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低强度激光对正畸牙齿移动的疗效及对龈沟液IL-1β,RANKL和OPG表达水平的影响

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实用口腔医学杂志 2023年第2期39卷 243-247页

作者：董晶张哲谌李凌志南京中医药大学附属连云港市中医院口腔科 222000 上海交通大学附属第九人民医院口腔正畸科复旦大学附属华山医院口腔科

目的:探讨低强度激光(LILT)对正畸牙齿移动的疗效及龈沟液白细胞介素-1β(IL-1β),核因子κB受体激活剂配体(RANKL)和骨保护素(OPG)水平的影响。方法:纳入正畸治疗患者60例,随机分为试验组和对照组各30例,对照组使用牙齿正畸治疗,实验... 详细信息

目的:探讨低强度激光(LILT)对正畸牙齿移动的疗效及龈沟液白细胞介素-1β(IL-1β),核因子κB受体激活剂配体(RANKL)和骨保护素(OPG)水平的影响。方法:纳入正畸治疗患者60例,随机分为试验组和对照组各30例,对照组使用牙齿正畸治疗,实验组加用LILT治疗。比较治疗后牙齿累积移动距离(CMD)和平均回缩速度(ARS),以及不同时间段疼痛VAS评分和龈沟液IL-1β,RANKL和OPG水平。结果:试验组7、14、21 d,28 d牙齿CMD均大于对照组(POPG低于对照组,7、14和21 d RANKL高于对照组,21 d和28 d IL-1β高于对照组,7 d RANKL/OPG比率高于对照组(均P<0.05)。结论:LILT可通过影响骨代谢加速正畸牙齿的移动,并缓解治疗过程中的牙齿疼痛与牙周炎症。

关键词：低强度激光正畸牙齿移动 IL-1β RANKL OPG

对氯间甲酚以及复方对氯间甲酚对鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊的抑杀效果

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西北农业学报 2023年

作者：何学柏迟依明梁圣杰李澍杜孟泽李秋明北京农学院动物科学技术学院动物类国家级实验教学示范中心

为验证苯酚类消毒剂对鸡球虫卵囊的抑杀作用,采用不同浓度的单体和复方对氯间甲酚消毒剂与未孢子化的柔嫩艾美耳球虫卵囊共孵育,检测其对卵囊孢子化率的影响;与孢子囊共同孵育,通过子孢子脱囊率评价其对子孢子释放的干扰。孢子化卵囊经... 详细信息

为验证苯酚类消毒剂对鸡球虫卵囊的抑杀作用,采用不同浓度的单体和复方对氯间甲酚消毒剂与未孢子化的柔嫩艾美耳球虫卵囊共孵育,检测其对卵囊孢子化率的影响;与孢子囊共同孵育,通过子孢子脱囊率评价其对子孢子释放的干扰。孢子化卵囊经过不同浓度消毒剂直接浸泡、粪便干扰下浸泡或喷雾处理后经口接种雏鸡,通过OPG和盲肠病变记分探究消毒剂处理对卵囊的繁殖力和鸡的致病性的影响。结果显示,2种消毒剂均可使孢子化率和子孢子脱囊率显著下降,且3种浓度的复方对氯间甲酚与3%氨水对照组(PC)的消毒效果无显著差异。直接浸泡处理试验结果显示,2%和3%复方对氯间甲酚(HTS2和HTS3)具有更为显著的抑杀效果,与PC无显著差异;粪便干扰试验结果显示,粪便作用下这两种消毒剂对球虫卵囊仍有理想的抑杀效果;喷雾处理试验结果显示,3%对氯间甲酚(HT3)对球虫卵囊抑杀效果最好,显著优于PC组(P<0.05),而2%对氯间甲酚(HT2)、HTS2和HTS3组的抑杀效果与PC组无显著差异。研究结果表明,不同浓度下这2种消毒剂对孢子化和未孢子化的柔嫩艾美耳球虫卵囊都有一定的抑杀作用,综合比较,复方对氯间甲酚消毒剂具有更强的抑杀球虫卵囊效果,具有代替氨水成为鸡球虫消毒剂的潜能。

