检索结果-南通市图书馆

作者：严琴湖北中医药大学

学位级别：硕士

目的以异丙肾上腺素(isoproterenol, ISO)注射诱发的急性心肌痛大鼠为观察对象，运用分子生物学技术，观察电针“内关”对大鼠心肌、脊髓背角、下丘脑部位的p2x3受体蛋白和mRNA表达的影响，全面了解p2x3受体在心肌痛痛信息产生及传递... 详细信息

目的以异丙肾上腺素(isoproterenol, ISO)注射诱发的急性心肌痛大鼠为观察对象，运用分子生物学技术，观察电针“内关”对大鼠心肌、脊髓背角、下丘脑部位的p2x3受体蛋白和mRNA表达的影响，全面了解p2x3受体在心肌痛痛信息产生及传递过程中的作用，揭示电针“内关”对心肌痛痛信息传递的影响及作用机制。方法将健康雄性SD大鼠35只，随机分为正常组、对照组、心肌痛组、电针组和拮抗剂组，每组7只。正常组不做任何处理;对照组注射与心肌痛组等量的生理盐水;心肌痛组背部皮下注射ISO;电针组电针双侧“内关”30分钟后注射ISO;拮抗剂组腹腔注射特异性拮抗剂A-317491后注射ISO。所有处理连续14天。观察大鼠体重和行为学的变化，HE染色观察大鼠心肌组织变化，West blotting和RT-pCR技术分别检测大鼠心肌组织、脊髓背角和下丘脑p2x3受体蛋白和mRNA表达的变化。结果 1.大鼠体重的变化情况：正常组大鼠体重稳定增长;对照组大鼠体重稳定增长，但与正常组相比有差异(p p pp>0.05);电针组和拮抗剂组相比无统计学差异(p>0.05)。 2.大鼠行为学的表现情况：正常组大鼠皮毛光泽，行动自如;对照组与正常组间行为学表现无统计学差异(p>0.05);心肌痛组、电针组、拮抗剂组的行为学表现较正常组和对照组有显著性差异(均p p p>0.05)。 3.各组大鼠心肌组织HE染色情况：正常组和对照组的心肌细胞排列致密;心肌痛组可见严重的心肌细胞萎缩以及代偿性肥大和大面积的结缔组织增生现象;电针组和拮抗剂组可见轻微的细胞肥大和结缔组织增生。 4.各组大鼠p2x3受体蛋白的表达情况 (1)各组大鼠心肌组织p2x3受体蛋白的表达情况：正常组大鼠心肌组织有p2x3受体蛋白的表达;对照组与正常组p2x3受体蛋白的表达无统计学差异(p>0.05);心肌痛组、电针组、拮抗剂组的p2x3受体蛋白表达较正常组和对照组均显著上升(均p p2x3受体蛋白表达都明显下降(均p p2x3受体蛋白表达比电针组稍高，但没有统计学差异(p>0.05)。 (2)各组大鼠脊髓背角p2x3受体蛋白的表达情况：正常组大鼠脊髓背角有p2x3受体蛋白的表达;对照组与正常组p2x3受体蛋白的表达无统计学差异(p>0.05);心肌痛组、电针组、拮抗剂组的p2x3受体蛋白较正常组和对照组显著上升(p p2x3受体蛋白表达都明显下降(均p p2x3受体蛋白表达比电针组稍高，但没有统计学差异(p>0.05)。 (3)各组大鼠下丘脑p2x3受体蛋白的表达情况：正常组大鼠下丘脑有p2x3受体蛋白的表达;对照组与正常组p2x3受体蛋白的表达无统计学差异(p>0.05);心肌痛组、电针组、拮抗剂组的p2x3受体蛋白较正常组和对照组均显著上升(p p2x3受体蛋白表达都明显下降(均p p2x3受体蛋白表达比电针组稍高，但没有统计学差异(p>0.05)。 5.各组大鼠p2x3受体mRNA的表达情况 (1)各组大鼠心肌组织p2x3受体mRNA的表达情况：正常组大鼠心肌组织有p2x3受体mRNA的表达;对照组与正常组p2x3受体mRNA的表达无统计学差异(p>0.05);心肌痛组、电针组、拮抗剂组的p2x3受体mRNA较正常组和对照组均显著上升(p p2x3受体mRNA表达都明显下降(均p p2x3受体mRNA表达比电针组稍高，但没有统计学差异(p>0.05)。 (2)各组大鼠脊髓背角p2x3受体mRNA的表达情况：正常组大鼠脊髓背角有p2x3受体mRNA的表达;对照组与正常组p2x3受体mRNA的表达无统计学差异(p>0.05);心肌痛组、电针组、拮抗剂组的p2x3受体mRNA较正常组和对照组均显著上升(p p2x3受体mRNA表达明显下降(均p p2x3受体mRNA表达比电针组稍高，但没有统计学差异(p>0.05)。 (3)各组大鼠下丘脑p2x3受体mRNA的表达情况：正常组大鼠下丘脑有p2x3受体mRN

