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电穿孔法转化齐整小核菌

微生物学报 2023年第4期63卷 1681-1689页

作者：潘小红刘佳宁罗锋常鹏西南大学资源环境学院重庆400715 能源生物资源开发重庆市重点实验室重庆400715

【目的】建立齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)的电穿孔法转化方案,以实现经济、快速地遗传转化。【方法】将齐整小核菌gpd基因启动子控制的basta抗性基因bar与红色荧光蛋白基因DsRed Max组成的融合蛋白表达盒,通过电击转入野生型齐整小... 详细信息

【目的】建立齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)的电穿孔法转化方案,以实现经济、快速地遗传转化。【方法】将齐整小核菌gpd基因启动子控制的basta抗性基因bar与红色荧光蛋白基因DsRed Max组成的融合蛋白表达盒,通过电击转入野生型齐整小核菌细胞中,筛选转化子并进行PCR与荧光观察验证。在此基础上,测试了不同电压、脉冲时间、外源DNA片段与受体细胞比例等条件下的转化效率,以得到优化的电转化参数。最后,采用优化的条件,尝试转化多种抗性基因与荧光蛋白融合表达盒以测试其可用性。【结果】成功得到了bar、sdhR与aphI基因的转化子。【结论】成功建立了优化的齐整小核菌电穿孔转化法。优化的参数条件为电压2kV/cm、脉冲时间1 ms、DNA/匀浆细胞比例3μg/300 mg,电击1次。

关键词：齐整小核菌丝状真菌电穿孔法转化

上海城市绿地土壤立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)空间分布特征

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生态学杂志 2022年第5期41卷 941-947页

作者：雒淑红骆玉珍张维维刘文何山文安磊王永杰韩继刚上海海洋大学食品学院上海200120 上海市园林科学规划研究院上海200232 东北大学资源与土木工程学院沈阳110819

为了明确严重危害上海园林绿化植物的立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)在绿地土壤中的分布特征,本研究采用实时荧光定量PCR方法对土壤中两种病原菌ITS基因丰度进行了定量测定,结合土壤理化性质,分析了... 详细信息

为了明确严重危害上海园林绿化植物的立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)在绿地土壤中的分布特征,本研究采用实时荧光定量PCR方法对土壤中两种病原菌ITS基因丰度进行了定量测定,结合土壤理化性质,分析了两种病原菌在上海绿地土壤中的分布及主要影响因素。结果表明:绿地土壤pH偏碱性,含水率偏高,各理化指标变异系数较高;绿地土壤中立枯丝核菌和齐整小核菌的检出率分别为99.7%和11.6%,检出样品ITS基因的平均丰度分别为9.09×10^(5)和2.42×10^(5)copies·g^(-1);立枯丝核菌ITS基因丰度在公园绿地和道路绿地土壤中存在显著性差异(P0.05),表明其丰度受绿地类型影响显著;齐整小核菌ITS基因丰度在公园绿地和道路绿地以及中心城区和郊区绿地土壤中差异均不显著(P>0.05),其丰度与土壤全铬、全镍呈显著负相关,与土壤全砷呈极显著负相关。研究结果为防控上海绿地土壤中立枯丝核菌和齐整小核菌病害的发生提供了基础数据。

关键词：城市绿地立枯丝核菌齐整小核菌分布特征影响因素

齐整小核菌硬葡聚糖代谢工程遗传操作技术体系构建及其应用

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齐整小核菌硬葡聚糖代谢工程遗传操作技术体系构建及其应用

作者：刘佳宁西南大学

学位级别：硕士

微生物胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)因其低成本、标准化、高质量、可持续生产、多样性和优良的理化性质等特点,导致了学术界和工业界的研究热潮,并迅速成为具有经济竞争力的产品。硬葡聚糖(scleroglucan,β-(1,3)-(1,6)-glucan)是... 详细信息