关键词：对氯间甲酚柔嫩艾美耳球虫 OPG 卵囊孢子化率子孢子脱囊率

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不同滋阴补肾法干预去势大鼠破骨通路的机制

中国组织工程研究 2024年

作者：黄小彬葛继荣李生强谢丽华黄景文何艳艳薛立鹏福建省中西医结合防治骨质疏松重点实验室(福建省中医药科学院福建中医药大学附属康复医院) 福建省中医药科学院骨质疏松证候基因组学重点研究室

背景：六味地黄丸以“三补三泻”为配伍特点，补泻兼施以滋阴补肾；左归丸以“阳中求阴”为配伍特点，以阳促阴补肾。二者同属于滋阴补肾法，其在证候和细胞分子水平等都发挥较好的疗效。目的：观察六味地黄丸和左归丸在骨代谢中的作用... 详细信息

背景：六味地黄丸以“三补三泻”为配伍特点，补泻兼施以滋阴补肾；左归丸以“阳中求阴”为配伍特点，以阳促阴补肾。二者同属于滋阴补肾法，其在证候和细胞分子水平等都发挥较好的疗效。目的：观察六味地黄丸和左归丸在骨代谢中的作用，探讨其在破骨通路骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)的作用机制。方法：将32只SD随机大鼠分为模型组、六味地黄丸组、左归丸组、假手术组，每组8只。除假手术组大鼠外，其余大鼠切除双侧卵巢制备骨质疏松模型。术后30 d开始六味地黄丸组大鼠灌胃六味地黄丸1.125 g/(kg·d)；左归丸组大鼠灌胃左归丸2.25 g/(kg·d)；假手术组和模型组灌胃生理盐水10 mL/(kg·d)。灌胃12周后，取大鼠胫骨检测骨密度，采用ELISA检测血清中雌激素E2、骨碱性磷酸酶、cAMP/cGMP水平，Western blot法检测股骨中OPG/RANKL的表达情况。结果与结论：(1)与假手术组相比，模型组骨密度及雌激素E2、骨碱性磷酸酶水平降低(P OPG蛋白表达(P OPG蛋白表达和下调RANKL蛋白表达均有作用(P 0.05)。(3)结果显示，“阳中求阴”的左归丸能够有效提高OPG表达，不能下调RANKL蛋白，而“三补三泻”的六味地黄丸能双向调节OPG和RANKL蛋白的表达，提示了六味地黄丸对抑制破骨功能方面可能比左归丸显著，此结论仍有待进一步的研究加以验证。

关键词：绝经后骨质疏松症肾阴虚证六味地黄丸左归丸骨保护 OPG RANKL 蛋白印迹

动物双歧杆菌LPL-RH增加去卵巢骨质疏松大鼠骨密度的机制研究

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中国食品添加剂 2023年第1期34卷 187-193页

作者：王双力王军利郭亚巍单吉苹武警黑龙江省总队医院哈尔滨150070 哈尔滨市第一医院哈尔滨150010

骨质疏松形成的主要原因是骨吸收增多、骨形成减少而造成的骨量减少,中老年女性发生绝经后骨质疏松的比例非常高,目前益生菌在防治骨质疏松中的应用受到越来越多的重视,本研究利用去卵巢骨质疏松大鼠模型,评价动物双歧杆菌LPL-RH株的治... 详细信息