关键词： p2x3受体心肌痛 “内关”穴 A-317491

Sigma-1受体/pKC对神经痛大鼠背根节p2x3受体表达的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

Sigma-1受体/PKC对神经痛大鼠背根节P2X3受体表达的影响

作者：刘双双遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究采用大鼠坐骨神经慢性缩窄性损伤(Chronic constrictive injury,CCI)模型,通过观察鞘内注射Sigma-1受体拮抗剂BD1047、pKCα抑制剂Go6976、pKCε抑制剂εV1-2对大鼠疼痛行为学及对Sigma-1受体、p-pKCα、p-pKCε、p2x受体表... 详细信息

目的:本研究采用大鼠坐骨神经慢性缩窄性损伤(Chronic constrictive injury,CCI)模型,通过观察鞘内注射Sigma-1受体拮抗剂BD1047、pKCα抑制剂Go6976、pKCε抑制剂εV1-2对大鼠疼痛行为学及对Sigma-1受体、p-pKCα、p-pKCε、p2x受体表达的影响,探讨Sigma-1受体/pKC对神经痛大鼠背根节p2x受体表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为7组:Sham组(假手术组)、CCI组(神经病理性疼痛组)、CCI+BD1047组(Sigma-1受体拮抗剂BD1047处理组)、CCI+Go6976组(pKCα抑制剂Go6976处理组)、CCI+εV1-2组(pKCε抑制剂εV1-2处理组)、Sham+DMSO组(Sham+鞘内注射1%DMSO组)、CCI+DMSO组(CCI+鞘内注射1%DMSO组)。Sham组和Sham+DMSO组只分离坐骨神经主干,CCI组、CCI+BD1047组、CCI+Go6976组、CCI+εV1-2组、CCI+DMSO组建立CCI。CCI术后第1-14天鞘内给药,术前1天和术后l、3、7、10、14天给药后检测大鼠热缩足反射潜伏期(Thermal withdrawal latency,TWL)、机械缩足反射阈值(Mechanical withdrawal threshold,MWT)。术后7天、14天取大鼠术侧背根神经节,Western blot检测7组大鼠背根节Sigma-1受体、p-pKCα、p-pKCε、p2x受体的蛋白表达,免疫荧光检测Sham组、CCI组和CCI+BD1047组大鼠背根节p-pKCα、p-pKCε和p2x受体共表达情况。结果:1.行为学变化:Sham组、Sham+DMSO组大鼠在术后各观察时点均未观察到足跖并拢、背屈、舔舐、悬空等症状;在术后各时点,CCI组和CCI+DMSO组均有足跖背屈、舔舐、跛行等神经性痛症状,无运动功能障碍和自噬现象。术后各时间点,CCI+BD1047组、CCI+Go6976组、CCI+εV1-2组大鼠结扎侧足趾背屈、舔舐、跛行等神经痛症状明显减轻,且未观察到运动功能障碍和自噬。2.痛阈测定:组间比较:与Sham组相比,CCI组、CCI+DMSO组术后各时点TWL、MWT下降(pp>0.05);与CCI组相比,CCI+BD1047组、CCI+Go6976组术后各时点TWL明显延长,MWT在第7、10和14天显著升高(p2组TWL于术后3、7、10、14天明显延长,MWT于术后7、10、14天明显升高(pp>0.05)。组内比较:Sham组、Sham+DMSO组各时点TWL、MWT无显著性差异(p>0.05);CCI组、CCI+BD1047组、CCI+Go6976组、CCI+εV1-2组、CCI+DMSO组术后各时间点TWL、MWT随时间延长而降低,差异具有统计学意义(pp>0.05)。*** blot结果:与Sham组相比,CCI组术后7、14天背根神经节中的Sigma-1受体、p-pKCα、p2x受体蛋白增加,术后14天背根神经节中p-pKCε受体蛋白增加(p2组术后7、14天Sigma-1受体蛋白减少(pp-pKCα蛋白减少(p2组术后14天p-pKCε蛋白减少(p2组术后7、14天p2x蛋白减少(pp-pKCα和p2x受体共表达荧光强度增加、CCI术后14天p-pKCε与p2x受体共表达荧光强度增加(pp-pKCα、p2x受体共表达荧光强度强度减少(pp-pKCε、p2x受体共表达荧光强度减少(p受体、p-pKCα、p-pKCε、p2x受体表达增加,Sigma-1受体/pKC可能对神经痛大鼠背根节p2x受体表达具有调节作用。

