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The enhancement effect of pp38 gene product on the activity of its upstream bi-directional promoter in Marek's disease virus

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Science China(Life Sciences) 2006年第1期49卷 53-62页

作者： REDDY Sanjay Texas A&M University College Station TX 77843 USA

There was a bi-directional promoter between gene 38 kd phosphorylated protein (pp38) gene; 1.8-kb mRNA transcript gene family in the genome of Marek's disease virus (MDV). In this study, enhanced green fluorescence protein (EGFP) reporter plamids, pp(pp38)-EGFP; pp(1.8-kb)-EGFP, were constructed under this bi-directional promoter in two directions. The two plasmids were transfected into uninfected chicken embryo fibroblast (CEF), MDV clone rMd5 infected CEF (rMd5-CEF); pp38-deleted derivative rMd5Δpp38 infected CEF (rMd5Δpp38-CEF) respectively. Transfection analysis showed that EGFP was only expressed in rMd5-CEF,; no EGFP could be detected in uninfected CEF or rMd5Δpp38-CEF, implying that pp38 was a factor influencing the activity of the promoter. The pp38-expressing recombinant plasmid pcDNA-pp38 was constructed to co-transfect CEF or rMd5Δpp38-CEF with pp(pp38)-EGFP or pp(1.8-kb)-EGFP. In this case, EGFP could be detected only in rMd5Δpp38-CEF but still not in uninfected CEF, implying that pp38 needs other protein(s) to work together for the complete trans-acting activity. Another MDV gene, 24 kd phosphorylated protein pp24 gene was cloned into pcDNA3.1 as a pp24-expressing recombinant plasmid pcDNA-pp24. When uninfected CEF was co-transfected with pcDNA-pp38, pcDNA-pp24; EGFP expressing plasmids pp(pp38)-EGFP or pp(1.8-kb)-EGFP, the EGFP could be detected. These results indicated that pp38; pp24 could enhance the activity of the promoter when they worked together. DNA mobility shift assay showed that pp38 would bind to the bi-directional promoter with the co-existing of pp24, although neither of them alone influenced mobility of the promoter DNA. All the above suggested that MDV pp38 could transactivate the bi-directional promoter when combined with pp24. The results also indicated that the activity of the promoter in the direction of 1.8-kb mRNA was significantly stronger than that of pp38 direction.

关键词： Marek's disease virus (MDV), pp38 gene, 1.8-kb mRNA transcript, bi-directional promoter, trans-acting factor.

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Ⅰ型马立克氏病病毒pp38和pp24基因的真核共表达

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中国病毒学 2005年第4期20卷 404-407页

作者：姜世金丁家波孟珊珊崔治中杨汉春山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 中国农业大学动物医学院北京100094

本研究将Ⅰ型超强毒MDVMd11株的pp38和pp24完整基因分别克隆到真核双表达载体pBudCE4.1中,在脂质体作用下将阳性克隆DNA转染CEF,通过间接免疫荧光试验(IFA)用单克隆抗体H19和鼠抗GST-pp24血清分别检测到了pp38和pp24基因的单独表达。然... 详细信息

本研究将Ⅰ型超强毒MDVMd11株的pp38和pp24完整基因分别克隆到真核双表达载体pBudCE4.1中,在脂质体作用下将阳性克隆DNA转染CEF,通过间接免疫荧光试验(IFA)用单克隆抗体H19和鼠抗GST-pp24血清分别检测到了pp38和pp24基因的单独表达。然后将MDVMd11株的pp38和pp24完整基因同时克隆到载体pBudCE4.1中,在脂质体作用下将阳性克隆DNA转染CEF,通过IFA检测和用抗pp24多克隆血清进行West-ern-blotting试验检测到了pp38和pp24磷蛋白的共表达。

关键词：马立克氏病病毒 pp38 pp24 共表达

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鸡马立克病发病与meq、pp38、PRNP、SPRN、akt基因表达量之间的相关性研究

鸡马立克病发病与meq、pp38、PRNP、SPRN、akt基因表达量之间的相...