骨质疏松形成的主要原因是骨吸收增多、骨形成减少而造成的骨量减少,中老年女性发生绝经后骨质疏松的比例非常高,目前益生菌在防治骨质疏松中的应用受到越来越多的重视,本研究利用去卵巢骨质疏松大鼠模型,评价动物双歧杆菌LPL-RH株的治疗作用和可能机制。每日2~4×109CFU/mL的动物双歧杆菌LPL-RH灌胃治疗后发现,治疗组大鼠的骨密度增加,骨生物力学改善,肠内容物中以丙酸和丁酸为代表的短链脂肪酸增多,治疗组血清中BCG、ALP、Ca浓度明显高于模型组。进一步的机制研究发现,补充LPL-RH后OPG基因表达水平量明显高于模型组,而RANKL基因表达水平明显降低,与模型组相比差异显著。表明动物双歧杆菌LPL-RH可能通过调节OPG/RANK/RANKL通路,影响OPG及RANKL基因的表达水平,发挥抗骨质疏松的作用。

关键词：动物双歧杆菌骨质疏松 OPG RANKL

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不同滋阴补肾法干预去势大鼠破骨通路的机制

中国组织工程研究 2025年第6期29卷 1214-1219页

作者：黄小彬葛继荣李生强谢丽华黄景文何艳艳薛立鹏福建省中医药科学院骨质疏松证候基因组学重点研究室福建省福州市350000 福建省中西医结合防治骨质疏松重点实验室(福建省中医药科学院福建中医药大学附属康复医院)福建省福州市350000

背景:六味地黄丸以“三补三泻”为配伍特点,补泻兼施以滋阴补肾;左归丸以“阳中求阴”为配伍特点,以阳促阴补肾。二者同属于滋阴补肾法,其在证候和细胞分子水平等都发挥较好的疗效。目的:观察六味地黄丸和左归丸在骨代谢中的作用,探讨... 详细信息

背景:六味地黄丸以“三补三泻”为配伍特点,补泻兼施以滋阴补肾;左归丸以“阳中求阴”为配伍特点,以阳促阴补肾。二者同属于滋阴补肾法,其在证候和细胞分子水平等都发挥较好的疗效。目的:观察六味地黄丸和左归丸在骨代谢中的作用,探讨其在破骨通路骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受体活化因子配体(receptoractivatorofnuclearfactor-κBligand,RANKL)的作用机制。方法:将32只SD随机大鼠分为模型组、六味地黄丸组、左归丸组、假手术组,每组8只。除假手术组大鼠外,其余大鼠切除双侧卵巢制备骨质疏松模型。术后30 d开始六味地黄丸组大鼠灌胃六味地黄丸1.125 g/(kg·d);左归丸组大鼠灌胃左归丸2.25 g/(kg·d);假手术组和模型组灌胃生理盐水10 mL/(kg·d)。灌胃12周后,取大鼠胫骨检测骨密度,采用ELISA检测血清中雌激素E2、骨碱性磷酸酶、cAMP/cGMP水平,Westernblot法检测股骨中OPG/RANKL的表达情况。结果与结论:①与假手术组相比,模型组骨密度及雌激素E2、骨碱性磷酸酶水平降低(POPG蛋白表达(POPG蛋白表达和下调RANKL蛋白表达均有作用(P0.05)。③结果显示,“阳中求阴”的左归丸能够有效提高OPG表达,不能下调RANKL蛋白,而“三补三泻”的六味地黄丸能双向调节OPG和RANKL蛋白的表达,提示了六味地黄丸对抑制破骨功能方面可能比左归丸显著,此结论仍有待进一步的研究加以验证。

关键词：绝经后骨质疏松症肾阴虚证六味地黄丸左归丸骨保护 OPG RANKL 蛋白印迹

流体剪切力介导Piezo1离子通道对MLO-Y4骨细胞凋亡及RANKL/OPG影响的机制研究

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流体剪切力介导Piezo1离子通道对MLO-Y4骨细胞凋亡及RANKL/OPG影...