关键词：神经病理性疼痛背根神经节 Sigma-1受体 pKC p2x3受体

不同时间针刺对不同状态大鼠穴区神经电活动及p2x3受体影响的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

不同时间针刺对不同状态大鼠穴区神经电活动及P2X3受体影响的研究

作者：黄士其成都中医药大学

学位级别：硕士

目的:研究不同时间针刺对不同状态大鼠穴区神经电活动的作用及其对穴区、背根神经节、脊髓p2x3受体的影响,以期从经穴反应性动态变化为切入点,揭示择时针刺镇痛的外周机制。方法:实验由三部分组成。(1)将SD雄性大鼠(清洁级)置于动物节... 详细信息

目的:研究不同时间针刺对不同状态大鼠穴区神经电活动的作用及其对穴区、背根神经节、脊髓p2x3受体的影响,以期从经穴反应性动态变化为切入点,揭示择时针刺镇痛的外周机制。方法:实验由三部分组成。(1)将SD雄性大鼠(清洁级)置于动物节律隔离单元,驯化7天后,将大鼠随机分为空白组和空针组,每组根据处理时间的不同,分为ZT0、ZT4、ZT8、ZT12、ZT16、ZT20,六个亚组。在各时间点对空针组大鼠进行右侧“足三里”穴针刺,每5min行针一次,持续5min,留针30min,同时通过power Lab对穴区腓总神经神经电活动进行记录,空白组不针刺,只记录神经电活动。(2)将驯化后的大鼠随机分为空白组和造模组。造模组在大鼠右侧足垫部皮内注射完全弗氏佐剂0.1ml,空白组注射等量的生理盐水。待模型制备成功后,将造模组随机分为模型组与模针组。在造模成功第2天,模针组于各亚组对应的时间点针刺患侧“足三里”穴,每5min行针一次,持续5min,留针30min,同时通过power Lab对穴区腓总神经神经电活动进行记录,空白组及模型组不针刺,只记录神经电活动。(3)将驯化后的动物按照实验二的方法分为空白组及造模组。待模型复制成功后将造模组大鼠随机分为模型组和模针组。造模成功的第2天,根据实验二统计结果,结合前期不同时间针刺镇痛研究结果选择效应最优和最差时间点进行实验。模针组于特定时间点针刺患肢“足三里”穴,每5min行针一次,持续1min,空白及模型组只在相应时间点作捆绑处理。第7天治疗结束后,采用免疫组化法检测不同组特征时间点“足三里”穴局部皮肤组织、背根神经节(L4-L6)、脊髓(L4-L6)中p2x3受体的表达。结果:1.生理状态下:(1)不同时间点针刺可促进穴区局部神经放电次数。穴区局部神经放电次数:空针组与空白组比较,在ZT0、ZT8、ZT12和ZT20,差异具有统计学意义,p值分别为0.002、0.000、0.044和0.000;在ZT4和ZT16,差异不具有统计学意义,p值分别为0.470和0.237。(2)时间因素与各组穴区局部神经放电次数存在交互效应。在不同时间点,空针组与空白组比较,穴区局部神经放电次数差异具有统计学意义,p=0.000,p2.病理状态下:(1)不同时间点针刺可促进穴区局部神经放电次数,降低神经放电平均幅值。穴区局部神经放电次数:模型组与空白组比较,在ZT12和ZT16,差异具有统计学意义,p值分别为0.002和0.000;在ZT0、ZT4、ZT8和ZT20,差异无统计学意义,p值分别为0.948、0.267、0.924、0.408。模针组与空白组比较,在ZT8和ZT20,差异具有统计学意义,p值分别为0.000和0.013;在ZT0、ZT4、ZT12、ZT16,差异无统计学意义,p值分别为0.314、0.665、0.188、0.631。模针组与模型组比较,在ZT4、ZT8、ZT12、ZT16和ZT20,差异具有统计学意义,p值分别为0.001、0.002、0.000、0.000和0.004;在ZT0,差异无统计学意义,p值为0.534。穴区局部神经放电平均幅值:模型组与空白组比较,在ZT4、ZT8、ZT12、ZT16和ZT20,差异具有统计学意义,p值分别为0.000、0.000、0.007、0.009和0.002;在ZT0,差异无统计学意义,p值为0.093。模针组与空白组比较,在ZT0、ZT4、ZT12、ZT16和ZT20,差异具有统计学意义,p值分别为0.001、0.000、0.003、0.016和0.003;在ZT8,差异无统计学意义,p值为0.065。模针组与模型组比较,在ZT4、ZT8、ZT12和ZT20,差异具有统计学意义,p值分别为0.000、0.000、0.037和0.009;在ZT0和ZT16,差异无统计学意义,p值分别为0.271,0.117。(2)时间因素与各组穴区局部神经放电次数存在交互效应。在不同时间点,空白组、模型组与模针组比较,穴区局部神经放电次数差异具有统计学意义,p=0.000,pp=0.000,pp2x3受体表达明显升高,p=0.000,pp2x3受体表达明显降低p=0.001,pp2x3受体表达明显升高,p=0.003,pp2x3受体表达无明显差异。4.在背根神经节(L4-L6):ZT8时间点,与空白组

