I组（CSBV感染48h幼虫）和L48H组（健康幼虫）筛选到47个DEmiRNAs，其中有30个表达上调，有17个表达下调。GO分析表明，部分DEmiRNAs及相关靶基因参与免疫系统过程和刺激反应等功能；KEGG通路分析显示，除涉及物质和能量代谢通路外，主要的免疫通路包括MAPK、溶酶体、Hippo、凋亡信号通路等。选取对蜜蜂调控具有重要作用和将要研究的8个miRNAs进行RT-qPCR验证结果表明，结果表明其表达水平与测序结果高度一致，表明测序准确可靠。通过本研究，不仅有助于我们深入认识CSBV感染中蜂幼虫过程中宿主miRNA变化情况，也为探究中华蜜蜂和CSBV相互作用时miRNA发挥的功能提供帮助。

关键词： CSBV 中华蜜蜂幼虫 MicroRNA 测序