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肝细胞DEP结构域蛋白5/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1信号轴在非酒精性脂肪肝形成中的作用

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解剖学报 2024年第3期55卷 295-301页

作者：徐琳熊熙文李遵黄蓉麻红辉马洁新乡医学院医学技术学院河南新乡453003 新乡医学院基础医学院河南新乡453003 新乡医学院法医学院河南新乡453003 新乡医学院新乡市代谢与整合生理学重点实验室河南新乡453003

目的建立肝细胞Dishevelled/Egl-10/pleckstrin(DEP)结构域蛋白5(DEPDC5)基因(Depdc5)肝细胞特异性敲除小鼠高脂喂养模型,探讨DEPDC5/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)信号轴对非酒精性脂肪肝的调控。方法构建肝细胞特异性敲除Dep... 详细信息

目的建立肝细胞Dishevelled/Egl-10/pleckstrin(DEP)结构域蛋白5(DEPDC5)基因(Depdc5)肝细胞特异性敲除小鼠高脂喂养模型,探讨DEPDC5/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)信号轴对非酒精性脂肪肝的调控。方法构建肝细胞特异性敲除Depdc5^(flox/flox)模型;Alb-Cre小鼠(LKO),Depdc5^(flox/flox)小鼠(Loxp)作为对照。32只2~3月龄雄性小鼠随机分为高脂LKO组、高脂Loxp对照组、高脂+雷帕霉素LKO组及高脂+雷帕霉素Loxp对照组,每组8只。检测肝脏血清生物化学指标、脂质含量、蛋白、mRNA及病理切片,采用GraphPad Prism 8软件进行统计学分析。结果高脂喂养导致LoxP小鼠肝脏脂肪变性,LKO小鼠肝脏脂肪变性减轻但合并出现肝损伤;雷帕霉素抑制了Depdc5敲除引起的mTORC1通路激活,显著改善Loxp小鼠肝脏脂肪变性,并改善LKO小鼠的肝损伤。结论Depdc5基因敲除能够保护高脂喂养小鼠肝脏脂肪变性,雷帕霉素可以改善DEPDC5缺失诱发的肝损伤。

关键词： Dishevelled/Egl-10/pleckstrin结构域蛋白5 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白高脂饮食雷帕霉素非酒精性脂肪肝免疫印迹法小鼠

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翻转课堂在临床本科生基础医学教学中的应用

中国科技经济新闻数据库教育 2024年第9期 0017-0020页

作者：杨爱英时飒哈尔滨医科大学基础医学院细胞生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学基础医学院病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150081

本文探讨了将翻转课堂应用于临床本科基础医学教学中的几个问题。本文通过分析该教学模式的现状,具体的实施策略,以及效果评估,讨论了该模式对学生的学业成就、学习动机与参与、能力提高等方面的影响。研究结果显示,将翻转课堂模式应用... 详细信息

本文探讨了将翻转课堂应用于临床本科基础医学教学中的几个问题。本文通过分析该教学模式的现状,具体的实施策略,以及效果评估,讨论了该模式对学生的学业成就、学习动机与参与、能力提高等方面的影响。研究结果显示,将翻转课堂模式应用于临床医学教学,可以有效地提高学生的学习效率,激发学生的学习兴趣与积极参与,促进教师角色的转换。因此,将翻转课堂应用于临床本科基础医学教学,具有十分重要的现实意义。

关键词：翻转课堂临床本科生基础医学教学教学模式学习评价

不引起肺动脉高压的间歇性低氧心肌保护条件优化研究

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心脏杂志 2024年第4期36卷 373-378页

作者：焦媛媛卢林鹤周海涛李慢刘超阳张文裴建明付锋空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室陕西西安710032 空军军医大学西京医院心脏外科陕西西安710032

目的本研究拟寻求不引起肺动脉高压的间歇性低氧心肌保护条件。方法成年雄性C57BL/6小鼠随机分为常氧对照组(大气压101.3 kPa,氧浓度约为21 ml/L)、3000 m低氧组(大气压70.7 kPa,氧浓度约为14.2 ml/L)、4000 m低氧组(大气压61.3 kPa,氧... 详细信息