作者：刘众成兰州大学

学位级别：硕士

目的:骨质疏松是一种全身骨骼的慢性退行性疾病。目前关于骨质疏松的发生、发展以及转归机制相对不明确。Piezo1通道蛋白是一种于2010年发现的机械敏感性阳离子通道蛋白,已被证实在维持骨稳态、平衡骨形成与骨重塑过程中发挥作用。骨细... 详细信息

目的:骨质疏松是一种全身骨骼的慢性退行性疾病。目前关于骨质疏松的发生、发展以及转归机制相对不明确。Piezo1通道蛋白是一种于2010年发现的机械敏感性阳离子通道蛋白,已被证实在维持骨稳态、平衡骨形成与骨重塑过程中发挥作用。骨细胞作为哺乳动物骨骼系统中含量最丰富的细胞之一,其凋亡相关表型与骨骼健康的关系不容忽视。RANKL/OPG作为调控破骨细胞分化及形成的关键分子,由骨细胞分泌并发挥重要作用。因此,对机械应力介导下Piezo1通道蛋白如何调控骨细胞凋亡以及RANKL/OPG分泌进行研究,可能对治疗骨质疏松提供新的治疗思路。方法:使用流体剪切应力(Fluid shear stress,FSS)加载装置对小鼠MLO-Y4骨样细胞进行干预,通过免疫荧光染色和Western blot探究FSS在MLO-Y4细胞中对Piezo1的调控作用及最佳条件。分别使用Piezo1激活剂Yoda1、阻滞剂Gs MTx4、FSS、siRNA-NOTCH3单独或双相对MLO-Y4细胞进行干预,应用Western blot及qRT-PCR检测NOTCH3、RANKL、OPG的表达情况;应用Western blot、Hoechnst-33258染色及流式细胞检测凋亡情况以及相关分子(Bcl-2、Cleaved Caspase-3以及Bax)的表达情况。结果:使用本课题组自行研发的FSS加载装置对MLO-Y4细胞进行干预后Piezo1蛋白表达呈现先上升后下降的单峰趋势,在9 dyne/cm下30分钟对Piezo1表达量的上调作用最佳(pOPG(pOPG(pOPG(pOPG的影响减弱。结论:1).FSS在9 dyne/cm强度下加载30分钟时上调MLO-Y4细胞的Piezo1表达。2).FSS介导Piezo1离子通道通过NOTCH3信号转导调控MLO-Y4细胞RANKL/OPG的表达。3).FSS通过Piezo1离子通道抑制MLO-Y4细胞凋亡。

关键词：流体剪切应力骨质疏松 Piezo1 凋亡 RANKL OPG NOTCH3

持续静压力作用下人牙周膜细胞OPG、RANKL表达的增龄性变化

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持续静压力作用下人牙周膜细胞OPG、RANKL表达的增龄性变化

