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羊骨胶原肽对大鼠腹腔巨噬细胞免疫能力的影响

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中国实验动物学报 2021年第2期29卷 176-182页

作者：张慧琴霍乃蕊冀霞段卓马林峰古少鹏山西农业大学动物医学学院山西晋中030801

目的探究羊骨胶原肽(sheep bone collagen peptide,SBCP)对正常状态及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)活化状态巨噬细胞免疫能力的影响。方法以不同剂量的SBCP作用于未经LPS活化和LPS活化的大鼠腹腔巨噬细胞,分别以MTT法和中性红法测定... 详细信息

目的探究羊骨胶原肽(sheep bone collagen peptide,SBCP)对正常状态及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)活化状态巨噬细胞免疫能力的影响。方法以不同剂量的SBCP作用于未经LPS活化和LPS活化的大鼠腹腔巨噬细胞,分别以MTT法和中性红法测定巨噬细胞代谢活力和吞噬活性,Griess法测定NO分泌量,ELISA检测TNF-α、IL-6含量,qRT-PCR测定Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)通路相关基因及负性调控因子单Ig区IL-1相关受体(Single Ig IL-1-related receptor,SIGIRR)的mRNA表达量。结果SBCP作用于正常状态的巨噬细胞,可提高其代谢活力,吞噬活性及NO、TNF-α、IL-6分泌量,上调TLRs通路相关基因表达量,下调SIGIRR mRNA表达量,均呈剂量依赖性,SBCP剂量为105μg/mL时,与LPS空白组无显著性差异。SBCP作用于LPS活化的巨噬细胞时,可抑制其代谢活力,以102μg/mL效果最佳;对吞噬活性及NO、TNF-α、IL-6分泌量的抑制均以103μg/mL最佳;并下调TLRs相关基因表达量且上调SIGIRR mRNA的表达量。结论SBCP通过TLRs信号通路对炎症反应发挥双向调节作用,剂量为10~104μg/mL时可增强巨噬细胞的免疫能力,105μg/mL时可诱导巨噬细胞释放大量炎症介质。而对LPS诱导的炎症反应,SBCP各剂量组均具有抑制作用。

关键词：羊骨胶原肽巨噬细胞免疫功能 Toll样受体(TLRs) 炎症因子

羊骨胶原肽对去卵巢大鼠肝脂沉积和氧化应激的改善作用

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羊骨胶原肽对去卵巢大鼠肝脂沉积和氧化应激的改善作用

作者：冀霞山西农业大学

学位级别：硕士

羊骨胶原肽（sheep bone collagen peptide,SBCP）已被证明具有雌激素样作用,对去卵巢大鼠的松质骨具有明显改善效果。本研究探讨SBCP干预对雌激素缺乏所致肝、肾损伤的抑制作用。摘除SD大鼠的双侧卵巢建立雌激素缺乏模型,SBCP-H、SBCP-... 详细信息