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作者：刘桂林甘肃农业大学

学位级别：硕士

【目的】为探明meq、pp38、PRNP、SPRN、akt在MD鸡体内的表达规律以及与鸡马立克病发病之间的关系,本研究拟用MDV-MD5毒株复制鸡MD肿瘤病例,通过Real-time PCR对meq、pp38、PRNP、SPRN和akt基因m RNA水平的相对转录量进行检测,分析攻毒... 详细信息

【目的】为探明meq、pp38、PRNP、SPRN、akt在MD鸡体内的表达规律以及与鸡马立克病发病之间的关系,本研究拟用MDV-MD5毒株复制鸡MD肿瘤病例,通过Real-time PCR对meq、pp38、PRNP、SPRN和akt基因m RNA水平的相对转录量进行检测,分析攻毒鸡各组织中的表达变化规律,探讨上述基因表达量与MDV感染以及与MD肿瘤形成、发生、发展之间的相关性,为进一步研究它们在肿瘤发病学中的作用提供理论依据。【方法】(1)通过琼脂扩散、分子生物学以及蚀斑试验对MDV-MD5毒株进行鉴定,以人工攻毒建立鸡MD肿瘤病例,从攻毒60d开始,每隔30d剖检感染阳性鸡和对照鸡,150d全部扑杀,记录感染率、死亡率和致瘤率。(2)通过病理组织学观察,将150d的感染鸡分成肿瘤病变鸡、无肿瘤病变鸡和阴性对照鸡。(3)每个实验组随机选取3只,无菌采集14个组织样品,提取各样品总RNA并反转录,以c DNA为模板进行meq、pp38、PRNP、SPRN、akt和β-actin的Real-time PCR,分析3个实验组鸡14个不同组织样品间各基因在m RNA水平的相对转录差异。【结果】(1)经琼脂扩散、RT-PCR扩增meq和pp38以及蚀斑试验鉴定MD5毒株为阳性,TCID50=10-5.6363/0.1m L,以MD5株复制内脏型MD肿瘤病例。30d后经RT-PCR检测,感染率为85.42%,攻毒60d后出现死亡,90d剖检肉眼最早发现肿瘤,肿瘤发生率为17.07%,死亡率为24.39%,肿瘤多见于肝脏、脾脏和肾脏。(2)MD有肿瘤病变鸡的多个内脏有肿瘤病变,表面和切面有大小不等、质地坚硬的灰白色结节,镜下正常组织结构被破坏,有大量的淋巴细胞浸润。MD无肿瘤病变鸡和阴性对照鸡未见明显的病理组织学变化。(3)3个实验组中14个组织样品meq、pp38、PRNP、SPRN和akt的m RNA转录水平,meq仅在MDV攻毒鸡中表达,阴性对照鸡中不表达。除心脏和卵巢外,其余12个肿瘤病变组织meq的表达量均高于无病变组织;肿瘤病变鸡眼睑、卵巢和胰腺pp38表达量与无病变鸡相比差异不显著(P>0.05),其余11个肿瘤病变组织pp38的表达量均高于无肿瘤病变鸡;除肌胃和肠外,其余12个肿瘤病变组织PRNP的表达量均高于无病变鸡和对照鸡,脾脏和肾脏的表达差异最高。无肿瘤病变鸡14个组织相对于对照鸡表达差异不显著(P>0.05);SPRN在肌胃中不表达,腺胃、肠和眼睑中微量表达。除皮肤和坐骨神经,肿瘤病变鸡其余8个组织SPRN的表达量均高于对照鸡。无肿瘤病变鸡14个组织SPRN的表达量与对照鸡相比差异不显著(P>0.05);肿瘤病变鸡肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑和皮肤相比于对照鸡akt表达量差异显著(P0.05)。无肿瘤病变鸡14个组织akt的表达量与对照鸡相比差异不显著(P>0.05)。MD肿瘤组织肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤中,meq、pp38、PRNP、akt同时过表达,而除肺脏外,SPRN的表达量无明显变化。【结论】(1)本试验成功复制出鸡MD肿瘤病例。(2)Real-time PCR检测发现,MDV标志性基因meq和pp38在MD肿瘤病变鸡中显著表达,meq表达量与肿瘤的形成相关,pp38表达量与肿瘤的形成不相关。(3)PRNP表达量与MDV感染相关联,PRNP在MDV攻毒鸡组织中过表达。PRNP的差异表达与肿瘤组织病变程度呈正相关,肿瘤组织病变越严重,PRNP表达量的上调幅度越大;(4)SPRN在鸡组织中的表达量与MDV感染以及MD肿瘤的形成均不相关,且与PRNP的表达量也不相关;(5)MDV感染不引起akt表达量上调,akt在MD肿瘤组织中过表达。(6)meq、pp38、PRNP、akt在MD肿瘤组织中同时过表达,而SPRN的表达量无明显变化。