关键词：择时针刺经穴反应性神经电活动 p2x3受体

p2x2、p2x3受体在女性OAB患者膀胱粘膜中的表达及意义

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

P2X2、P2X3受体在女性OAB患者膀胱粘膜中的表达及意义

作者：邢猛中南大学

学位级别：硕士

目的：检测女性OAB患者膀胱粘膜中p2x2.p2x3受体的表达,探讨膀胱粘膜中p2x2.p2x3受体在女性OAB患者发病中的作用,为OAB的药物治疗提供指导。方法：收集自愿参加本研究的女性OAB患者及无OAB症状的女性上尿路结石患者,分为OAB组及对照... 详细信息

目的：检测女性OAB患者膀胱粘膜中p2x2.p2x3受体的表达,探讨膀胱粘膜中p2x2.p2x3受体在女性OAB患者发病中的作用,为OAB的药物治疗提供指导。方法：收集自愿参加本研究的女性OAB患者及无OAB症状的女性上尿路结石患者,分为OAB组及对照组,并用膀胱过度活动综合症评分问卷表（OABSS）对OAB患者的症状严重程度进行评估。膀胱镜下活检获得患者膀胱颈部粘膜标本。用Western Blot方法检测两组膀胱粘膜标本中p2x2.p2x3受体的表达情况。采用两独立样本t检验方法分析两组p2x2及p2x3受体表达量的统计学差异,用Spearman等级相关分析方法分析p2x2.p2x3受体的表达与年龄的相关性及OAB组p2x2.p2x3受体的表达与OABSS评分的相关性。结果：本实验共收集女性OAB患者膀胱粘膜标本11例,对照组标本13例。对照组p2x2.p2x3受体表达量的标化值均数分别为：0.442±0.***.0.503±0.125;OAB组p2x2.p2x3受体表达量的标化值分别为：（0.654±0.137）.（0.713±0.168）.OAB组p2x2.p2x3受体的表达量较对照组升高（p＜0.05）.OAB组p2x2.p2x3受体的表达量与OABSS评分呈正相关（rp2x2=0.908,p＜0.05;rp2x3=0.908, p＜0.05）,而与年龄无明显相关性（rp2x2=0.555,p＞0.05;rp2x3=0.409,p＞0.05）:对照组p2x2.p2x3受体蛋白的表达量与年龄呈正相关（rp2x2:0.731,p＜0.05;rp2x3=0.665,p＜0.05）. 结论：p2x2、p2x3受体与女性OAB有着密切的关系,p2x2、 p2x3受体女性OAB患者膀胱粘膜中表达均升高并与其症状严重程度呈正相关,提示p2x2、p2x3受体参与了OAB的发生发展;女性膀胱粘膜中的p2x2、p2x3受体表达与年龄相关。

关键词：膀胱过度活动综合征女性膀胱粘膜 p2x2受体 p2x3受体

神经病理性疼痛大鼠脊髓背角p2x3受体的表达与感觉神经元变化的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

神经病理性疼痛大鼠脊髓背角P2X3受体的表达与感觉神经元变化的研...

作者：金海燕兰州大学

学位级别：硕士

目的:研究坐骨神经损伤后不同时间段大鼠脊髓背角p2x受体的表达、感觉神经元数量及神经元损伤超微结构的变化,探讨p2x受体与神经元损伤在神经病理性疼痛发生发展机制中的作用,为神经病理性疼痛的治疗提供新的理论基础。方法:200～220g... 详细信息

