电针“内关”对实验性心肌痛大鼠P2X3受体影响的研究

作     者：严琴 

作者单位：湖北中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张英

授予年度：2014年

学科分类：1005[医学-中医学] 100512[医学-针灸推拿学] 10[医学] 

主      题：P2X3受体 心肌痛 “内关”穴 A-317491 

摘      要：目的 以异丙肾上腺素(isoproterenol, ISO)注射诱发的急性心肌痛大鼠为观察对象，运用分子生物学技术，观察电针“内关对大鼠心肌、脊髓背角、下丘脑部位的P2X3受体蛋白和mRNA表达的影响，全面了解P2X3受体在心肌痛痛信息产生及传递过程中的作用，揭示电针“内关对心肌痛痛信息传递的影响及作用机制。 方法 将健康雄性SD大鼠35只，随机分为正常组、对照组、心肌痛组、电针组和拮抗剂组，每组7只。正常组不做任何处理;对照组注射与心肌痛组等量的生理盐水;心肌痛组背部皮下注射ISO;电针组电针双侧“内关30分钟后注射ISO;拮抗剂组腹腔注射特异性拮抗剂A-317491后注射ISO。所有处理连续14天。观察大鼠体重和行为学的变化，HE染色观察大鼠心肌组织变化，West blotting和RT-PCR技术分别检测大鼠心肌组织、脊髓背角和下丘脑P2X3受体蛋白和mRNA表达的变化。 结果 1.大鼠体重的变化情况：正常组大鼠体重稳定增长;对照组大鼠体重稳定增长，但与正常组相比有差异(p 0.05);电针组和拮抗剂组相比无统计学差异(p0.05)。 2.大鼠行为学的表现情况：正常组大鼠皮毛光泽，行动自如;对照组与正常组间行为学表现无统计学差异(p0.05);心肌痛组、电针组、拮抗剂组的行为学表现较正常组和对照组有显著性差异(均p 0.05)。 3.各组大鼠心肌组织HE染色情况：正常组和对照组的心肌细胞排列致密;心肌痛组可见严重的心肌细胞萎缩以及代偿性肥大和大面积的结缔组织增生现象;电针组和拮抗剂组可见轻微的细胞肥大和结缔组织增生。 4.各组大鼠P2X3受体蛋白的表达情况 (1)各组大鼠心肌组织P2X3受体蛋白的表达情况：正常组大鼠心肌组织有P2X3受体蛋白的表达;对照组与正常组P2X3受体蛋白的表达无统计学差异(p0.05);心肌痛组、电针组、拮抗剂组的P2X3受体蛋白表达较正常组和对照组均显著上升(均p 0.05)。 (2)各组大鼠脊髓背角P2X3受体蛋白的表达情况：正常组大鼠脊髓背角有P2X3受体蛋白的表达;对照组与正常组P2X3受体蛋白的表达无统计学差异(p0.05);心肌痛组、电针组、拮抗剂组的P2X3受体蛋白较正常组和对照组显著上升(p 0.05)。 (3)各组大鼠下丘脑P2X3受体蛋白的表达情况：正常组大鼠下丘脑有P2X3受体蛋白的表达;对照组与正常组P2X3受体蛋白的表达无统计学差异(p0.05);心肌痛组、电针组、拮抗剂组的P2X3受体蛋白较正常组和对照组均显著上升(p 0.05)。 5.各组大鼠P2X3受体mRNA的表达情况 (1)各组大鼠心肌组织P2X3受体mRNA的表达情况：正常组大鼠心肌组织有P2X3受体mRNA的表达;对照组与正常组P2X3受体mRNA的表达无统计学差异(p0.05);心肌痛组、电针组、拮抗剂组的P2X3受体mRNA较正常组和对照组均显著上升(p 0.05)。 (2)各组大鼠脊髓背角P2X3受体mRNA的表达情况：正常组大鼠脊髓背角有P2X3受体mRNA的表达;对照组与正常组P2X3受体mRNA的表达无统计学差异(p0.05);心肌痛组、电针组、拮抗剂组的P2X3受体mRNA较正常组和对照组均显著上升(p 0.05)。 (3)各组大鼠下丘脑P2X3受体mRNA的表达情况：正常组大鼠下丘脑有P2X3受体mRN