羊骨胶原肽（sheep bone collagen peptide,SBCP）已被证明具有雌激素样作用,对去卵巢大鼠的松质骨具有明显改善效果。本研究探讨SBCP干预对雌激素缺乏所致肝、肾损伤的抑制作用。摘除SD大鼠的双侧卵巢建立雌激素缺乏模型,SBCP-H、SBCP-M和SBCP-L组的灌胃剂量分别为3.40 g/（kg·d）、2.05 g/（kg·d）和0.68 g/（kg·d）,持续8 w,主要研究结果如下:卵巢摘除和SBCP干预对大鼠肝脏指数无显著影响,SBCP干预对雌激素缺乏所致血液球蛋白、肌酐和尿素氮含量的升高具有显著抑制作用。雌激素缺乏导致血清中IL-2、TNF-α和IFN-γ等促炎因子,以及游离脂肪酸和甘油三酯等脂代谢指标显著升高,引起肝、肾组织中总超氧化物歧化酶活力显著下降,丙二醛含量显著增加,肠道微生物的sobs、shannon、simpson、chao和ace指数下降,产丁酸菌属的相对丰度减少,SBCP干预可显著扭转上述各指标的变化趋势并降低血液中的促炎因子水平。可见SBCP可改善去卵巢大鼠的脂质代谢,提高肝、肾组织的抗氧化水平,丰富肠道微生物多样性以及肠道产丁酸菌属的丰度。组织形态学观察结果显示,模型组大鼠肝索排列紊乱,肝细胞肿胀、内含椭圆形空泡,空泡经苏丹Ⅲ染色证明为脂滴。SBCP各剂量组肝索排列整齐,肝细胞结构完整、空泡和脂滴数量明显减少。H＆E染色和苏丹Ⅲ染色后组织病理学评分均为模型组＞SBCP-H＞SBCP-M＞SBCP-L＞假手术组。模型组大鼠肾小球萎缩,肾小管间质可见大量红细胞散在分布,大量肾小管上皮细胞脱离基底膜、细胞坏死并发生空泡变性,肾小管结构基本消失,肾小管管腔内形成管型。SBCP各剂量组肾小球结构完整,肾小球和肾小管间质散在少量红细胞,少量肾小管上皮细胞脱离基底膜、空泡变性减轻,肾小管间质淋巴细胞数量减少,组织病理学评分模型组＞SBCP-M＞SBCP-L＞SBCP-H＞假手术组。qRT-PCR结果显示,模型组肝、肾组织中的Keap-1、SREBP-1c和FAS基因的m RNA表达量较假手术组极显著上调（P＜0.01）,肝组织中Nrf2和G6pdx基因的m RNA表达量较假手术组显著下调（P＜0.05）,肾组织Nrf2、G6pdx、AMPK-α1和PPARα基因的m RNA表达量较假手术组极显著下调（P＜0.01）。与模型组相比,SBCP高、低剂量干预可极显著上调肝脏Nrf2和G6pdx基因的m RNA表达量,SBCP中、低剂量干预可明显上调肝脏AMPK-α1和CPT-1a基因的m RNA表达量（P＜0.01）,SBCP低剂量干预可明显上调肝脏PPARα基因的m RNA表达量（P＜0.01）。SBCP干预可极显著下调肾脏Keap-1和SREBP-1c基因的m RNA表达量（P＜0.01）,并极显著上调肾脏Nrf2、AMPK-α1和CPT-1a基因的m RNA表达量（P＜0.01）,SBCP高剂量干预可极显著上调肾脏G6pdx和PPARα基因的m RNA表达量（P＜0.01）,并极显著下调肾脏FAS基因的m RNA表达量（P＜0.01）,SBCP低剂量干预能极显著上调肾脏PPARα基因的m RNA表达量（P＜0.01）。综上所述,SBCP对雌激素缺乏引发的大鼠肝脂沉积、氧化应激和肾脏发生炎症具有明显抑制效果,其中低剂量对肝损伤改善作用最佳,高剂量对肾损伤改善作用最佳。究其机理,SBCP通过丰富肠道微生物多样性和产丁酸菌丰度,通过Keap-1/Nrf2信号通路提高抗氧化能力并抑制肾脏发生炎症,通过AMPK信号通路减少肝脂沉积,该研究结果为雌激素缺乏相关疾病的预防和治疗奠定了一定的理论基础。

关键词：羊骨胶原肽去卵巢大鼠肝脂沉积氧化应激产丁酸菌

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羊骨胶原肽对去卵巢大鼠的骨质改善作用

山西农业大学学报（自然科学版） 2019年第1期39卷 102-106页

作者：原恺李爱玲韩克光郝在林程稚玲陈静金淑秀马林峰霍乃蕊山西农业大学动物科技学院山西太谷030801 古县畜牧兽医局山西古县042400 锡林郭勒盟肽好生物制品有限责任公司内蒙古锡林郭勒026000 山西农业大学食品与工程学院山西太谷030801

[目的]探讨羊骨胶原肽(collagen peptide,CP)对去卵巢大鼠的骨质改善作用,为畜骨的高值利用和骨质疏松非药物防治的研发提供试验依据。[方法]切除大鼠双侧卵巢,设置切卵巢组(OVX)、雌激素组(E_2)、羊骨胶原肽的高、中、低剂量组(CP-H、C... 详细信息

