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甲基蓝对阿片类物质产生耐受和依赖的阻断作用

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药学学报 1999年第8期34卷 576-581页

作者：臧梦维孟爱民沈琦孙越汪青刘景生中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室

目的：探讨鸟苷酸环化酶（ｓＧＣ）抑制剂甲基蓝（ＭＢ）对阿片耐受和依赖的阻断作用。方法：体外培养ｉＮＯＳ稳定表达的神经细胞做为模型，竞争性蛋白结合法、放免法和３ＨＡｒｇ转化３ＨＣｉｔ法检测胞内ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ水平... 详细信息

目的：探讨鸟苷酸环化酶（ｓＧＣ）抑制剂甲基蓝（ＭＢ）对阿片耐受和依赖的阻断作用。方法：体外培养ｉＮＯＳ稳定表达的神经细胞做为模型，竞争性蛋白结合法、放免法和３ＨＡｒｇ转化３ＨＣｉｔ法检测胞内ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ水平和ＮＯＳ活性，激光共聚焦扫描技术测定胞内Ｃａ２＋浓度。观察ＭＢ对δ阿片激动剂ＤＰＤＰＥ和吗啡预处理细胞４８ｈ及纳洛酮戒断，对胞内ｃＧＭＰ，ｃＡＭＰ含量、［Ｃａ２＋］ｉ和ＮＯＳ活性的影响。结果：ＭＢ可明显抑制阿片激动剂长时程所致ｃＧＭＰ含量增加（Ｐ＜００１），对ｃＡＭＰ含量、［Ｃａ２＋］ｉ和ＮＯＳ活性的变化无影响。结论：ＭＢ通过抑制ｓＧＣ活性，使ＮＯｃＧＭＰ通路下调，减缓阿片耐受和依赖的发生。

关键词：药理依赖阿片类阻断作用甲基蓝

环氧化酶-2特异抑制剂SC236对NF-κB活性的阻断作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第10期23卷 749-752页

作者：樊晓明王振宇复旦大学附属金山医院内科上海200540 香港大学玛丽医院内科

目的　探讨环氧化酶 2抑制剂的抗炎和抗肿瘤作用机理。方法　利用NF κB报告基因暂时转染人胃上皮细胞 ,使用环氧化酶 2特异抑制剂SC2 36和PMA共同处理转染的细胞后 ,双重虫荧光素酶系统鉴定基因的活性。用免疫蛋白印迹法检测NF κB... 详细信息

目的　探讨环氧化酶 2抑制剂的抗炎和抗肿瘤作用机理。方法　利用NF κB报告基因暂时转染人胃上皮细胞 ,使用环氧化酶 2特异抑制剂SC2 36和PMA共同处理转染的细胞后 ,双重虫荧光素酶系统鉴定基因的活性。用免疫蛋白印迹法检测NF κB亚单位IκB α和p6 5的含量。结果　在人胃上皮细胞AGS和MKN2 8细胞内 ,SC2 36有效地抑制NF κB介导的基因转录。SC2 36的作用比非特异性环氧化酶抑制剂阿斯匹林更强大。SC2 36与阿斯匹林的作用点不同 ,SC2 36对PMA引起的IκB α的磷酸化或降解没有作用 ,SC2 36的作用点在于抑制p6 5亚单位的核易位。结论　环氧化酶 2特异抑制剂的抗炎和抗肿瘤作用可能部分地通过抑制NF κB发挥作用。特异的COX 2抑制剂抑制NF κB活性的作用点不同于非特异的环氧化酶抑制剂。

关键词：环氧化酶-2特异抑制剂 SC236 NF-κB活性阻断作用非甾体类抗炎药抗肿瘤抗炎

B7-H4单抗3C8的纯化及对肿瘤免疫逃逸的阻断作用研究

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中国药科大学学报 2017年第4期48卷 461-468页