关键词：鸡马立克病 meq pp38 PRNP SPRN akt

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骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠p38和pp38的作用

骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠p38和pp38的作用

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作者：吴志伟福建医科大学

学位级别：硕士

目的:分离并培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),并对其生物学特性进行鉴定。通过肾组织病理观察、生化指标检测、Western blot技术观察骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠的治疗效果,并探讨BMSC对p38... 详细信息

目的:分离并培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),并对其生物学特性进行鉴定。通过肾组织病理观察、生化指标检测、Western blot技术观察骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠的治疗效果,并探讨BMSC对p38和pp38的影响。方法:SD大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养与鉴定:颈椎脱臼处死大鼠,无菌条件下剪取双侧股骨和胫骨,采集骨髓,通过密度梯度离心法和贴壁培养法,分离并培养BMSCs。体外纯化、传代、扩增。取P3-5代细胞,倒置显微镜下观察细胞形态。流式细胞仪检测细胞表面标志物,并进行成软骨、成脂分化诱导,鉴定其生物学特性。将大鼠分为四组,即空白对照组、阿霉素组、干细胞组、强的松组,空白组不予任何处理,阿霉素组在注射ADR后予生理盐水静脉注射,干细胞组予BMSCs以2x106/只静脉输注,强的松组给予强的松5mg/d连续灌胃。于不同时间点采取大鼠静脉血,测定血肌酐、尿素、白蛋白、总胆固醇、甘油三脂;收集大鼠尿液,进行24h尿蛋白定量;切取大鼠肾脏,经染色后置于光镜及电镜下观察肾脏病理变化;western-blot检测各组大鼠肾脏在不同时间点蛋白p38和pp38表达差异。结果:1、获取的BMSCs为均一的长梭形,呈集落样生长,纯度高、活性强。流式鉴定结果提示其高表达CD29、CD44、CD90,低表达CD11、CD34、CD45、CD106。经诱导后能成功向成软骨细胞、成脂肪细胞分化。2、各项生化指标显示:干细胞组、强的松组24h尿蛋白定量较阿霉素组有所下降,而肌酐、尿素等水平则未见明显下降。3、肾组织病理观察:阿霉素组肾小球系膜细胞轻度增生,肾小管内有蛋白管型,电镜下可见足突融合及微绒毛变性。而干细胞组和强的松组肾脏只见足细胞轻度水肿。4、Western blot提示:各干预组pp38的表达较空白组均有所上调,但干细胞组、强的松组pp38的表达量较阿霉素组少。结论:利用密度梯度离心法结合贴壁培养法能成功有效地获取大鼠骨髓间充质干细胞。骨髓间充质干细胞保护阿霉素肾病大鼠的可能机制:BMSCs能抑制p38和pp38的表达,并保护足细胞,从而达到减轻蛋白尿的目的。骨髓间充质干细胞在短期内(1周)对改善肾功能无明显作用。

关键词：骨髓间充质干细胞阿霉素肾病蛋白尿 p38 pp38

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Analyzing the H19-and T65-epitopes in 38 kd phosphory-lated protein of Marek's disease viruses and comparing chicken immunological reactions to viruses point-mutated in the epitopes

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Science China(Life Sciences) 2004年第1期47卷 82-91页

作者： Lee Lucy F Avian Disease and Oncology Laboratory East Lansing Ml 48823 USA

DNA sequencing analysis in 38 kd phosphorylated protein (pp38) ORF of Marek's disease viruses (MDV) indicated that all tested 10 virulent strains with different pathotypes had 'A' at base #320 and glutamine at aa#107 while reacted with monoclonal antibody (Mab) H19 in indirect fluorescence antibody test (IFA). However, vaccine strain CVI988 had 'G' at base#320 and arginine at aa#107 instead, when it was negative in IFA with Mab H19. Some strains were also reactive with Mab T65 in IFA while there was 'G' at base #326 and glycine at aa#109, but the other strains, which had 'A' at base #326 and glutamic acid at aa#109, did not react with Mab T65. By comparison of CVI988 to its point mutants CVI/rpp38(AG) and CVI/rpp38(AA) with 1 or 2 base(s) changes at bases #320 and /or #326 of pp38 gene for their reactivity with Mab H19 and T65, it was confirmed that the glutamine at aa#107 and glycine at aa#109 were critical to epitopes H19 and T65 respectively. Immuno-reactions to MDV were compared in SPF chickens inoculated with cloned CVI988 and its mutant CVI/rpp38(AG). It was found that antibody responses to MDV in chickens inoculated with CVI/rpp38(AG) were delayed and significantly lower than that in chickens inoculated with the native CVI988. By differential comparison of antibody titers to different antigens, a third epitope specific to CVI988 and dependent on arginine at aa#107 was suggested to be responsible for the big difference in antibody responses induced by native CVI988 and its mutant.

