GRP78-c-Src信号通路介导周期性牵张力作用下牙周膜成纤维细胞成骨分化的机制研究
Role of the GRP78-c-Src signaling pathway on osteoblast differentiation of periodontal ligament fibroblasts induced by cyclic mechanical stretch作者机构:锦州医科大学生命科学研究院公共实验平台锦州121001 中国医科大学口腔医学院附属口腔医院种植中心沈阳110002 锦州医科大学附属口腔医院正畸科锦州121001 锦州医科大学基础医学院锦州121001
出 版 物:《华西口腔医学杂志》 (West China Journal of Stomatology)
年 卷 期:2024年第42卷第3期
页 面:304-312页
核心收录:
基 金:辽宁省教育厅基础研究项目(JYTJCZR2020073) 辽宁省教育厅面上项目(LJKZ0803)
主 题:周期性牵张力 成骨分化 牙周膜成纤维细胞 葡萄糖调节蛋白78
摘 要:目的探讨在周期性牵张力作用下葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对牙周膜成纤维细胞成骨分化的影响,并阐述其机制。方法应用FlexCell 5000细胞应力装置模拟牙齿正畸受力环境;应用流式细胞术细胞分选技术获得牙周膜成纤维细胞GRP78高表达细胞和GRP78低表达细胞;采用基因转染技术敲减GRP78、c-Src的表达以及过表达c-Src;蛋白质印迹实验检测成骨转录因子Runt相关基因2(RUNX2)、锌指结构转录因子(Osterix)以及成骨标志蛋白骨钙蛋白(OCN)、骨桥蛋白(OPN)的表达;免疫共沉淀实验检测GRP78与c-Src激酶的相互作用;茜素红染色实验检测细胞矿化结节的形成。结果GRP78在牙周膜成纤维细胞呈异质性表达,流式分选实验获得GRP78高表达和GRP78低表达细胞。周期性牵张力处理后,与GRP78低表达细胞相比,GRP78高表达细胞成骨分化能力及c-Src激酶磷酸化水平均升高,差异具有统计学意义(P0.05);GRP78与c-Src激酶存在相互作用;与对照组相比,过表达c-Src组细胞成骨分化能力升高(P0.05),sic-Src组细胞成骨分化能力降低(P0.05)。结论GRP78通过与c-Src激酶相互作用并上调其表达,进而促进周期性牵张力诱导的牙周膜成纤维细胞成骨分化。