微生物胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)因其低成本、标准化、高质量、可持续生产、多样性和优良的理化性质等特点,导致了学术界和工业界的研究热潮,并迅速成为具有经济竞争力的产品。硬葡聚糖(scleroglucan,β-(1,3)-(1,6)-glucan)是由某些真菌分泌的一种胞外多糖,结构为独特的三螺旋。硬葡聚糖有优良的非离子水溶性、生物相容性、假塑性、耐水解性、耐盐性、保湿性、粘度稳定性等理化性质,广泛应用于工业、食品、医药和化妆品等行业,商业价值极高。尽管硬葡聚糖应用前景巨大,但是却面临着底物利用率低、产量低和生产成本高等问题,严重限制了硬葡聚糖的应用开发。目前,工业生产硬葡聚糖主要依赖丝状真菌小核菌属的发酵。所用的典型菌株是齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)。已有大量关于齐整小核菌产硬葡聚糖的研究,主要关注于硬葡聚糖的理化性质,及通过发酵条件优化从而提高硬葡聚糖产量等方面。但是,在充分理解硬葡聚糖生物合成途径的基础上,设计合适的代谢流调整方案,构建代谢工程菌,从而在菌株性状层面实现硬葡聚糖的高产化、或者减少副产物以提高底物利用率、或者利用废弃生物质原料为底物等目的的研究几乎没有进展。这主要是因为齐整小核菌缺乏进行代谢工程改造所必需的遗传操作技术体系(包括遗传转化方法和质粒高效构建系统),以及人们对硬葡聚糖生物合成途径相关基因的功能知之甚少。因此,针对齐整小核菌代谢工程研究存在的上述两个难题,本研究致力于建立和完善齐整小核菌代谢工程遗传操作技术体系,并利用此系统对预测的硬葡聚糖合成相关基因在齐整小核菌中进行功能实验。主要工作和结果如下:(1)建立并优化了齐整小核菌原生质体转化方法,使得齐整小核菌的遗传转化方法基本齐备。在实验室前期已经实现了齐整小核菌的根癌农杆菌介导转化法和电转化法的基础上,本研究进一步地建立了原生质体转化方法。实验确定了使用Vino Taste Pro消化齐整小核菌细胞壁的最佳温度为37℃,酶菌重量比例为2:1,消化时间为5 h。在消化完成后选择过滤条件为四层擦镜纸过滤。实验确定了最佳的原生质体液体再生培养基为CYM培养基+0.6 M硫酸镁,最佳的原生质体固体再生培养基为MGY培养基+1 M蔗糖。在此条件下,本研究中成功进行了齐整小核菌原生质体电转化。(2)构建了基于Golden Gate技术的齐整小核菌转录单元高效组装系统,为齐整小核菌代谢工程提供了高效高基因容量的质粒构建体系。采用Golden Gate技术,为齐整小核菌构建了一套高效的质粒构建系统,包括2个元件的标准化接口改造质粒,4个转录单元组装骨架质粒,4个用于应用质粒组装的骨架质粒和13个应用质粒组装的辅助质粒。此外,在不减少成功率的情况下减少了价格昂贵的酶的用量,使得单个克隆的构建成本大幅下降。最后,本研究中为齐整小核菌构建了一系列的已标准化接口改造元件质粒,常用的转录单元质粒和硬葡聚糖合成相关基因的质粒,证明了此系统构建质粒的高效性和有效性,为齐整小核菌分子生物学和代谢工程研究提供了具有足够基因容量的质粒构建技术平台。(3)对齐整小核菌硬葡聚糖生物合成预测的相关基因进行了功能实验,并构建了初步的硬葡聚糖代谢工程菌株,得到了与硬葡聚糖合成相关的靶标基因。利用上述质粒组装系统,对于生物信息学预测的硬葡聚糖生物合成途径中的相关基因GME834、GME7171和GME5438进行了基因表达下调(RNAi)的功能测试。结果发现GME834和GME5438基因被沉默时硬葡聚糖的产量显著高于野生型对照。而GME7171基因被沉默时的硬葡聚糖产量与野生型对照没有显著区别。此外,构建了本课题组已经验证的硬葡聚糖合成正相关基因GME4934和GME1658的共同过表达菌株,并进行了硬葡聚糖发酵实验。结果表明共同过表达菌株的硬葡聚糖产量也显著高于野生型对照。综上所述,本研究建立和优化了齐整小核菌原生质体转化方法,并构建了基于Golden Gate技术的齐整小核菌转录单元高效组装系统,从而丰富和完善了齐整小核菌代谢工程遗传操作技术体系。对齐整小核菌硬葡聚糖生物合成的相关基因进行了功能验证,为后续的硬葡聚糖代谢工程提供了靶标基因。这些工作为构建齐整小核菌硬葡聚糖代谢工程菌株提供了强有力的技术支撑,有利于未来实现硬葡聚糖的绿色高效生产。