目的:研究坐骨神经损伤后不同时间段大鼠脊髓背角p2x受体的表达、感觉神经元数量及神经元损伤超微结构的变化,探讨p2x受体与神经元损伤在神经病理性疼痛发生发展机制中的作用,为神经病理性疼痛的治疗提供新的理论基础。方法:200～220g雄性SD大鼠40只,随机分为正常对照组和坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)组。CCI组大鼠又分为3组,即CCI术后3d组、CCI术后7d组和CCI术后14d组,每组10只。术后采用热板法测定大鼠后爪热缩足潜伏期(pTWL)的变化,以确定神经病理性疼痛模型的成功建立;并于术后3d、7d和14d处死大鼠,取L4～5脊髓,每组8只用免疫组化实验测定脊髓背角p2x受体的表达和HE染色测定脊髓背角神经元数量变化;每组另外2只在透射电镜下观察脊髓背角感觉神经元超微结构的变化。结果:p2x受体的表达主要分布在脊髓背角的Ⅱ层;与正常组及健侧相比,CCI大鼠术侧脊髓背角p2x受体的表达在术后7d和14d明显增加(p＜0.05),胞浆着色深度和阳性细胞数均增加。HE染色光镜下,与正常组及健侧相比,CCI大鼠在术后7d和14d术侧脊髓背角神经元数量明显减少(p＜0.05)。电镜下,CCI大鼠在术后3d L4～5节段脊髓术侧背角浅层神经元形态学典型变化为:细胞肿胀,胞膜完整,胞浆内大量空泡,核结构基本正常,呈paraptosis表现;7d和14d神经元形态变化:细胞皱缩、密度增大,核带增多及染色质浓聚贴附于核膜,呈凋亡形式程序性细胞死亡表现。结论:CCI神经病理性疼痛模型中,大鼠p2x受体的表达在术后7d和14d明显上调,而且p2x受体在脊髓的分布主要在与疼痛信息传递相关的背角Ⅱ层;大鼠脊髓背角神经元术后3d感觉神经元paraptosis形式程序性细胞死亡;术后7d和14d呈凋亡形式程序性细胞死亡,并且神经元数量明显减少,出现神经元的丢失。大鼠脊髓背角p2x受体的变化与感觉神经元数量的变化及超微结构的变化在时间上有一致性,表明脊髓背角p2x受体和感觉神经元的丢失及凋亡与神经病理性疼痛有关,其在神经病理性疼痛中的作用有待进一步研究。在神经病理性疼痛模型中首次观察到paraptosis形式程序性细胞死亡,而它的出现与神经病理性疼痛的发生有怎样的关系,其在神经病理性疼痛中的作用等都尚需进一步的探究。

关键词：神经病理性疼痛脊髓背角 p2x3受体感觉神经元免疫组化超微结构 paraptosis 凋亡

高乌甲素对神经病理性疼痛大鼠背根神经p2x3受体转运的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

高乌甲素对神经病理性疼痛大鼠背根神经P2X3受体转运的影响

作者：冯琪成都中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨高乌甲素(lappaconitine,LA)对神经病理性疼痛(neuropathic pain,Npp)大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元轴突中嘌呤能p2x3受体转运的影响。方法:选择72只SpF级雄性Sprague-Dawley大鼠,采用手术结扎右侧坐骨神经造成坐骨神经慢性压迫性损伤(chronic constriction injury of sciatic nerve,CCI)的方法构建Npp模型。按照随机数字法表分为以下3组:CCI组、CCI+LA组和假手术(Sham)组,每组24只。CCI组结扎坐骨神经;CCI+LA组在经过与CCI组相同的处理后给予0.2%的LA(4 mg/kg,腹腔注射,1次/d,共1次,其余两组以同样方式注射等量生理盐水);正常对照组仅暴露右侧坐骨神经而不结扎。分别于伤前以及伤后第2,6,12,24h,用校准的von Frey丝和热爪刺激仪分别测定各组大鼠的机械缩足反射阈值(mechanical thermal withdrawal latency,MWT)和热缩足反射潜伏期(thermal foot retraction latency,TWL),以评价神经损伤引起的神经痛症状(机械性痛觉过敏和热痛觉过敏)。伤后2,6,12,24h,收集3组大鼠神经结扎点近端和远端的神经片段,采用Western blot法检测各组大鼠伤后2,6,12,24hp2x3受体表达量和伤后24h神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和酪氨酸激酶受体 A(tyrosine kinase receptorA,TrkA)表达量,以评估LA对p2x3受体、NGF和TrkA的影响。结果:行为学测定结果:建模前,3组大鼠的MWT和TWL差异均无统计学意义(p>0.05),3组大鼠具有可比性,可以进行下一步实验。与Sham组比较,伤后 2,6,12,24hCCI 组和 CCI+LA 组的 MWT、TWL 明显降低(pp>0.05),伤后 12,24hCCI+LA 组的 MWT、TWL 明显高于 CCI 组(pp2x3受体表达量差异无统计学意义(p>0.05)。远端坐骨神经片段中,伤后2,6,12,24hCCI组p2x3受体表达量均高于Sham组(pp2x3受体表达量高于Sham组(pp2x3受体表达量差异无统计学意义(p>0.05);伤后2,6hCCI组和CCI+LA组p2x3受体表达量差异无统计学意义(p>0.05),而伤后12,24hCCI+LA组p2x3受体表达量低于CCI组(ppp>0.05)。在近端和远端坐骨神经片段中,伤后24h各组间TrkA表达量差异无统计学意义(p>0.05)。结论:LA处理可以缓解Npp大鼠的机械性痛觉过敏和热痛觉过敏;LA处理可以减少p2x3受体在坐骨神经结扎点远端的表达量,却未影响NGF和TrkA这两个与疼痛密切相关的轴浆转运标签蛋白在坐骨神经结扎点附近的表达。由此推测,LA通过p2x3受体介导的镇痛机制可能与LA减少了DRG神经元轴突中p2x3受体的逆向转运有关。

