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甲型流感病毒NP及相关宿主因子研究进展

中国病原生物学杂志 2024年第3期19卷 360-366页

作者：高三利孙欣王盛羽宋鸿遵义医科大学微生物学教研室贵州遵义563000 遵义医科大学贵州省普通高等学校传染病与生物安全特色重点实验室

甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)严重威胁人类健康。病毒核心是核糖核蛋白复合物(viral ribonucleoprotein complexes,vRNPs),是病毒基因组转录和复制的最小功能单位。核蛋白(nucleoprotein,NP)是vRNP的重要组成部分之一,在流感病... 详细信息

甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)严重威胁人类健康。病毒核心是核糖核蛋白复合物(viral ribonucleoprotein complexes,vRNPs),是病毒基因组转录和复制的最小功能单位。核蛋白(nucleoprotein,NP)是vRNP的重要组成部分之一,在流感病毒整个生命周期起着关键作用。机体存在多种宿主因子通过NP影响病毒增殖。本文就通过NP影响vRNP核输入、病毒基因组转录和复制、vRNP核输出以及vRNP组装这几个方面的宿主因子进行综述,以期为治疗IAV新靶点的发现及新药物的研发提供参考。

关键词：甲型流感病毒核蛋白NP 宿主因子病毒增殖相互作用综述

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甲型流感病毒感染动物模型的研究进展

中华微生物学和免疫学杂志 2023年第9期43卷 727-732页

作者：王忆菲黄维金耿彦生赵晨燕中国食品药品检定研究院艾滋病性病病毒疫苗室国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法与标准化重点实验室国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室北京102629 河北大学公共卫生学院预防医学系保定071000

流行性感冒(简称流感)在全球范围内引发了较高的发病率和死亡率,严重危害人类健康和生命,流感病毒的不断变异为流感的预防和治疗带来新的挑战。动物模型为全面认知流感病毒发病机制、传播机制、疫苗开发及治疗效果评估提供便利,不同研... 详细信息

流行性感冒(简称流感)在全球范围内引发了较高的发病率和死亡率,严重危害人类健康和生命,流感病毒的不断变异为流感的预防和治疗带来新的挑战。动物模型为全面认知流感病毒发病机制、传播机制、疫苗开发及治疗效果评估提供便利,不同研究中流感病毒动物感染模型的构建与使用存在差异,不同动物模型的应用也各具特点。本文综述了多种动物模型的构建及使用现状,总结了其在抗体、药物和疫苗效力评估方面的优势和局限性,为将来选择及优化动物模型提供参考。

关键词：甲型流感病毒动物模型优点和局限性感染疫苗

甲型流感病毒核蛋白和基质蛋白2胞外域融合mRNA疫苗在小鼠体内的免疫应答研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2022年第3期42卷 209-215页

作者：郭俊佳王文玲邓瑶黄保英叶飞阿茹罕王娜孙新蕾谭文杰温州医科大学检验医学院、生命科学学院浙江省医学遗传学重点实验室温州325035 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会生物安全重点实验室北京102206

目的:基于脂质多聚复合物(lipopolyplex,LPP)递送平台和保守抗原开发的新型流感病毒mRNA疫苗在小鼠体内的免疫原性评价。方法:将4个拷贝的甲型流感病毒基质蛋白2胞外域(extracellular domain of matrix 2 protein,M2e)与核蛋白(nucleopr... 详细信息

目的:基于脂质多聚复合物(lipopolyplex,LPP)递送平台和保守抗原开发的新型流感病毒mRNA疫苗在小鼠体内的免疫原性评价。方法:将4个拷贝的甲型流感病毒基质蛋白2胞外域(extracellular domain of matrix 2 protein,M2e)与核蛋白(nucleoprotein,NP)编码基因按照真核密码子优化,串联构建融合抗原并体外转录为4M2eNP-mRNA,利用LPP技术平台制备甲型流感病毒mRNA疫苗(LPP-4M2eNP)。转染真核细胞后通过免疫荧光体外验证NP和M2e表达;BALB/c小鼠经肌肉注射10μg、30μg mRNA疫苗,间隔4周加强免疫一次,酶联免疫法检测免疫后血清抗体滴度,免疫斑点法检测细胞免疫应答。结果:间接免疫荧光检测表明4M2eNP-mRNA转染真核细胞后NP和M2e正确表达。单针免疫可明显诱导抗原(NP和M2e)特异性细胞免疫应答,加强免疫后在小鼠中诱发了抗原特异性体液免疫应答呈Th1型偏向;NP细胞免疫应答显著提高,但M2e细胞免疫应答强度无明显改变。结论:本研究制备的LPP-4M2eNP疫苗在小鼠中单针免疫即可诱导较强的细胞免疫应答,加强免疫后可诱导明显的体液和细胞免疫应答,表明该疫苗具有较好的研发和应用前景。