关键词：齐整小核菌硬葡聚糖代谢工程 Golden Gate 原生质体

齐整小核菌硬葡聚糖生物合成关键基因GME4934与GME1658功能分析

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齐整小核菌硬葡聚糖生物合成关键基因GME4934与GME1658功能分析

作者：潘小红西南大学

学位级别：硕士

在全球化石能源匮乏的情形下,微生物胞外多糖(EPS)因其具有优良理化性质和可再生性等优点而被作为不可再生能源的替代品被广泛应用,其需求量和年产值持续快速增长。近年来,硬葡聚糖(scleroglucan,β-(1,3)-(1,6)-glucan)作为多用途的EP... 详细信息

在全球化石能源匮乏的情形下,微生物胞外多糖(EPS)因其具有优良理化性质和可再生性等优点而被作为不可再生能源的替代品被广泛应用,其需求量和年产值持续快速增长。近年来,硬葡聚糖(scleroglucan,β-(1,3)-(1,6)-glucan)作为多用途的EPS而被广泛研究。硬葡聚糖是一种非离子线性多糖,具有独特的三重螺旋结构,具有良好的假塑性、水溶性、生物可降解性、耐高温性、耐盐性、粘度稳定性等特性,还具有抗菌、抗肿瘤和抗病毒活性,被广泛应用于石油、化工、食品、医药等行业,其全球市场正在不断上升。但硬葡聚糖的生产过程存在产量低、能耗高、排放大量废水废渣等问题,实现绿色生产硬葡聚糖迫在眉睫。本研究以微生物代谢工程为技术手段,以实现绿色高效生产硬葡聚糖为目标,开展研究工作。硬葡聚糖生物合成途径的分子机制研究甚少,仅通过转录组学预测了其生物合成途径与相关基因而未实验证实,通过代谢工程菌种改良提高硬葡聚糖产量等研究更未涉及。其中瓶颈在于硬葡聚糖工业生产的主要菌株主要为齐整小核菌(Sclerotium rolfsii),缺乏高质量的基因组数据和有效的遗传转化方法与基因编辑工具系统。本课题组前期工作发现齐整小核菌GME4934基因和GME1658基因表达水平与硬葡聚糖的产量紧密正相关的现象。基于此,本研究对这两个基因的功能进行了探究分析,同时开展了代谢工程菌构建相关的初步工作。主要工作和结果如下:(1)GME4934与GM1658蛋白催化功能鉴定。在大肠杆菌表达系统中,大量表达融合蛋白GME4934-6x His与GME1658-6x His,采用镍柱法对其进行纯化,将纯化产物进行体外催化合成反应后。通过实验发现,本实验所构建的表达菌株p Sr V36(GME4934-6x His)和p Sr V37(GME1658-6x His)目标蛋白能够正确表达,但是表达量很低,蛋白浓度低。将纯化得到的GME4934-6x His进行蛋白催化活性检测,未检测到预期的β-(1,3)-glucan聚合酶的活性。这与GME4934保守结构域预测显示其仅含有一个SMI1＿KNR4结构域一致,猜测GME4934可能参与硬葡聚糖生物合成第四步β-(1,3)-glucan合酶的活性调节。而GME1658-6x His蛋白表达非常困难,可能与其编码序列长达3 kb且含有信号肽有关。(2)GME1658在酿酒酵母中的结构域功能互补验证。在酵母菌株中,负责细胞壁多糖合成的Sc Gas1p和Sc Bgl2p已经被证实分别具有β-(1,3)-glucan合酶功能和β-(1,3)-(1,6)-glucan合酶功能,催化功能结构域分别为Glyco＿hydro＿72和Glyco＿hydro＿17。GME1658结构域预测显示其含有同类的Glyco＿hydro＿31结构域。为证实GME1658的结构域是否具有相似活性,本实验通过将GME1658的Glyco＿hydro＿31回补到gas1Δ和bgl2Δ突变菌株,检测菌株在含有刚果红的培养基上生长表型,进而验证该结构域是否具有相应活性。初步实验表明GME1658的Glyco＿hydro＿31结构域未能回补gas1Δ和bgl2Δ突变菌株的生长缺陷。无法判断GME1658的Glyco＿hydro＿31结构域是否具有催化功能活性。(3)硬葡聚糖代谢工程基础体系的初步构建。本研究首次建立了齐整小核菌电穿孔转化法,并进行了电击参数优化。成功将外源DNA转入野生型齐整小核菌中,转化子在含有抑制浓度杀真菌剂的液体培养和固体培养基中都能够生长。外源片段中的Ds Red红色荧光蛋白在齐整小核菌中可以有效表达,转化子阳性率在50%左右。在场强为2 k V/cm,电击时间为1 ms,DNA/感受态细胞比例为1μg/100 mg湿重,电击次数为1次时,转化效率最高。构建了启动子、终止子、抗性基因、功能基因元件,并对其进行了接口的驯化。利用电击转化法验证抗性基因的可用性。研究测试了五种常用的杀菌剂对齐整小核菌的有效性并确定其有效抑制浓度。然后将含有五种抗性基因表达盒通过电穿孔转化法转入齐整小核菌,实验得到Carboxin、Basta、G418三种抗性基因的转化子,并且三种抗性基因的转化子均检测到红色荧光蛋白的表达,其中Carboxin抗性基因转化子的遗传稳定性最好,能够稳定遗传至第四代。而潮霉素B和中生菌素抗性基因未得到转化子。综合结果表明Carboxin、Basta、G418三种抗性基因可直接用于齐整小核菌。在此基础上,本研究利用Golden Gate DNA组装系统,将基因元件连接,构建了一系列p GT类的转录单元质粒,并对其进行了酶切位点和接口的驯化。然后基于Golden Gate DNA组装系统将转录单元质粒连接构建成含有不同抗性基因和GME4934与GME1658共同过表达的代谢工程大质粒,从而可以快速实现GME4934与GME1658基因