作者：吴洁河北医科大学

学位级别：硕士

目的:通过细胞实验观察持续静压力作用下人牙周膜细胞(Human periodontal ligament cells,HPDLCs)表达骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(Receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)的增龄性变化,探讨正畸牙移动过程中年龄因素对压力侧骨改建的影响及其分子生物学机制。方法:1.收集因治疗需要拔除的健康离体牙,分离根中1/3的牙周膜,组织块法原代培养获得HPDLCs。通过苏木素-伊红染色(Hematoxylin-eosin staining solution,HE)观察细胞大小、形态,免疫细胞化学染色鉴定细胞来源。2.根据受试者年龄将所获得HPDLCs分为A组(13-18岁)、B组(19-29岁)、C组(30-44岁),共三组。使用CCK-8试剂盒(Cell Counting Kit-8)描绘细胞生长曲线以观察比较不同年龄组HPDLCs的增殖能力;β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-Gal)染色检测不同年龄组HPDLCs的衰老细胞比率。3.将A、B、C各组细胞均按加力时间进一步分为8小组,分别给予0,1.5,3,6,12,24,48,72小时持续静压力机械刺激,压力刺激去除后立即提取上清。每个小组均设有空白对照,与压力组加力同步计时,并提取上清。酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA)检测上清液,并比较不同年龄组HPDLCs在持续静压力作用下OPG、RANKL的表达水平变化。结果:1.组织块法可成功培养出HPDLCs。培养3-15天后在倒置相差显微镜下可见不同年龄组组织块周围均有细胞爬出。三组细胞培养中,A组(13-18岁)细胞爬出时间为4±2天,B组(19-29岁)细胞爬出时间为7±2天,C组(30-44岁)细胞爬出时间为10±3天。A组、C组之间比较差异具有统计学意义(P>0.05),其余组间比较均无统计学意义(P>0.05)。2.HE染色光镜下观察可见胞体为长梭形或星形。胞质嗜伊红,胞核嗜碱性,符合HPDLCs形态学特征;免疫细胞化学染色光镜下观察可见细胞角蛋白(Cytokeration,CK)染色阴性,波形丝蛋白(Vimentin,VIM)染色阳性,结合取材部位,判定所培养细胞为HPDLCs。3.CCK-8细胞计数检测:各组HPDLCs数量均随时间增长而增加。培养7天后A、B、C三组细胞增殖能力A组(13-18岁)>B组(19-29岁)>C组(30-44岁),差异具有统计学意义(PB组(4.2%±0.5%)>A组(2.1%±0.2),三组两两比较均具有统计学意义(POPG蛋白表达量随年龄增长而增加(POPG、RANKL蛋白浓度均随加力时间延长而增加,相同时间点OPG蛋白表达水平随年龄增长而增加(POPG/RANKL蛋白比值随加力时间呈先下降后增加趋势,相同时间点OPG/RANKL比值随年龄增长而增加(POPG加力前后比较,A、B、C三组差异均具有统计学意义(POPG/RANKL比值加力前后比较,A、B、C三组差异具有统计学意义(其中A、B组POPG蛋白表达随加力时间增加而上升,相同时间点蛋白表达量随年龄增长而增加,表明持续静压力作用下增龄因素可上调OPG蛋白表达。OPG/RANKL蛋白比值随加力时间呈先下降后增加趋势,相同时间点OPG/RANKL比值随年龄增长而增大,表明持续静压力作用下,增龄因素可上调OPG/RANKL比值,影响压力侧骨吸收,减慢成人正畸患者牙齿移动速度。

关键词：增龄正畸人牙周膜细胞持续静压力 OPG RANKL

氟砷联合染毒对OPG/RANKL调节破骨细胞分化的影响

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环境与健康杂志 2019年第4期36卷 305-310页

作者：杨兴洪峰谢万生张均涛金照凤覃子秀贵州医科大学公共卫生学院贵州贵阳550025 贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室

目的探讨成骨细胞(osteoblasts,OB)与小鼠单核巨噬细胞RAW264.7共培养体系中氟砷联合染毒对骨保护素(OPG)与核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)调节破骨细胞分化的影响。方法用成骨诱导剂诱导小鼠颅顶前成骨细胞MC3T3-E1与RAW264.7细胞... 详细信息