作者：陈亚莉李安琪张宁玥章良苏州大学药学院苏州215123

采用Protein G亲和色谱及DEAE阴离子交换柱色谱分离纯化精制鼠源性B7-H4单克隆抗体3C8,结合流式检测可与B7-H4/293T转基因细胞株结合的目标抗体组分,获得了纯化的鼠源性B7-H4单克隆抗体3C8。反相柱色谱检测其纯度为93%,SDS-PAGE凝胶电... 详细信息

采用Protein G亲和色谱及DEAE阴离子交换柱色谱分离纯化精制鼠源性B7-H4单克隆抗体3C8,结合流式检测可与B7-H4/293T转基因细胞株结合的目标抗体组分,获得了纯化的鼠源性B7-H4单克隆抗体3C8。反相柱色谱检测其纯度为93%,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定证明经过两步柱色谱,目标抗体的纯度大大提高。流式细胞术检测发现3C8只与B7-H4/293T转基因细胞株结合,不与Mock/293T细胞结合,并且3C8也不与B7家族其他成员的转基因细胞株结合。激光共聚焦实验显示3C8可特异性染色B7-H4/293T转基因细胞,Western blot实验发现,以3C8作为一抗,B7-H4/293T转基因细胞有阳性条带而Mock/293T细胞没有条带。用3C8作为一抗进行免疫组化,结果显示,前列腺癌和肾癌组织特异性高表达B7-H4分子,而前列腺癌旁组织和肾癌癌旁组织B7-H4呈阴性表达。T细胞体外实验显示,B7-H4-Ig可特异性与活化T细胞结合,但3C8可阻断这种结合作用,并可逆转T细胞增殖抑制作用及T细胞因子分泌抑制作用。

关键词：单克隆抗体3C8 B7-H4 纯化负性共刺激免疫逃逸阻断作用

细胞外Ba^(2+)对内向整流钾通道的阻断作用

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生理学报 2000年第1期52卷 50-54页

作者：谢安臧益民第四军医大学基础部生理学教研室西安710032

实验采用双微电极电压箝 (TEV)法研究Ba2 +对非洲爪蟾卵母细胞表达的内向整流钾通道 (IRK1)的阻断作用。细胞外Ba2 +浓度分别为 0 ,1,3 ,10和 10 0 μmol/L ,K+浓度分别为 10和 90mmol/L ,可见快速开通道阻断剂Ba2 +对IRK1的瞬间电流 (... 详细信息

实验采用双微电极电压箝 (TEV)法研究Ba2 +对非洲爪蟾卵母细胞表达的内向整流钾通道 (IRK1)的阻断作用。细胞外Ba2 +浓度分别为 0 ,1,3 ,10和 10 0 μmol/L ,K+浓度分别为 10和 90mmol/L ,可见快速开通道阻断剂Ba2 +对IRK1的瞬间电流 (施加电压后 1ms)的阻断作用依赖Ba2 +、K+、时间和电压 ;但对IRK1的开关特性几乎无影响 ,IRK1对之不通透。三级指数拟合的结果表明 :细胞外Ba2 +低浓度 ( 1和 3 μmol/L)时 ,Ba2 +与K+相互竞争同一结合位点 ,随着Ba2 +浓度的增加 ,时间常数不增加但拟合的权数却呈浓度依赖性增加 ,所以失活过程随Ba2 +浓度的增加越来越快 ;细胞外Ba2 +高浓度 ( 10和 10 0 μmol/L)时 ,时间常数随Ba2 +浓度的增加而减少 ,拟合的权数却呈浓度依赖性减少 ,失活过程也越来越快 ,说明Ba2 +作用位点由通道的表面进入了通道更深的部位。上述结果提示 ,Ba2 +对IRK1的阻断存在两种不同的机制。细胞外K+浓度为 90mmol/L和Ba2 +浓度为 3 0 μmol/L时 ,Mg2 +或Mn2 +可与Ba2 +争夺结合位点 ,随着Mg2 +或Mn2 +浓度增加 ,失活过程逐渐减缓 ,Ba2 +在通道中的结合点也逐渐离开通道 ,Mg2 +能而Mn2 +不能进入通道较深处阻断通道。