关键词：高乌甲素 p2x3受体神经病理性疼痛轴突转运信号内吞体

咬肌炎症模型中p2x3受体在咬肌和三叉神经节内的表达及其动态变化

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

咬肌炎症模型中P2X3受体在咬肌和三叉神经节内的表达及其动态变化

作者：陈勇暨南大学

学位级别：硕士

目的:探明p2x受体在咬肌和三叉神经节内的表达及分布,追踪咬肌内p2x受体阳性神经纤维胞体在三叉神经节中的定位和分布,明确在咬肌炎症性疼痛模型中及药物干预下三叉神经节内p2x受体表达水平的变化和变化规律,揭示p2x受体在咀嚼肌炎症性... 详细信息

目的:探明p2x受体在咬肌和三叉神经节内的表达及分布,追踪咬肌内p2x受体阳性神经纤维胞体在三叉神经节中的定位和分布,明确在咬肌炎症性疼痛模型中及药物干预下三叉神经节内p2x受体表达水平的变化和变化规律,揭示p2x受体在咀嚼肌炎症性疼痛发生发展中的作用及机制,为临床介入治疗,如用p2x受体拮抗剂治疗咀嚼肌疼痛提供理论与实验依据。方法:25只SD大鼠编号,随机分为为5组,分别设立对照组、咬肌炎症性疼痛2天、咬肌炎症性疼痛4天、咬肌炎症性疼痛6天、药物干预组,每组5只。采用完全氟氏佐剂多点注射咬肌区建立咬肌炎性模型。各组动物在处死前48小时,在手术直视下于咬肌内部多点注射HRp示踪剂。使用p2x受体拮抗剂ppADS建立药物干预组,即注射完全氟氏佐剂建立炎性模型后,同期同侧多点注射ppADS,两天后处死。咬肌炎症模型采用HE染色及动物行为学变化验证。应用HRp逆行神经追踪和结合免疫组织化学ABC相结合的双标技术,检测p2x受体在咬肌和三叉神经节内的表达、分布及定位,并用图像分析仪对检测数据进行分析和量化处理。观察咬肌炎症性疼痛模型实施后以及在p2x受体拮抗剂干预下三叉神经节中p2x受体阳性神经元表达的变化和变化规律。结果:在咬肌肌纤维问发现少量p2x受体免疫阳性神经纤维分布;在三叉神经节内p2x受体免疫阳性神经元主要为小直径神经元(直径＜30μm)。HRp标记神经元、HRp-p2x受体双重标记神经元定位于三叉神经节下外侧部,即下颌突内。咬肌炎症性模型实施后,三叉神经节内p2x受体阳性神经元及HRp-p2x受体双重标记神经元比例均增加,尤以4天组为甚。p2x受体拮抗剂ppADS干预后三叉神经节中p2x受体阳性神经元表达显著减少。结论:p2x受体参与了咀嚼肌炎症性疼痛的发生和发展,p2x受体可作为临床介入治疗咀嚼肌疼痛的靶标。

关键词： p2x3受体三叉神经节咬肌 SD大鼠

星状交感神经节细胞p2x3受体介导心肌痛伤害性信息作用的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

星状交感神经节细胞P2X3受体介导心肌痛伤害性信息作用的研究

作者：张春平南昌大学

学位级别：硕士

目的本研究探讨p2x3受体在星状神经节(SG)神经元细胞介导心肌痛伤害性信息传递中的作用。方法(1)用免疫组化和Western blotting (蛋白印迹技术)检测心肌缺血组,A-317491干预组和对照组三组大鼠SG神经元p2x3的免疫反应性和p2x3蛋白的表达... 详细信息