关键词：硬葡聚糖齐整小核菌基因功能代谢工程

齐整小核菌胞外多糖合成关键蛋白挖掘及调控研究

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齐整小核菌胞外多糖合成关键蛋白挖掘及调控研究

作者：范冰倩天津科技大学

学位级别：硕士

小核菌多糖(scleroglucan)是由小核菌属产生的胞外多糖,由于其良好的增稠和保湿特性而广泛应用于石油、化工、食品等领域。本文利用实验室保藏的菌株Sclerotium rolfsii(SMR-1046),研究发现影响多糖产量的几种关键蛋白。为后期通过调控... 详细信息

小核菌多糖(scleroglucan)是由小核菌属产生的胞外多糖,由于其良好的增稠和保湿特性而广泛应用于石油、化工、食品等领域。本文利用实验室保藏的菌株Sclerotium rolfsii(SMR-1046),研究发现影响多糖产量的几种关键蛋白。为后期通过调控涉及多糖合成的关键基因水平来改善胞外多糖的特性提供理论依据。同时优化了发酵工艺,以提高原料的利用率,减少浪费和工业生产造成环境污染,进而为该多糖在工业上的应用提供借鉴。前期对不同碳源在同等条件下发酵齐整小核菌,根据多糖产量和粘度筛选其中3种类型胞外多糖,即分别以蔗糖、葡萄糖和乳糖为碳源发酵而得的胞外多糖(Exopoly Saccharides,EPS),依次定名为SEPS(高产高粘)、GEPS(中产中粘)和LEPS(低产低粘)。以三种碳源发酵下菌体做代谢组测序和转录组测序,分析注释出不同碳源条件下具有显著差异的基因个数及表达量,并对其基因功能(GO term)及代谢通路(KEGG pathway)进行富集分析,转录代谢联合分析发现三个比较组中的显著差异代谢物和基因主要和“遗传信息处理”、“代谢”、“环境信息处理”等功能相关,主要涉及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、嘌呤代谢、氨酰t RNA的生物合成等相关代谢通路。通过联合分析筛选出影响胞外多糖合成的途径及关键蛋白,RT-PCR结果表明几种基因的表达水平是与转录组学数据一致,强化剂和抑制剂的添加结果再一次证明磷酸葡萄糖变位酶、谷氨酸合成酶、6-磷酸果糖激酶1等酶是多糖合成的关键蛋白。最终确定在发酵的0 h添加谷氨酸、在发酵24 h添加赖氨酸和6-磷酸果糖二钠都可以明显提高胞外多糖产量。以多糖产量为响应值,将筛选出来的强化剂物质通过响应面分析,进行多糖合成发酵调控工艺优化。最后确定的添加量为6-磷酸果糖二钠0.7 g/L、赖氨酸0.24 g/L、谷氨酸1 g/L。通过对发酵过程各数据的检测发现强化剂的添加提高齐整小核菌对葡萄糖的利用率,最后使小核菌多糖产量最高达到16.12 g/L。