关键词： Ba^2+ 内向整流钾通道电压箝阻断作用

锂对淡水鲇Parasilurus asotus坛形电感受器活性的阻断作用

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生物物理学报 1989年第4期5卷 388-396页

作者：朱宏,邹嘉玉,夏发生中国科学院生物物理研究所中国科学院生物物理研究所中国科学院生物物理研究所北京北京北京

在后侧线神经上记录了单单元传入活动并在受此神经支配的感官开口处用测试溶液替换正常溶液,结果是:***+（>50mM）首先引起反应的激发极性逆转,随后反应被阻断.作为对照,Na+仅引起逆转而无阻断作用.***+降低自发放电率并使脉冲排列更趋... 详细信息

在后侧线神经上记录了单单元传入活动并在受此神经支配的感官开口处用测试溶液替换正常溶液,结果是:***+（>50mM）首先引起反应的激发极性逆转,随后反应被阻断.作为对照,Na+仅引起逆转而无阻断作用.***+降低自发放电率并使脉冲排列更趋规则,放电率降至最低值所需时间与阻断反应所需时间相同.***溶液阻断了反应并抑制自发活动,其结果与Li+的作用类似.***2+可掩盖Li+的阻断作用,含Ca2+的Li+溶液可引起逆转但无阻断现象出现.已知多种细胞内的三磷酸肌醇可调控细胞内Ca2+水平.考虑到Li对磷酸肌醇酶的抑制作用,本文结果表明磷脂酰肌醇的代谢产物可能参与了鲇鱼电感受器的传感过程.

关键词：阻断作用 Li 电感受器磷酸肌醇 Parasilurus asotus 细胞内

登革2型PrM基因的重组病毒对不同型别登革病毒复制的阻断作用

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中国生物化学与分子生物学报 2002年第5期18卷 568-572页

作者：于曼秦鄂德陈水平赵月峨范宝昌段鸿元姜涛杨佩英胡志君军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

观察登革 2型PrM基因的pSFV重组甲病毒抗该型病毒的作用 ,进一步探讨登革 2型PrM基因的这种重组病毒对其它 3个血清型登革病毒复制的阻断作用 .采用体外转录和电穿孔 ,分别将构建的含正、反义PrM基因的重组质粒DNA和辅助载体DNA转录成RN... 详细信息

观察登革 2型PrM基因的pSFV重组甲病毒抗该型病毒的作用 ,进一步探讨登革 2型PrM基因的这种重组病毒对其它 3个血清型登革病毒复制的阻断作用 .采用体外转录和电穿孔 ,分别将构建的含正、反义PrM基因的重组质粒DNA和辅助载体DNA转录成RNA ,然后将这两种RNA共转染BHK细胞 ,进而包装成重组病毒颗粒 .再将激活的重组病毒感染细胞 ,分别用不同型病毒进行攻击 .然后通过免疫荧光法 ,观察对登革病毒复制的阻断作用 .结果表明 ,含登革 2型PrM基因的重组病毒不仅可阻断登革 2型病毒的复制 ,同样具有抑制其他 3个型病毒复制的能力 ,且抗登革 1、4型病毒的复制作用强于抗登革 3型病毒的作用 .用 10 3 TCID50 剂量的登革病毒攻击 ,含反义PrM基因的重组病毒可完全阻断登革 1、3、4型病毒的复制 .但含正义PrM基因的重组病毒对登革 3型病毒的复制不能完全阻断 .

关键词：登革2号 PrM基因重组病毒登革病毒病毒复制阻断作用

血管紧张素Ⅰ型受体反义寡核苷酸对大鼠肾脏局部肾素-血管紧张素系统的阻断作用

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中华肾脏病杂志 2005年第4期21卷 199-203页

作者：刘英莉马骥孙晶陆福明刘少军林善锬顾勇复旦大学附属华山医院肾脏科上海200040

目的研究血管紧张素Ⅰ型受体(AT1)反义(AS)寡核苷酸(ODN)对大鼠肾脏局部肾素-血管紧张素系统(RAS)的阻断作用。方法采用单侧肾动脉注射+原位电穿孔的方法, 将AT1 AS-ODN导入到Wistar大鼠的一侧肾脏,观察以FITC荧光标记的ODN在肾脏的... 详细信息