目的本研究探讨p2x3受体在星状神经节(SG)神经元细胞介导心肌痛伤害性信息传递中的作用。方法(1)用免疫组化和Western blotting (蛋白印迹技术)检测心肌缺血组,A-317491干预组和对照组三组大鼠SG神经元p2x3的免疫反应性和p2x3蛋白的表达(;2)用原位杂交和逆转录聚合酶链式反应(RT-pCR)检测p2x3mRNA的表达;(3)用全细胞膜片钳技术观察p2x受体激动剂激活电流及p2x3受体特异性拮抗剂的影响。结果(1)免疫组化结果显示心肌缺血组,A-317491干预组和对照组SG神经元p2x3受体阳性细胞灰度值分别为219.87±7.59 , 203.43±10.67 (p24.43(p2)原位杂交结果显示心肌缺血组,A-317491干预组和对照组单位面积内的灰度值为177.21±21.99,151.91±13.91(p2±32.12(px光胶片上测得的光密度扫描值经β-actin条带的扫描值标化为1.48±0.27,1.35±0.33(p2±0.48(ppCR获得目的电泳条带的斑点密度扫描值经β-actin条带的扫描值标化,心肌缺血组,A-317491干预组和对照组SG分别为0.231±0.004,0.135±0.004 ,0.120±0.004;(5)全细胞膜片钳结果显示随ATp浓度(1-1000μmol/L)的增加,大鼠SG神经元ATp-激活电流(IATp)增加;心肌缺血组IATp较对照组增大,ATp浓度为100μmol/L时心肌缺血组IATp为对照组的2.4±0.3倍,α,β-meATp-激活电流心肌缺血组也较对照组增大;A-317491浓度在100-10000 nmol/L范围内,对心肌缺血组和对照组大鼠SG神经元ATp(100μmol/L)和α,β-meATp(10μmol/L)的激活电流均有抑制作用,但对心肌缺血组IATp的抑制作用更为明显。结论心肌缺血后p2x3受体在星状神经节神经元的表达增加、SG神经元p2x受体激动剂激活电流增大;p2x3受体特异性拮抗剂A-317491可减少心肌缺血后p2x3受体在星状神经节神经元的表达,并明显抑制心肌缺血后星状神经节神经元p2x3受体激活后增强的电流。结果表明星状神经节神经元p2x3受体涉及心肌痛伤害性信息传递。

关键词：三磷酸腺苷 p2x3受体心肌痛星状神经节 A-317491

FTO上调p2x3受体表达参与腰椎间盘突出症模型大鼠痛觉高敏的机制研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

FTO上调P2X3受体表达参与腰椎间盘突出症模型大鼠痛觉高敏的机制...

作者：江永亮苏州大学

学位级别：硕士

实验目的:腰椎间盘突出症（Lumbar disc herniation,LDH）是骨科常见的临床综合症,常常伴有下腰痛及下肢放射痛。目前大部分学者认为突出的椎间盘组织所诱发的机械性压迫、化学炎症刺激和自身免疫反应等因素可能参与了疼痛的发病机制,... 详细信息