目的探讨成骨细胞(osteoblasts,OB)与小鼠单核巨噬细胞RAW264.7共培养体系中氟砷联合染毒对骨保护素(OPG)与核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)调节破骨细胞分化的影响。方法用成骨诱导剂诱导小鼠颅顶前成骨细胞MC3T3-E1与RAW264.7细胞建立共培养体系,培养7 d,分别用不同浓度的氟化钠(0、0.1、0.4、1.6 mmol/L NaF)、亚砷酸钠(0、0.5、2.5、12.5μmol/L NaAsO2)以及不同剂量的氟砷联合培养基培养24 h,根据2×4析因实验设计,将染毒细胞分为对照组、0.1 mmol/L NaF、0.4 mmol/L NaF、1.6 mmol/L NaF、0.5μmol/L NaAsO2、2.5μmol/L NaAsO2、12.5μmol/L NaAsO2、0.1 mmol/L NaF+0.5μmol/L NaAsO2、0.1 mmol/L NaF+2.5μmol/L NaAsO2、0.1 mmol/L NaF+12.5μmol/L NaAsO2、0.4 mmol/L NaF+0.5μmol/L NaAsO2、0.4 mmol/L NaF+2.5μmol/L NaAsO2、0.4 mmol/L NaF+12.5μmol/L NaAsO2、1.6 mmol/L NaF+0.5μmol/L NaAsO2、1.6 mmol/L NaF+2.5μmol/L Na AsO2、1.6 mmol/L NaF+12.5μmol/L NaAsO2。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中OPG和RANKL蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测各组OPG和RANKL mRNA的表达。结果与对照组相比,不同剂量的氟和砷单独染毒降低OPG蛋白的表达(POPG蛋白表达降低(POPG蛋白表达降低(POPG蛋白表达在0.1 mmol/L NaF+0.5μmol/L NaAsO2和0.4 mmol/L NaF+0.5μmol/L NaAsO2组高于0.5μmol/L NaAsO2组(POPG蛋白在1.6 mmol/L NaF+2.5μmol/L NaAsO2组和1.6 mmol/L NaF+12.5μmol/L Na AsO2组明显降低(P0.05)外,其余各联合组的表达均低于各自氟单独染毒组(P0.05)外,其余各联合组表达均低于各自砷单独染毒组(POPG和RANKL m RNA与其蛋白表达的变化趋势基本一致。氟对OPG、RANKL蛋白表达有主效应作用(F=7.57、7.38,POPG、RANKL蛋白表达也有主效应作用(F=19.86、10.22,POPG和RANKL蛋白表达存在明显的交互作用(F=4.93,11.61,POPG同时上调RANKL的表达来调节OPG/RANKL的比例,增加OC的分化成熟,从而使得骨吸收功能增强。氟砷联合染毒对OPG和RANKL表达的交互作用主要表现为拮抗。

关键词：氟砷联合染毒成骨细胞与RAW264.7单核细胞共培养 OPG RANKL

PMPs通过CXCR2/Erk/NF-κB通路影响RA-FLS中RANKL和OPG表达的研究

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2021年第1期42卷 41-46,57页

作者：杨洁王雯雯张晨邓子靖周玮沈维干张育扬州大学附属苏北人民医院江苏扬州225001 南通市第一人民医院/南通大学第二附属医院江苏南通226001 扬州大学附属医院江苏扬州225009 扬州大学医学院江苏扬州225009

用不同浓度血小板微颗粒(PMPs,0、25、50μg·mL^(-1))分别处理RA-FLS,根据高通量基因芯片分析基因表达谱的改变,应用类风湿关节炎-成维样滑膜细胞(RT-qPCR)、Western blot和ELISA方法检测核因子κB受体活化因子(RANKL)和骨保护素(OPG)... 详细信息

用不同浓度血小板微颗粒(PMPs,0、25、50μg·mL^(-1))分别处理RA-FLS,根据高通量基因芯片分析基因表达谱的改变,应用类风湿关节炎-成维样滑膜细胞(RT-qPCR)、Western blot和ELISA方法检测核因子κB受体活化因子(RANKL)和骨保护素(OPG)的表达;利用Western blot检测相关信号通路抑制剂对PMPs作用下类风湿关节炎-成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)中核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和OPG表达的影响。结果表明:PMPs可上调RA-FLS中RANKL表达,下调OPG表达;抑制NF-κB、CXCR2的活化能拮抗PMPs对RANKL和OPG表达的影响;PMPs上调RA-FLS中Erk的磷酸化水平时,IκB和NF-κB的磷酸化水平也随之上调。说明PMPs可能通过激活CXCR2/Erk/NF-κB信号通路上调RA-FLS中RANKL、下调OPG,参与类风湿关节炎的骨质破坏与重塑。

关键词：类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞血小板微颗粒 RANKL OPG