[目的]探讨羊骨胶原肽(collagen peptide,CP)对去卵巢大鼠的骨质改善作用,为畜骨的高值利用和骨质疏松非药物防治的研发提供试验依据。[方法]切除大鼠双侧卵巢,设置切卵巢组(OVX)、雌激素组(E_2)、羊骨胶原肽的高、中、低剂量组(CP-H、CP-M、CP-L),另设假手术组(SHAM)。各组8只,饲喂基础日粮,CP各剂量组灌胃相应受试物,SHAM组和OVX组灌胃等体积蒸馏水,E_2组注射雌激素。灌胃9 w后处死大鼠,取股骨进行骨密度、骨矿物质、羟脯氨酸含量测定,并测定血清PINP及β-CTx水平。[结果]OVX组骨密度((1.767±0.031) g·cm^(-3))、骨矿物质(Ca、Mg、Zn、Mn)((9.73±0.14) mg·g^(-1),(0.34±0.01) mg·g^(-1),(30.48±1.48)μg·g^(-1),(1.70±0.24)μg·g^(-1))以及羟脯氨酸含量((1.922±0.12)μg·mg^(-1))均显著低于SHAM组((2.283±0.47) g·cm^(-3),(12.59±2.78) mg·g^(-1),(0.49±0.10) mg·g^(-1),(33.78±0.43)μg·g^(-1),(1.94±0.29)μg·g^(-1),(2.258±0.22)μg·mg^(-1)),血液PINP((3 528.37±154.74) pg·mL^(-1))和β-CTx((529.67±23.63) pg·mL^(-1))水平显著高于SHAM组((2.283±0.47) g·cm^(-3),(2 258.55±140.87) pg·mL^(-1),(370.98±61.89) pg·mL^(-1)),说明骨质疏松模型建模成功,CP各剂量组和E_2组骨密度、所测骨矿物质含量、羟脯氨酸含量均显著高于OVX组,血清PINP及β-CTx水平显著低于OVX组(P羊骨胶原肽可提高去卵巢大鼠股骨密度,抑制骨矿物质和骨有机质的丢失,降低血清骨代谢标志物水平,从而具有骨质改善作用。

关键词：羊骨胶原肽骨密度骨矿物质 PINP,β-CTx 羟脯氨酸

羊骨胶原肽对去卵巢大鼠骨质疏松症的防治作用

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营养学报 2009年第3期31卷 234-237页

作者：霍乃蕊马俪珍甄润英沈钧张子悦山西农业大学食品科学与工程学院太谷030801 天津农学院食品科学系天津300384 天津医科大学公共卫生学院天津300070

目的探讨羊骨胶原肽(SBCP)对绝经后骨质疏松的防治作用。方法32只3.5月龄未交配过的健康雌性SD大鼠,按体重随机分为:空白对照组(假手术组)、模型对照组(去卵巢组)、样品1组(去卵巢+冷冻干燥SBCP)、样品2组(去卵巢+喷雾干燥SBCP);术后7d... 详细信息

目的探讨羊骨胶原肽(SBCP)对绝经后骨质疏松的防治作用。方法32只3.5月龄未交配过的健康雌性SD大鼠,按体重随机分为:空白对照组(假手术组)、模型对照组(去卵巢组)、样品1组(去卵巢+冷冻干燥SBCP)、样品2组(去卵巢+喷雾干燥SBCP);术后7d,以灌胃方式给予空白对照组和模型对照组蒸馏水(1ml/100g·d),样品1和2组给予SBCP1000mg/kg·d,10w后,测量体重、食物利用率和血清骨代谢主要生化指标及股骨密度(BD)、长度、直径等。结果模型对照组血清碱性磷酸酶(ALP)明显升高,而给予SBCP可抑制升高;模型对照组血清骨钙素(BGP)明显高于空白对照组,而样品组BGP低于模型对照组,且与空白对照组无差异。模型对照组股骨BD显著降低,而样品组BD降低幅度较小,其中样品1组BD显著高于模型对照组,与空白对照组相当。样品组股骨长度和直径均显著高于模型对照组。样品组血清骨代谢主要生化指标及股骨生长指标无明显差异。结论SBCP具有减少骨吸收,促进骨生长的作用,可有效缓解绝经后骨质疏松症的发生;胶原肽的干燥方式对其抗骨质疏松作用没有明显影响。

关键词：羊骨胶原肽骨质疏松症骨密度

羊骨胶原肽对青春期大鼠催乳素和促黄体生成素分泌脉冲的影响

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中国实验动物学报 2011年第3期19卷 220-223页

作者：霍乃蕊马俪珍岳文斌山西农业大学食品科学与工程学院太谷030801 天津农学院食品科学系天津300384 山西农业大学动物科技学院太谷030801

目的研究羊骨胶原肽(sheep bone collagen peptide,SBCP)对类固醇诱导的去卵巢大鼠催乳素(pro-lactin,PRL)和促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)分泌脉冲的影响。方法 6周龄子宫颈未开口的青春期SD大鼠实施双侧卵巢摘除手术,康复1周... 详细信息