关键词：齐整小核菌发酵优化胞外多糖组学多糖合成

基于Golden Gate技术的齐整小核菌转录单元高效组装系统

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微生物学报 2023年第11期63卷 4414-4429页

作者：刘佳宁吴洁五十岚泰夫罗锋常鹏西南大学资源环境学院能源生物资源开发重庆市重点实验室重庆400715

【目的】为齐整小核菌代谢工程研究建立高效的转录单元组装系统。【方法】通过应用Golden Gate技术,以mobius assembly为基础,分别设计并构建DNA元件标准化接口改造、单转录单元组装、应用质粒(多转录单元)组装等功能的载体,从而形成一... 详细信息

【目的】为齐整小核菌代谢工程研究建立高效的转录单元组装系统。【方法】通过应用Golden Gate技术,以mobius assembly为基础,分别设计并构建DNA元件标准化接口改造、单转录单元组装、应用质粒(多转录单元)组装等功能的载体,从而形成一套完整的多转录单元组装系统。【结果】构建了2个用于DNA元件标准化接口改造的Level 0载体,4个用于单转录单元组装的Level 1载体,4个用于应用质粒组装的Level 2载体和13个应用质粒组装的辅助质粒。然后应用此系统为齐整小核菌组装了若干经过标准化接口改造的DNA元件质粒、单转录单元质粒和硬葡聚糖相关基因的功能分析质粒。所构建的最终应用质粒可以同时适用于齐整小核菌的根癌农杆菌介导转化法、电穿孔转化法和原生质体转化法。【结论】此质粒系统具有强大的DNA设计、组装和容纳能力,为未来齐整小核菌代谢工程和功能基因组学研究提供了高效的质粒构建技术平台。

关键词：齐整小核菌 Golden Gate 转录单元 DNA组装

城市绿地中立枯丝核菌和齐整小核菌的qPCR快速检测方法

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浙江农林大学学报 2022年第5期39卷 1087-1095页

作者：雒淑红骆玉珍赵莺莺张维维刘文何山文安磊王永杰韩继刚上海海洋大学食品学院上海200120 上海市园林科学规划研究院上海200232 东北大学资源与土木工程学院辽宁沈阳110819

【目的】土传病原真菌立枯丝核菌Rhizoctonia solani和齐整小核菌Sclerotium rolfsii严重威胁园林绿化植物正常生长。建立针对这2种土壤病原真菌的快速定量检测方法。【方法】通过筛选2种病原菌特异性引物,优化反应条件。【结果】初步... 详细信息

【目的】土传病原真菌立枯丝核菌Rhizoctonia solani和齐整小核菌Sclerotium rolfsii严重威胁园林绿化植物正常生长。建立针对这2种土壤病原真菌的快速定量检测方法。【方法】通过筛选2种病原菌特异性引物,优化反应条件。【结果】初步建立了2种病原菌的实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法。引物ST-RS1/ITS4和SRITSF/SRITSR可以分别用于立枯丝核菌和齐整小核菌的qPCR检测,其灵敏度分别达24×10^(6)和22×10^(6)拷贝·L,2次重复反应的变异系数分别为3.37%~4.61%和0.66%~8.61%。对上海绿地土壤样品的检测结果表明:立枯丝核菌和齐整小核菌的检出率分别为100%和19%。【结论】建立的qPCR检测方法具有较强特异性、较高灵敏度和较强重复性,可以用于上海城市绿地土壤中立枯丝核菌和齐整小核菌的快速、有效定量检测。