关键词： Marek's disease virus, pp38 gene, point mutant, epitopes, antibody responses.

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Galectin-7对食管鳞癌细胞株Eca-109迁移、侵袭的影响及其机制

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中国细胞生物学学报 2014年第12期36卷 1609-1615页

作者：赵基宇何从文汪斌重庆医科大学附属第一医院心胸外科重庆400016

为了探讨半乳糖凝集素-7(Galectin-7)在食管癌Eca-109细胞发生发展中的细胞外功能及其机制,该实验采用免疫印迹法检测浓缩细胞上清液中Galectin-7的表达,并利用不同浓度的重组Galectin-7培养食管癌Eca-109细胞。使用免疫印迹、实时荧光... 详细信息

为了探讨半乳糖凝集素-7(Galectin-7)在食管癌Eca-109细胞发生发展中的细胞外功能及其机制,该实验采用免疫印迹法检测浓缩细胞上清液中Galectin-7的表达,并利用不同浓度的重组Galectin-7培养食管癌Eca-109细胞。使用免疫印迹、实时荧光定量PCR、细胞划痕实验、MTT实验检测在培养后细胞中基质金属酶-9(MMP-9)、p38、pp38表达水平的变化以及Eca-109细胞迁移和增殖能力的改变。结果显示,Galectin-7存在于Eca-109细胞细胞上清液中,加入重组Galectin-7培养细胞后,MMP-9、pp38的表达水平明显上升,并且细胞的迁移能力也得到了提高,增殖能力无明显变化。由此说明,在食管癌Eca-109细胞中,Galectin-7可以被细胞分泌至细胞外,可能通过结合细胞外膜上特异性糖基配体激活p38 MAPK通路诱导MMP-9的表达,从而在Eca-109细胞侵袭、迁移过程中发挥重要的作用。

关键词： Galectin-7 基质金属酶-9 食管癌细胞株Eca-109 p38 MAPK pp38 MAPK

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两株马立克病毒的分离鉴定及其主要致病基因分析

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中国动物传染病学报 2024年第2期32卷 65-72页

作者：闫彩虹金文杰刘文博羊扬钱琨王志强彭大新扬州大学兽医学院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

为了解国内鸡群马立克病毒(MDV)流行毒株的分子特征,采用细胞培养法对马立克病疑似病鸡抗凝血进行MDV分离,间接荧光法鉴定MDV血清型,PCR扩增分离病毒的meq和pp38两个主要致病基因,所得序列与MDV参考毒株的序列进行比对分析。结果显示,... 详细信息

为了解国内鸡群马立克病毒(MDV)流行毒株的分子特征,采用细胞培养法对马立克病疑似病鸡抗凝血进行MDV分离,间接荧光法鉴定MDV血清型,PCR扩增分离病毒的meq和pp38两个主要致病基因,所得序列与MDV参考毒株的序列进行比对分析。结果显示,共分离鉴定出2株MDV I型毒株,分别命名为JS0316和JS0424。meq基因编码的氨基酸序列结果显示,2个MDV分离株缺乏弱毒疫苗株的特征(A71S、P194-),具有MDV强毒分离株的分子特征(D80Y、V115A、T139A、P176R和P217A)。同时,JS0316 Meq蛋白出现Q93R和V123A突变,pp38蛋白出现L98I和F240S突变,而JS0424 Meq蛋白出现P217T突变,pp38蛋白出现W67G和V210A突变。因此,2株MDV均具有国内流行强毒株的分子特征,同时存在新的基因突变。

关键词：马立克病毒分离鉴定 meq pp38 序列分析

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阿片受体激动剂DPDPE对大鼠神经元缺氧无糖损伤的保护作用

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广东医学 2012年第15期33卷 2206-2209页

作者：周国斌吉锦泉徐金东孙柯广东省人民医院、广东省医学科学院麻醉科广州510080

目的研究δ阿片受体激动剂DPDPE对原代培养的大鼠皮层神经元缺氧无糖损伤(OGD)的保护作用并探讨其机制。方法将大鼠皮层神经元分为4组,共24孔、每组6孔:正常氧浓度组;缺氧组;缺氧+DP-DPE(终浓度为100nmol/L)预处理组;缺氧+DPDPE+Naltrin... 详细信息