目的研究羊骨胶原肽(sheep bone collagen peptide,SBCP)对类固醇诱导的去卵巢大鼠催乳素(pro-lactin,PRL)和促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)分泌脉冲的影响。方法 6周龄子宫颈未开口的青春期SD大鼠实施双侧卵巢摘除手术,康复1周或3周后以类固醇替代方法诱导PRL和LH脉冲,处理组同时按1000 mg/(kg.d)的剂量以SBCP灌胃,通过颈导管采集血样,利用放射免疫技术测定各组大鼠外周血中的LH和PRL浓度。结果对于术后康复1周的大鼠,SBCP对LH脉冲振幅起到增强作用,而对PRL脉冲没有影响;对于术后康复3周的大鼠,SBCP对LH和PRL脉冲振幅均表现为降低作用,但卵巢摘除后立即给予SBCP可减弱这种降低作用。结论雌激素和孕激素替代注射的同时,补充羊骨胶原肽,不仅仍可诱导LH和PRL脉冲的产生,还可预防由于卵巢摘除带来的骨代谢紊乱,免疫力低下等不良影响,因而是对现有类固醇替代方法的改良。

关键词：羊骨胶原肽催乳素促黄体生成素去卵巢大鼠

羊骨胶原肽对实验性高血压大鼠血压和血脂的影响

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营养学报 2008年第5期30卷 512-514,519页

作者：甄润英马俪珍姜帆冯雅蓉李晓雁天津农学院食品科学系天津300384 山西农业大学食品学院太谷030801

目的观察羊骨胶原肽(SBCP)对实验性高血压大鼠血压和血脂的影响;方法经口给予正常SD大鼠一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)建立一氧化氮缺乏性高血压模型。40只SD大鼠随机分为空白组(给予蒸馏水)、对照组(单纯给予L-NAME,15mg/kg bw·d)、样品... 详细信息

目的观察羊骨胶原肽(SBCP)对实验性高血压大鼠血压和血脂的影响;方法经口给予正常SD大鼠一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)建立一氧化氮缺乏性高血压模型。40只SD大鼠随机分为空白组(给予蒸馏水)、对照组(单纯给予L-NAME,15mg/kg bw·d)、样品1组和样品2组(给予L-NAME15mg/kg bw·d,同时分别给予1000mg/kg bw d SBCP 1及SBCP 2),观察大鼠一般状况及血压、心率和血脂的变化。结果给予L-NAME1w后对照组及样品1组、样品2组大鼠血压即明显高于实验前和空白组。随后样品1组和样品2组大鼠的血压开始持续回落,从第3周开始至实验结束,两组血压均低于对照组,并有显著性差别;在实验期间各组大鼠心率变化、体重增长量、食物利用率的差异均无显著性,各组大鼠血脂均在正常范围。结论在不影响心率的条件下,经口给予SBCP在体内具有一定的降血压作用,但对大鼠的血脂没有明显影响。

关键词：羊骨胶原肽实验性高血压大鼠血压血脂

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美拉德反应提高羊骨胶原肽抗氧化活性研究

山西农业大学学报（自然科学版） 2017年第2期37卷 115-120页

作者：杨璐程稚玲霍乃蕊山西农业大学食品科学与工程学院山西太谷030801 山西省农业科技信息中心山西太原030000 山西农业大学动物科技学院山西太原030801

[目的]确定还原糖种类和反应条件,通过美拉德反应提高羊骨胶原肽的抗氧化活性。[方法]研究各因素对反应产物还原力的影响,以响应面法进行数学建模,优化美拉德反应条件;用铁氰化钾还原法测定还原力时,以胶原肽液(60g·L-1)调节零点,结果... 详细信息

[目的]确定还原糖种类和反应条件,通过美拉德反应提高羊骨胶原肽的抗氧化活性。[方法]研究各因素对反应产物还原力的影响,以响应面法进行数学建模,优化美拉德反应条件;用铁氰化钾还原法测定还原力时,以胶原肽液(60g·L-1)调节零点,结果以吸光度值表示。[结果]木糖作为修饰物时美拉德反应产物的还原力显著高于葡萄糖、乳糖、半乳糖和麦芽糖(P羊骨胶原肽与木糖在所得最优条件下反应,即木糖与骨胶原肽质量比为3∶1、反应初始pH为12、100℃反应3.5h,反应产物的还原力接近于预测值,高达0.810 2。[结论]美拉德反应是提高羊骨胶原肽抗氧化活性的一种有效方法。

关键词：美拉德反应羊骨胶原肽还原力

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肽及肽钙螯合物对大鼠免疫和炎症的调节作用

肽及肽钙螯合物对大鼠免疫和炎症的调节作用

作者：张慧琴山西农业大学

学位级别：硕士

免疫系统是生物体防御病原微生物入侵的重要屏障,受饲养管理、营养和疾病等因素的影响,易造成畜禽免疫力低下,引起各种疾病的发生。Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)可通过识别免疫细胞表面的病原体分子,诱导免疫调节相关蛋白的表... 详细信息