关键词：城市绿地土壤立枯丝核菌齐整小核菌 qPCR

齐整小核菌内源小核菌胶水解酶的挖掘及其功能验证

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生物工程学报 2021年第1期37卷 207-217页

作者：曾伟主谭润卿周景文江南大学未来食品科学中心江苏无锡214122 江南大学生物工程学院江苏无锡214122 江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室江苏无锡214122

小核菌胶是一种高分子水溶性微生物胞外多糖,主要用于石油开采、食品加工、医药制造和化妆品等领域。由微生物发酵法生产的小核菌胶分子量较高,存在溶解性低、粘度高和分散性差等问题,对提取、保存和应用带来了一系列困难。研究用于改... 详细信息

小核菌胶是一种高分子水溶性微生物胞外多糖,主要用于石油开采、食品加工、医药制造和化妆品等领域。由微生物发酵法生产的小核菌胶分子量较高,存在溶解性低、粘度高和分散性差等问题,对提取、保存和应用带来了一系列困难。研究用于改性小核菌胶分子量的降解方式对扩大小核菌胶的工业应用具有重要意义。文中以齐整小核菌Sclerotium rolfsii WSH-G01为对象,通过基因组测序从全基因组范围内对菌株葡聚糖降解酶基因进行功能注释,设计可能引起β-葡聚糖酶差异表达的培养体系,结合转录组学分析,挖掘菌株内源β-葡聚糖酶,对可能的多糖水解酶进行功能验证。将获得的14个可能的内源小核菌胶水解酶基因进行扩增,在毕赤酵母Pichia pastoris中进行异源表达,经SDS-PAGE验证和酶活测定,得到10个可溶性蛋白,其中5个具有昆布多糖水解活性。这5个内源水解酶中,GME9860具有对小核菌胶的酶解效果。研究结果为应用酶水解法获取中低分子量小核菌胶以及代谢工程改造调控齐整小核菌发酵生产不同分子量小核菌胶提供了参考。

关键词：齐整小核菌硬葡聚糖葡聚糖酶分子量多糖水解

防控花生白绢病的根际放线菌分离鉴定及防效评价

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农药学学报 2024年第1期26卷 101-113页

作者：职永玺何海荣周琳高飞何磊鸣赵特杜鹏强河南农业大学植物保护学院郑州450046 河南中医药大学药学院郑州450046

花生白绢病是由齐整小核菌Sclerotium rolfsii Sacc.引起的发生在花生茎基部的真菌病害,严重制约花生的品质与产量。本研究利用稀释涂布法从怀牛膝根际土壤中分离纯化了116株放线菌,并从中筛选鉴定了能够防控花生白绢病的菌株。通过平... 详细信息

花生白绢病是由齐整小核菌Sclerotium rolfsii Sacc.引起的发生在花生茎基部的真菌病害,严重制约花生的品质与产量。本研究利用稀释涂布法从怀牛膝根际土壤中分离纯化了116株放线菌,并从中筛选鉴定了能够防控花生白绢病的菌株。通过平板对峙试验筛选得到两株抑菌活性较好且稳定的菌株Soil-1-5和Soil-3-28,它们对齐整小核菌的抑制率分别为80.43%和92.34%。根据形态学观察、生理生化试验及16S rRNA基因序列分析鉴定,两株菌分别被鉴定为疮痂链霉菌Streptomyces scabiei和藤黄灰链霉菌Streptomyces luteogriseus。采用菌丝生长速率法测定了拮抗菌株无菌发酵滤液对植物病原菌的抑制作用。结果表明,菌株Soil-1-5和Soil-3-28的无菌发酵滤液稀释5倍后对齐整小核菌的抑制率分别为73.67%和57.11%,且对禾谷镰孢菌等6种植物病原菌均有不同程度的抑制作用。此外,两菌株的无菌发酵滤液对齐整小核菌菌核萌发和菌核形成也有较好拮抗作用。盆栽试验结果表明,菌株Soil-1-5和Soil-3-28对花生白绢病的防治效果分别为51.92%和31.74%,其中菌株Soil-3-28对花生生长有促进作用。综上,菌株Soil-1-5和Soil-3-28对花生白绢病有较好的防治效果,具有潜在应用价值。

关键词：花生白绢病齐整小核菌怀牛膝根际放线菌生物防治防治效果促进生长