城市绿地中立枯丝核菌和齐整小核菌的qPCR快速检测方法
Quantitative real-time PCR for rapid detection of Rhizoctonia solani and Sclerotium rolfsii in urban green space作者机构:上海海洋大学食品学院上海200120 上海市园林科学规划研究院上海200232 东北大学资源与土木工程学院辽宁沈阳110819
出 版 物:《浙江农林大学学报》 (Journal of Zhejiang A&F University)
年 卷 期:2022年第39卷第5期
页 面:1087-1095页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 071001[理学-植物学] 07[理学]
基 金:上海市绿化和市容管理局科技攻关项目(G200201) 上海市科学技术委员会科研计划项目(19dz1203300)
摘 要:【目的】土传病原真菌立枯丝核菌Rhizoctonia solani和齐整小核菌Sclerotium rolfsii严重威胁园林绿化植物正常生长。建立针对这2种土壤病原真菌的快速定量检测方法。【方法】通过筛选2种病原菌特异性引物,优化反应条件。【结果】初步建立了2种病原菌的实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法。引物ST-RS1/ITS4和SRITSF/SRITSR可以分别用于立枯丝核菌和齐整小核菌的qPCR检测,其灵敏度分别达24×10^(6)和22×10^(6)拷贝·L,2次重复反应的变异系数分别为3.37%~4.61%和0.66%~8.61%。对上海绿地土壤样品的检测结果表明:立枯丝核菌和齐整小核菌的检出率分别为100%和19%。【结论】建立的qPCR检测方法具有较强特异性、较高灵敏度和较强重复性,可以用于上海城市绿地土壤中立枯丝核菌和齐整小核菌的快速、有效定量检测。