目的本研究拟寻求不引起肺动脉高压的间歇性低氧心肌保护条件。方法成年雄性C57BL/6小鼠随机分为常氧对照组(大气压101.3 kPa,氧浓度约为21 ml/L)、3000 m低氧组(大气压70.7 kPa,氧浓度约为14.2 ml/L)、4000 m低氧组(大气压61.3 kPa,氧浓度约为12.6 ml/L)、5000 m低氧组(大气压53.9 kPa,氧浓度约为11.3 ml/L)四组,每天4 h。经肋间肌穿刺检测右心室收缩压以反映肺动脉压力变化,心肌缺血再灌注后,使用伊文思蓝-TTC双染检测心梗面积,ELISA试剂盒检测血清心肌肌钙蛋白I含量。结果与常氧对照组相比,3000 m低氧组小鼠右心室收缩压在低氧1周和2周无明显变化,在第3周开始升高(P室收缩压即升高(P<0.01)。小鼠常氧或3000 m低氧2周处理后,分别建立在体与离体心肌缺血再灌注模型,与常氧组相比,低氧处理组在体与离体心肌缺血再灌注后均表现为梗死面积减小,血清心肌肌钙蛋白I含量降低(P<0.01)。恢复常氧4周后,3000 m低氧2周的心肌保护作用丧失。结论不引起肺动脉高压的间歇性低氧心肌保护条件是3000 m低氧处理2周,每天4 h,该保护效果可在脱离低氧环境后维持3周。

关键词：心肌缺血再灌注损伤间歇性低氧肺动脉高压心肌保护常氧

2型糖尿病并发周围血管病变患者血清骨代谢相关因子水平变化及其意义

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山东医药 2024年第3期64卷 84-86页

作者：张亚琦黄丽王春蚌埠医学院第二附属医院内分泌科安徽蚌埠233000 蚌埠医学院基础医学院病理生理学教研室蚌埠医学院第二附属医院全科

目的观察2型糖尿病(T2DM)并发糖尿病周围血管病(DPV)患者血清骨代谢相关因子[血清骨桥蛋白(OPN)、骨保护素(OPG)、骨钙素(OC)、维生素D(VD)]水平变化,并评估其对T2DM并发DPV的预测效能,为T2DM并发DPV的早期诊断提供新的生物标志物。方... 详细信息

目的观察2型糖尿病(T2DM)并发糖尿病周围血管病(DPV)患者血清骨代谢相关因子[血清骨桥蛋白(OPN)、骨保护素(OPG)、骨钙素(OC)、维生素D(VD)]水平变化,并评估其对T2DM并发DPV的预测效能,为T2DM并发DPV的早期诊断提供新的生物标志物。方法纳入111例T2DM患者,根据是否并发DPV(DPV)分为单纯T2DM组49例,DPV组62例。采用EILSA法检测血清骨桥蛋白(OPN)、骨保护素(OPG),电化学发光法检测血清骨钙素(OC),化学发光法检测血清维生素D(VD)。采用单因素及多因素Logistic回归分析T2DM并发DPV的影响因素,Spearman相关性分析血清OPN、OPG、OC水平与T2DM并发DPV患者糖尿病相关危险因素(年龄、病程、血压、血糖、血脂)的关系,受试者工作特征曲线(ROC)评估血清OPN、OPG、OC、VD水平对T2DM并发DPV的预测效能。结果与单纯T2DM组对比,DPV组血清OPN、OPG水平高(P<0.05),血清OC、VD水平低(P<0.05)。血清OPN、OPG、OC、VD是T2DM并发DPV的影响因素(P均<0.05),血清OPN、OC是T2DM并发DPV的独立影响因素(P均<0.05)。Spearman相关性分析显示,血清OPN水平与T2DM并发DPV患者年龄、糖尿病病程及收缩压呈正相关,与TG呈负相关;血清OPG水平与糖尿病病程、HbA1c、TC、HDL-C及LDL-C呈正相关;血清OC水平与糖尿病病程呈负相关(P均<0.05)。血清OPN、OPG、OC及VD联合预测T2DM患者发生DPV的AUC为0.756,敏感度61.3%,特异度89.8%。结论 T2DM并发DPV患者血清OPN、OPG水平升高,OC、VD水平降低,血清OPN、OC为T2DM患者发生DPV的独立影响因素,四者联合对于T2DM患者并发DPV有一定预测效能。

关键词：糖尿病并发症糖尿病周围血管病变骨代谢相关因子骨桥蛋白(OPN)、骨保护素(OPG)、骨钙素(OC)、维生素D(VD)

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非染色体结构维护凝集素Ⅰ复合物亚基G通过Akt信号通路促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭

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解剖学报 2024年第5期55卷 573-581页

作者：张明姝王艺慧张晴叶丽平锦州医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学生物人类学研究所辽宁锦州121001 沈阳市第五人民医院医学检验中心沈阳110000

目的探讨非染色体结构维护凝集素Ⅰ复合物亚基G(NCAPG)调控卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭的机制。方法生物信息学GEPIA数据库分析NCAPG在卵巢癌组织中的差异表达。Western blotting检测正常卵巢上皮细胞IOSE80、卵巢癌A2780和SKOV3细胞... 详细信息

目的探讨非染色体结构维护凝集素Ⅰ复合物亚基G(NCAPG)调控卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭的机制。方法生物信息学GEPIA数据库分析NCAPG在卵巢癌组织中的差异表达。Western blotting检测正常卵巢上皮细胞IOSE80、卵巢癌A2780和SKOV3细胞中NCAPG的蛋白表达。NCAPG siRNA沉默实验分为空白组、对照组、siNCAPG-1组和siNCAPG-2组。NCAPG过表达实验分为空白组、对照组、NCAPG组、NCAPG+MK2206组和MK2206组。MTT实验检测细胞增殖活性;细胞划痕实验和Transwell实验评估细胞的迁移和侵袭能力;Western blotting检测细胞的磷酸化Akt(p-Akt)、总Akt(t-Akt)、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、波形蛋白(vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达水平。结果NCAPG在卵巢癌组织和卵巢癌细胞中高表达。沉默NCAPG可明显抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭,p-Akt、PCNA、MMP-9、vimentin和N-cadherin表达减少,E-cadherin表达增多。过表达NCAPG质粒可促进卵巢癌A2780细胞增殖、迁移和侵袭,p-Akt、PCNA、MMP-9、vimentin和N-cadherin表达增多,E-cadherin表达降低。Akt抑制剂MK2206可明显抑制NCAPG的上述作用。结论NCAPG激活Akt信号通路,调控PCNA、MMP-9和上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达,促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

关键词：卵巢癌非染色体结构维护凝集素Ⅰ复合物亚基G 蛋白激酶B信号通路增殖细胞核抗原基质金属蛋白酶9 钙黏蛋白免疫印迹法

LncRNAuc.48+对CGRP介导的三叉神经痛的作用

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中国药理学通报 2024年第10期40卷 1866-1871页

作者：谭梦霞吴饶平张爱霞高云熊伟南昌大学基础医学院生理学教研室江西南昌330006 江西卫生职业学院江西南昌330052 南昌医学院江西南昌330052 南昌大学附属口腔医院江西南昌330019

目的探究长链非编码核糖核酸uc.48+(long non-coding RNA,lncRNA uc.48+)如何影响三叉神经痛(trigeminal neuralgia,TN)大鼠三叉神经节(trigeminal ganglion,TG)中降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)以及其潜在的作用机制。方法慢性压迫性损伤大鼠眶下神经(chronic compression injury to the infraorbital nerve,CCI-ION)建立大鼠TN动物模型。成模后,经眶下孔局部注射uc.48+小干扰敲低lncRNAuc.48+,以及向正常大鼠转染uc.48+质粒过表达lncRNAuc.48+。通过行为学来观察各组大鼠面部机械痛阈值(mechanical pain threshold,MWT),结合qPCR、蛋白印迹等方法观察大鼠TG中CGRP的含量及变化。ELISA法观察1L-1β的变动状况。结果接受uc.48+小干扰处理的TN大鼠机械痛敏阈值明显上升;TG中CGRP的蛋白、mRNA水平明显下降(P病理痛大鼠TG中CGRP的表达,抑制初级感觉神经节对三叉神经病理痛信息的传播,进而减轻三叉神经病理痛对机械性疼痛的敏感性。

关键词：长链非编码核糖核酸uc.48+ 三叉神经痛降钙素基因相关肽三叉神经节小干扰过表达

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PCSK9在心血管疾病中的研究进展

心脏杂志 2024年第3期36卷 324-328页

作者：杜林芳练静李阳魏晓丽马恒延安大学基础医学院陕西延安710600 陕西中医药大学基础医学院陕西咸阳712046 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室陕西西安710032

