基于P2X3受体介导的PKC炎症反应通路研究羌活治“上肢痹痛”的机制

作     者：杨策 

作者单位：福建中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王英豪

授予年度：2020年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：羌活 类风湿性关节炎 P2X3受体 PKC炎症通路 痹证 

摘      要：目的本研究旨从P2X3受体介导的PKC炎症反应通路层面探讨羌活治上肢痹痛的分子机制,阐明其临床上擅治上肢痹痛的科学内涵,为羌活临床应用提供实验依据。方法1采用MTT法,体外试验研究羌活在不同浓度(150、175、200、225、250μg/mL)、不同干预时间(24、48、72h)对大鼠成纤维化滑膜细胞(FLS)增殖的影响;将生长同步化的FLS分为对照组、羌活组、阳性组,采用RT-PCR法和Western-Blot法分别检测P2X3、Rab7、PKC、CXCL1、TLR4基因与蛋白的表达。2将大鼠随机分成空白组、模型组、阳性对照组、羌活组,采用弗式佐剂复制大鼠上肢关节炎模型,各组于模型成功后开始给药,连续灌胃给药21天,后摘取关节腔。采用RT-PCR法和Western-Blot法分别检测P2X3、Rab7、PKC、CXCL1、TLR4基因与蛋白的表达。结果1 MTT法确定羌活给药时间为24h,浓度为175μg/mL。羌活可显著抑制FLS中P2X3受体mRNA和蛋白的表达(P0.05或P0.01)及其转运蛋白Rab7 mRNA和蛋白的表达(P0.05或P0.01);显著抑制下游PKC mRNA与蛋白的表达(P0.05),并下调相关炎症因子TLR4和CXCL1基因与蛋白的表达(P0.05或P0.01);显著降低PKC通路下NF-κB mRNA和蛋白的表达(P0.05或P0.01)。2羌活可显著抑制佐剂型上肢关节炎模型关节腔中P2X3受体mRNA和蛋白的表达(P0.05)及其转运蛋白Rab7 mRNA和蛋白的表达(P0.05);显著抑制下游PKC mRNA与蛋白的表达(P0.05),并下调相关炎症因子TLR4和CXCL1基因与蛋白的表达(P0.05或P0.01);显著降低PKC通路下NF-κB mRNA和蛋白的表达(P0.01)。结论羌活治疗上肢痹痛的机制与抑制P2X3受体介导的PKC炎症通路相关。