目的研究血管紧张素Ⅰ型受体(AT1)反义(AS)寡核苷酸(ODN)对大鼠肾脏局部肾素-血管紧张素系统(RAS)的阻断作用。方法采用单侧肾动脉注射+原位电穿孔的方法, 将AT1 AS-ODN导入到Wistar大鼠的一侧肾脏,观察以FITC荧光标记的ODN在肾脏的转移位置,以AT1放射自显影定量分析的方法观察转移基因的时间-效应曲线。在基因转移3d后以 RT-PCR、Western印迹及免疫组织化学方法检测肾脏AT1的mRNA和蛋白表达与分布,并与正义(Sen)ODN转移、假注射+肾脏原位电穿孔(Sham)作为对照。结果FITC标记的ODN在基因转移10 min后主要定位于转移侧肾脏的肾小球,而对侧肾脏FITC荧光阴性。AT1放射自显影定量分析显示在基因转移后的3 d内,结合有血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的AT1较未转移的对侧肾脏减少约70％。AT1 AS-ODN基因转移后3 d,转移侧肾脏AT1 mRNA水平较对侧肾脏下降约 43％,蛋白水平下降约67％,而与AT1 Sen-ODN和Sham组转移侧肾脏比较,AT1的mRNA水平下降分别约47％和51％,蛋白水平下降分别约63％和71％。免疫组化检查发现AT1的阻断以系膜区的表达减少为主。结论本研究所用的单侧肾动脉注射+原位电穿孔的基因转移方法成功地抑制了单侧肾脏的肾小球AT1受体的表达,为研究全身性疾病肾损害中肾脏局部RAS的短

关键词：局部肾素-血管紧张素系统阻断作用 Ⅰ型受体反义寡核苷酸大鼠血管紧张素Ⅱ(AngⅡ) Western印迹免疫组织化学方法 AS-ODN mRNA水平放射自显影 RT-PCR FITC标记免疫组化检查基因转移方法动脉注射定量分析蛋白水平

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普鲁卡因对肾上腺α受体的阻断作用

中国药理学通报 1992年第4期8卷 318-319页

作者：罗来源戴长蓉湖北省宜昌卫校宜昌443000

本文以大鼠肛尾肌和兔主动脉条为标本,用哌唑嗪(Prazosin,Pra)对照,观察了普鲁卡因(Procaine,Pro)是否具有α受体阻断作用。1

关键词：普鲁卡因 α受体阻断作用

精氨酸加压素V_1受体阻断剂对毒死蜱降温效应的阻断作用

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中国应用生理学杂志 2002年第4期18卷 361-361,381页

作者：杨永录 Christopher J.Gordon 解放军兰州医高专生理教研室甘肃兰州730020 NationalHealthandEnvironmentalEffectsResearchLaboratory

精氨酸加压素(AVP)能够降低致热原性和非致热原性的发热效应,精氨酸加压素V1受体阻断剂(AVP V1受体阻断剂)可以阻断其作用.最近几年的研究发现,有机磷农药杀虫剂毒死蜱(CHP)可以引起体温降低.目前认为CHP引起的降温效应与体内乙酰胆硷(A... 详细信息

精氨酸加压素(AVP)能够降低致热原性和非致热原性的发热效应,精氨酸加压素V1受体阻断剂(AVP V1受体阻断剂)可以阻断其作用.最近几年的研究发现,有机磷农药杀虫剂毒死蜱(CHP)可以引起体温降低.目前认为CHP引起的降温效应与体内乙酰胆硷(Ach)含量增加有关,因为Ach参与体温调节过程.我们考虑既然AVP有参与体温调节和降温过程,那么CHP的降温作用是否与AVP有关,所以本研究观察了AVP V1受体阻断剂对CHP引起的体温变化的影响.

关键词：精氨酸加压素V1受体阻剂毒死蜱降温效应阻断作用杀虫剂