免疫系统是生物体防御病原微生物入侵的重要屏障,受饲养管理、营养和疾病等因素的影响,易造成畜禽免疫力低下,引起各种疾病的发生。Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)可通过识别免疫细胞表面的病原体分子,诱导免疫调节相关蛋白的表达而发挥免疫调控作用。本研究以羊骨胶原肽(sheep bone collagen peptide,SBCP)和肽钙螯合物(calcium chelated with collagen peptide,CCCP)为受试物,探讨其对大鼠机体免疫能力的改善效果及基于TLRs信号转导通路的免疫调节作用机制,为SBCP及CCCP的开发与利用提供依据。摘除40只SD大鼠双侧卵巢建立免疫抑制模型,随机分为模型组(Ovariectomy,OVX)和SBCP-H、SBCP-M、SBCP-L组,SBCP灌胃剂量分别为3.40、2.05和0.68g/(kg·d);10只设为假手术(Sham operation,Sham)对照组。OVX组和Sham组每日灌胃等体积蒸馏水,8 w后测定免疫学相关指标,并观察脾脏组织形态及病理变化,并测定TLRs通路相关基因m RNA表达量。结果表明,与Sham组相比,OVX组吞噬细胞吞噬能力呈降低趋势,RBC-C3b R花环率显著降低,耳肿胀度显著升高(P0.05)。SBCP或CCCP作用于LPS诱导的巨噬细胞时,可抑制其代谢活力,以10μg/m L效果最佳;对吞噬活性及NO、TNF-α、IL-6分泌量的抑制均以10μg/m L最佳;可下调TLRs相关基因表达量,上调SIGIRR m RNA的表达量。综上所述,SBCP可显著改善雌激素减少所造成的的免疫能力低下,通过影响TLRs通路关键基因的表达量而调控机体免疫系统。当SBCP或CCCP作用于正常状态的巨噬细胞时,低剂量可增强巨噬细胞的免疫能力,高剂量则诱导巨噬细胞释放大量炎性介质,引发炎症反应;对LPS诱导的炎症反应,SBCP或CCCP各剂量组均发挥抑制作用,具有一定的抗炎效果。SBCP或CCCP可能通过TLRs转导通路对免疫和炎症发挥双向调节作用。

关键词：羊骨胶原肽肽钙螯合物巨噬细胞免疫调节 Toll样受体(TLRs)

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高钙含量肽钙螯合物的制备与表征分析

山西农业大学学报（自然科学版） 2018年第5期38卷 50-56页

作者：申勇涛原恺霍乃蕊程稚玲韩克光范华樊玮鑫山西农业大学动物科技学院山西太谷030801 山西省院士专家服务中心山西太原030000 山西农业大学实验中心山西太谷030801

[目的]制备肽钙螯合物以提高钙的生物利用度。[方法]以羊骨胶原肽和CaCl_2为原料,综合考虑螯合率、螯合物得率和螯合物中的钙含量,确定高钙含量肽钙螯合物的制备工艺并对螯合物进行表征分析。[结果]胶原肽浓度90mg·mL^(-1),肽钙质量比... 详细信息

[目的]制备肽钙螯合物以提高钙的生物利用度。[方法]以羊骨胶原肽和CaCl_2为原料,综合考虑螯合率、螯合物得率和螯合物中的钙含量,确定高钙含量肽钙螯合物的制备工艺并对螯合物进行表征分析。[结果]胶原肽浓度90mg·mL^(-1),肽钙质量比为2∶1、pH8.0、40℃螯合30min,制备的螯合物,钙含量高达9.81%,远远高于螯合率最高时的1.26%。肽螯合Ca^(2+)前后:微观结构由疏松的片状变成致密的颗粒状;主物质的质荷比由1 230.57增加至2 278.69;脯氨酸含量变化最大,由10.96g·100g^(-1)降至5.62g·100g^(-1);螯合位点是肽链羧基中的O及氨基中的N。[结论]综上所述,综合考虑其螯合率、螯合物中的钙含量以及螯合物得率,得到高钙含量肽钙螯合物的制备工艺。在此工艺下肽钙螯合形成了新的化合物。此研究结果为新型补钙制剂的工厂化生产提供了参考。

关键词：高钙含量肽钙螯合物羊骨胶原肽