目的研究δ阿片受体激动剂DPDPE对原代培养的大鼠皮层神经元缺氧无糖损伤(OGD)的保护作用并探讨其机制。方法将大鼠皮层神经元分为4组,共24孔、每组6孔:正常氧浓度组;缺氧组;缺氧+DP-DPE(终浓度为100nmol/L)预处理组;缺氧+DPDPE+Naltrindole(δ阿片受体拮抗剂,终浓度为1μmol/L)预处理组。通过采用LDH观察DPDPE对于神经元缺氧无糖损伤的保护作用;用Western检测大鼠皮层神经元中pERK、pp38、Bcl-2和Bax等蛋白表达的变化。结果 (1)与正常对照组相比,缺氧无糖损伤4h细胞上清液中LDH水平明显升高(Ppp38的蛋白表达(Ppp38的蛋白表达,以及调节Bcl-2/Bax的表达有关。

关键词： DPDPE 皮层神经元神经保护 ERK pp38

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人参皂苷Rh2对实验性子宫内膜异位症的治疗作用和机制探讨

人参皂苷Rh2对实验性子宫内膜异位症的治疗作用和机制探讨

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作者：盛磊复旦大学

学位级别：硕士

目的：通过构建子宫内膜异位症的体内、体外模型,研究人参皂苷Rh2对实验性子宫内膜异位症的治疗作用,并探讨人参皂苷Rh2对子宫内膜异位症的作用机制。方法：1.大鼠适应性饲养一周后,阴道涂片,记录动情间期的变化,选取动情周期规则的SD... 详细信息

目的：通过构建子宫内膜异位症的体内、体外模型,研究人参皂苷Rh2对实验性子宫内膜异位症的治疗作用,并探讨人参皂苷Rh2对子宫内膜异位症的作用机制。方法：1.大鼠适应性饲养一周后,阴道涂片,记录动情间期的变化,选取动情周期规则的SD大鼠进行造模实验,采用外科自体移植法构建SD大鼠子宫内膜异位症模型,术后恢复三周后开腹探查子宫异位内膜生长状况。2.造模成功的SD大鼠随机分为五组,分别为模型对照组(0.5%CMC-Na)、阳性对照组(孕三烯酮1.5mg/kg)、Rh2低、中、高剂量组(5mg/kg、10mg/kg、40mg/kg)。在连续灌胃给药21天后再次开腹,测量异位内膜长宽高并计算其体积。3. EMs模型SD大鼠解剖后腹主动脉取血,酶联免疫法(ELISA)测定大鼠体内的雌二醇(E2)、孕酮(P)和抗子宫内膜抗体(EMAb)水平,HE染色观察异位内膜病理组织学改变,Western blot法测定各组动物移植异位内膜的Bcl-2、Bax、Caspase-3和Caspase-9表达的变化。4. EMs患者的子宫内膜组织经Ⅱ胶原酶消化后,过筛后人子宫异位内膜细胞进行体外培养,建立人子宫内膜异位症的体外细胞模型。5.用无酚红DMEM/F12培养液(含10%活性炭吸附FBS)培养人子宫异位内膜细胞,用不同浓度的Rh2(0.0001-100μmol/L)作用于离体培养的人子宫异位内膜细胞24h、48h和72h,分析人参皂苷Rh2对人子宫异位内膜细胞生长的影响。6.采用R&D蛋白芯片检测溶剂对照组(DMSO)和Rh2(30μmol/L)组磷酸化蛋白激酶表达的差异,筛选出主要的差异性表达激酶,并用Real-time RT-PCR技术验证蛋白芯片的结果,研究人参皂苷Rh2对人子宫异位内膜细胞磷酸化激酶的影响。7.利用Western blot技术检测溶剂对照组(DMSO)和Rh2(30μmol/L)组蛋白表达差异性(pp38,pSrc,Bcl-2,Bax等),并比较存在特异性拮抗剂下,各蛋白水平表达的差异。结果：1.在连续给予21天0.5%CMC-Na、孕三烯酮(1.5mg/kg)和不同剂量Rh2后,模型对照组异位内膜体积明显增大,而孕三烯酮组和人参皂苷Rh2低、中、高剂量组(5,10、40mg/kg)异位内膜生长受到抑制,异位内膜体积减小。人参皂苷Rh2(40mg/kg)能显著抑制大鼠子宫异位内膜的生长(P38MAPK通路受到抑制时,人参皂苷Rh2能增加Bax/Bcl-2的表达,提示了人参皂苷Rh2抑制人子宫异位内膜细胞生长可能与抑制Src/p38MAPK通路有关。结论：1.首次发现天然产物单体人参皂苷Rh2(40mg/kg)能显著抑制异位子宫内膜的生长,有希望用于治疗子宫内膜异位症。2.人参皂苷Rh2抑制实验性异位内膜的生长可能与降低E2、EMAb和P的水