实验目的:腰椎间盘突出症（Lumbar disc herniation,LDH）是骨科常见的临床综合症,常常伴有下腰痛及下肢放射痛。目前大部分学者认为突出的椎间盘组织所诱发的机械性压迫、化学炎症刺激和自身免疫反应等因素可能参与了疼痛的发病机制,但是这些致病因素所引起的痛觉信号通路尚不完全清楚。我们前期的研究发现,p2x3受体参与了腰椎间盘突出症模型大鼠的痛觉高敏,并上调了 L5/L6背根神经节（Dorsal Root Ganglion,DRG）内p2x3受体的蛋白水平。本研究发现LDH模型大鼠对应DRGs内RNA去甲基化酶肥胖基因（FTO）的mRNA和蛋白水平均升高。因此,本研究旨在探究FTO信号分子对LDH模型大鼠痛觉高敏的机制,为临床上腰椎间盘突出症根源性疼痛的治疗提供理论依据和新的方案。实验方法:1.模型的建立:将鼠龄6-8周、体重220±20g的SD雄性大鼠分成实验组与假手术组,麻醉后微型显微镜下暴露大鼠L5/L6左侧神经根及对应DRGs,实验组则将自体尾椎髓核取出并移至L5/L6左侧神经根表面以此建立大鼠LDH模型,假手术组则仅暴露对应节段左侧神经根及对应DRGs,余处理和实验组相同。2.模型痛敏行为的检测:分别在术前1天,术后3、7、14、21、28天采用Von Frey丝和光热测痛仪来测定大鼠的机械痛和热痛阈值。3.分子表达检测:运用qRT-pCR和Western Blotting技术检测FTO和p2x3受体在LDH模型大鼠相关DRGs内的表达水平。4.疼痛翻转实验:通过鞘内微量注射法给予FTO siRNA后,检测LDH大鼠的机械痛和热痛阈值,并运用qRT-pCR和Western Blotting技术检测其相关DRGs内FTO和p2x3受体的表达水平。实验结果:1.与假手术组相比,实验组上调了 L5/L6背根神经节（DRG）内FTO的mRNA水平,而 METTL3、METTL14、WTAp、ALKBH5、YTHDF1、YTHDF2 及 YTHDF3的mRNA水平并没有发生明显变化。2.与假手术组相比,实验组增加了 L5/L6背根神经节（DRG）内FTO、p2x3R、TLR4的蛋白表达量,而p2Y6R、p2Y12R、TLR7的蛋白表达量并没有发生明显变化。3.对LDH大鼠鞘内注射FTO siRNA后,发现能够显著翻转LDH大鼠的疼痛阈值。运用qRT-pCR方法检测,能够逆转DRGs内FTO的mRNA水平,而METTL3、METTL14、WTAp、ALKBH5、YTHDF1、YTHDF2 及 YTHDF3 的 mRNA水平并没有发生明显变化。运用Western Blotting方法检测,能够逆转DRGs内FTO、p2x3R的蛋白水平,而p2Y6R、p2Y12R、TLR4、TLR7的蛋白表达量并没有发生明显变化。髓核压迫可导致腰椎间盘突出症模型大鼠的痛觉高敏,且伴随p2x3受体蛋白的高表达以及FTO mRNA水平和蛋白的升高。鞘内注射FTO siRNA可通过降低FTO和p2x3受体高表达,从而缓解髓核压迫引起的痛觉高敏。因此,本研究在一定程度上揭示了腰椎间盘突出症根源性疼痛的分子机制,为神经病理性疼痛的治疗提供了更多的治疗方案。

关键词：腰椎间盘突出症(LDH) 神经病理性疼痛(Np) N-6甲基腺嘌呤(m~6A) 肥胖基因(FTO) p2x3受体背根神经节(DRG)

基于p2x3受体介导的pKC炎症反应通路研究羌活治“上肢痹痛”的机制

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

基于P2X3受体介导的PKC炎症反应通路研究羌活治“上肢痹痛”的机制

作者：杨策福建中医药大学

学位级别：硕士

目的本研究旨从p2x3受体介导的pKC炎症反应通路层面探讨羌活治上肢痹痛的分子机制,阐明其临床上擅治上肢痹痛的科学内涵,为羌活临床应用提供实验依据。方法1采用MTT法,体外试验研究羌活在不同浓度(150、175、200、225、250μg/mL)、不... 详细信息

目的本研究旨从p2x3受体介导的pKC炎症反应通路层面探讨羌活治上肢痹痛的分子机制,阐明其临床上擅治上肢痹痛的科学内涵,为羌活临床应用提供实验依据。方法1采用MTT法,体外试验研究羌活在不同浓度(150、175、200、225、250μg/mL)、不同干预时间(24、48、72h)对大鼠成纤维化滑膜细胞(FLS)增殖的影响;将生长同步化的FLS分为对照组、羌活组、阳性组,采用RT-pCR法和Western-Blot法分别检测p2x3、Rab7、pKC、CxCL1、TLR4基因与蛋白的表达。2将大鼠随机分成空白组、模型组、阳性对照组、羌活组,采用弗式佐剂复制大鼠上肢关节炎模型,各组于模型成功后开始给药,连续灌胃给药21天,后摘取关节腔。采用RT-pCR法和Western-Blot法分别检测p2x3、Rab7、pKC、CxCL1、TLR4基因与蛋白的表达。结果1 MTT法确定羌活给药时间为24h,浓度为175μg/mL。羌活可显著抑制FLS中p2x3受体mRNA和蛋白的表达(pppppKC mRNA与蛋白的表达(pxCL1基因与蛋白的表达(pppKC通路下NF-κB mRNA和蛋白的表达(pp2羌活可显著抑制佐剂型上肢关节炎模型关节腔中p2x3受体mRNA和蛋白的表达(pppKC mRNA与蛋白的表达(pxCL1基因与蛋白的表达(pppKC通路下NF-κB mRNA和蛋白的表达(pp2x3受体介导的pKC炎症通路相关。

关键词：羌活类风湿性关节炎 p2x3受体 pKC炎症通路痹证