前蛋白转化酶枯草溶菌素9(protein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)是一种丝氨酸蛋白酶,主要产生于肝脏。作为前蛋白转化酶家族中的一员,PCSK9可以与低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor,LDLR)结合使其进入溶酶体进行降解,从而抑制LDLR再循环到细胞表面发挥清除血浆中的低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的功能,进而导致高胆固醇血症。近年的研究显示PCSK9与心血管疾病的发生发展有着紧密的联系,所以PCSK9在心血管疾病研究中显示出作为新治疗靶点的可能性。本文以PCSK9为切入点,总结论述其结构、功能并概述了PCSK9在多种心血管疾病中的研究进展。

关键词：前蛋白转化酶枯草溶菌素9 LDL受体心血管疾病

简易密封袋构建人小胶质细胞氧糖剥夺/复氧模型过程及其评价

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武汉大学学报(医学版) 2024年

作者：刘彩张冉朱梦林廖茗孔钰李曙洪云皖南医学院第一附属医院弋矶山医院超声科皖南医学院基础医学院病理生理学教研室皖南医学院第一附属医院弋矶山医院胃肠外科皖南医学院公共卫生学院

目的：体外构建人小胶质细胞HMC3氧糖剥夺/复氧（OGD/R）模型，为治疗缺血性脑卒中提供新思路。方法：利用密封袋对HMC3细胞进行氧糖剥夺，缺氧不同时间后再复氧24 h。倒置显微镜下观察细胞形态，细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活性，... 详细信息

目的：体外构建人小胶质细胞HMC3氧糖剥夺/复氧（OGD/R）模型，为治疗缺血性脑卒中提供新思路。方法：利用密封袋对HMC3细胞进行氧糖剥夺，缺氧不同时间后再复氧24 h。倒置显微镜下观察细胞形态，细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活性，乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测细胞LDH含量，台盼蓝染色观察细胞存活率，Hoechst/PI双染、AnnexinⅤ-FITC/PI染色观察细胞凋亡坏死情况。比较不同时间缺氧复氧24 h的结果，选择最佳缺氧时间，建立稳定的OGD/R模型。结果：与对照组（0 min）相比，OGD处理组细胞形态变圆，突起消失，胞质凝聚，胞核固缩、碎裂，细胞膜模糊不清，不规则细胞比例增多；细胞活性随缺氧时间延长明显降低（P<0.000 1）；上清LDH含量随缺氧时间延长而逐渐升高（P<0.01）；台盼蓝染色时拒染细胞数随缺氧时间延长逐渐减少（P<0.001）；细胞凋亡坏死量随缺氧时间延长逐渐增多（P<0.05）。与对照组相比，OGD/R处理组细胞形态基本正常，密度增加，随着缺氧时间延长，细胞密度增加减少；细胞活性随缺氧时间延长逐渐下降（P<0.01）；上清LDH含量随缺氧时间延长发生明显上升（P<0.000 1）；台盼蓝染色时拒染细胞数随缺氧时间延长逐渐减少（P<0.01）；细胞凋亡坏死量随缺氧时间延长逐渐增多（P<0.05）。结论：氧糖剥夺/复氧24 h后HMC3细胞存活率、LDH释放量、凋亡坏死细胞量呈时间依赖性，且缺氧45 min复氧24 h为最佳OGD/R模型时间。利用简易密封袋的方法可成功构建OGD/R模型。

关键词：简易密封袋人小胶质细胞氧糖剥夺/复氧缺血性脑卒中

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面向临床的肝性脑病实验教学改革探索

医学研究杂志 2024年第2期53卷 191-194页

作者：师建辉张海谢铁凝章卫平中国人民解放军海军军医大学基础医学院病理生理学教研室上海200433

实验教学是病理生理学课程中的重要组成部分,可以帮助学生从整体水平直观地了解疾病,深刻地理解发病机制。肝性脑病实验教学是病理生理学实验教学中的重要内容之一,但是以往的教学中存在着手术操作繁琐、造模成功率不稳定、与临床结合... 详细信息

实验教学是病理生理学课程中的重要组成部分,可以帮助学生从整体水平直观地了解疾病,深刻地理解发病机制。肝性脑病实验教学是病理生理学实验教学中的重要内容之一,但是以往的教学中存在着手术操作繁琐、造模成功率不稳定、与临床结合不紧密等问题,笔者通过对该实验的教学内容与课堂实施的重新设计与改进,达到了紧密结合临床、学生自主参与度高、实验成功率高和重复性好等病理生理学实验教学改革的目的,加深了学生对肝性脑病发病机制的理解,培养了学生的临床思维能力,收到满意的教学效果。

关键词：病理生理实验教学面向临床