关键词：人参皂苷Rh2 子宫内膜异位症动物模型细胞模型细胞凋亡细胞增殖蛋白芯片双酚A Bcl-2 Bax Caspase-9 Caspase-3 pp38 pSrc EMAb 雌二醇孕酮双重作用蛋白表达拮抗剂 sB203850 pp2

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清肺通络敷胸膏对RSV感染幼龄大鼠肺组织MAPK信号通路的影响

清肺通络敷胸膏对RSV感染幼龄大鼠肺组织MAPK信号通路的影响

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作者：王艺欢辽宁中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过滴鼻方法建立呼吸道合胞病毒(RSV)感染幼龄wistar大鼠急性肺损伤模型,采用免疫组化及western blot的方法检测肺组织中p P38、p ERK、p JNK蛋白表达水平,观察清肺通络敷胸膏对RSV诱导幼龄大鼠急性肺损伤的治疗效果及其量效关系... 详细信息

目的:通过滴鼻方法建立呼吸道合胞病毒(RSV)感染幼龄wistar大鼠急性肺损伤模型,采用免疫组化及western blot的方法检测肺组织中p P38、p ERK、p JNK蛋白表达水平,观察清肺通络敷胸膏对RSV诱导幼龄大鼠急性肺损伤的治疗效果及其量效关系,为临床治疗RSV相关的急性肺损伤提供实验依据。材料与方法:1、运用经鼻滴入RSV long株的方法建立wistar幼龄大鼠RSV感染模型,通过每天观察幼龄大鼠的一般状态(进食量、饮水量、活动度、毛发、呼吸、体重等),肺组织大体观察及光镜下观察来进行模型鉴定。2、每天观察幼龄wistar大鼠的生活状态、存活只数,结合肺组织肉眼及病理切片光镜下观察,来探讨清肺通络敷胸膏大剂量、清肺通络敷胸膏中剂量、清肺通络敷胸膏小剂量对RSV感染幼龄大鼠的治疗作用。3、采用免疫组化及western blot的方法检测各组幼龄wistar大鼠肺组织p P38、p ERK、p JNK表达情况,观察清肺通络敷胸膏对RSV感染幼龄大鼠的治疗作用及其量效关系。结果:1.正常对照组wistar幼龄大鼠生命状态良好,活泼好动,饮食及二便正常,肺组织色白,表面湿润光泽,HE染色肺泡结构完整,大小均匀一致,无炎性细胞浸润。模型对照组wistar幼龄大鼠造模后全身体毛缺乏光泽、饮食量及饮水量都有减少、精神不佳,反应迟钝,体重减轻,肺组织颜色深红,充血水肿,HE染色肺泡壁上皮细胞受损,肺泡壁重度增厚,肺间质可见大量炎性细胞浸润。2.免疫组化结果显示:与正常组比较,其他各组p ERK、p JNK蛋白水平显著增加(P38蛋白水平显著增加(P38、p JNK蛋白水平有显著差异(P38、p JNK蛋白水平有显著差异(P38蛋白水平无显著差异(P>0.05)。*** blot结果显示:与正常组比较,中剂量组p JNK蛋白水平无明显差异(P>0.05),其他各组p ERK、p P38、p JNK蛋白水平存在明显差异(P38、p JNK蛋白水平(P38、p JNK蛋白水平存在明显差异(P38蛋白水平无明显差异(P>0.05)。结论:1、采用鼻腔连续接种RSV毒液的方法可以成功造出RSV感染wistar幼龄大鼠急性肺损伤模型。2、MAPK信号通路参与呼吸道合胞病毒的感染过程。3、清肺通络敷胸膏是治疗呼吸道合胞病毒感染的有效外用药,可不同程度降低RSV感染幼龄大鼠肺组织内p ERK、p P38及p JNK蛋白水平,且存在量效关系。

关键词：呼吸道合胞病毒清肺通络敷胸膏 pERK pp38 pJNK MAPK

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