关键词：甲型流感病毒 mRNA疫苗免疫应答核蛋白基质蛋白2胞外域

甲型流感病毒所致宿主细胞因子风暴的研究进展

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中国预防兽医学报 2022年第3期44卷 338-343页

作者：嵇祝星刘晓文王晓泉刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225000 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225000

甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)是有囊膜的正粘病毒科成员,其基因组包含8个节段的单股负链RNA。IAV是人呼吸道感染的重要病原,可以导致季节性的流行和大流行。回顾历史,共发生了4次流感大流行,分别是1918年H1N1、1957年H2N2、196... 详细信息

甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)是有囊膜的正粘病毒科成员,其基因组包含8个节段的单股负链RNA。IAV是人呼吸道感染的重要病原,可以导致季节性的流行和大流行。回顾历史,共发生了4次流感大流行,分别是1918年H1N1、1957年H2N2、1968年的H3N2以及2009年的H1N1流感大流行。至今,全球每年有10亿左右人口会感染流感病毒,有294000~518000人死于季节性流感,给人类健康及公共卫生安全带来巨大的威胁。

关键词：甲型流感病毒正粘病毒科呼吸道感染 H1N1 H3N2 公共卫生安全流感大流行

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甲型流感病毒宿主范围决定因素的研究进展

中国预防兽医学报 2023年第8期45卷 869-876页

作者：张晓芮汤思淇朱大帷李海玲冯亚莉徐艺娜苏超凡冷昊钰王永涛张月美太晓春张莹沈阳农业大学动物科学与医学学院/重要家畜疫病研究教育部重点研究室/辽宁省人畜共患病研究重点实验室辽宁沈阳110866 辽宁省农业发展服务中心辽宁沈阳110033 高唐县畜牧水产事业中心山东聊城252800 山东海利生物制品有限公司山东潍坊262233

流感是由流感病毒所引起的一类急性呼吸道疾病。流感病毒分为4种类型:A(甲)、B(乙)、C(丙)和D(丁)。其中甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)的宿主范围极广,除了家禽、鸟类以外,IAV还能感染马、猪、海豹、水貂、老虎、犬、猫等哺乳动... 详细信息

流感是由流感病毒所引起的一类急性呼吸道疾病。流感病毒分为4种类型:A(甲)、B(乙)、C(丙)和D(丁)。其中甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)的宿主范围极广,除了家禽、鸟类以外,IAV还能感染马、猪、海豹、水貂、老虎、犬、猫等哺乳动物以及人类[1]。IAV基因组编码10种必需蛋白,分别为聚合酶碱性蛋白2(PB2)、聚合酶碱性蛋白1(PB1)、聚合酶酸性蛋白(PA)、血凝素(HA)、核蛋白(NP)、神经氨酸酶(NA)、基质蛋白(M1)、膜蛋白(M2)、非结构蛋白1(NS1)以及非结构蛋白2(NS2),此外其还编码多种附件蛋白,包括PB1-F2蛋白、PA-X蛋白等。

关键词：甲型流感病毒急性呼吸道疾病基质蛋白宿主范围聚合酶碱性蛋白非结构蛋白2 基因组编码

甲型流感病毒H1N1感染致小鼠肠道损伤机制的研究

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疾病监测 2023年第9期38卷 1108-1115页

作者：李金桐晏军任志鸿宋利琼肖玉春黄元铭班承钧北京中医药大学东直门医院北京100700 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所北京102206

目的观察甲型流感病毒H1N1感染小鼠的一般状态、肺组织病理、肠组织病理、结肠转录组、肠内容物代谢组的变化,探究甲型流感病毒H1N1感染致小鼠肠道损伤的机制。方法用流感病毒PR8感染C57BL/6J小鼠,留取感染后第7天肺组织、结肠组织和盲... 详细信息

目的观察甲型流感病毒H1N1感染小鼠的一般状态、肺组织病理、肠组织病理、结肠转录组、肠内容物代谢组的变化,探究甲型流感病毒H1N1感染致小鼠肠道损伤的机制。方法用流感病毒PR8感染C57BL/6J小鼠,留取感染后第7天肺组织、结肠组织和盲肠内容物,计算肺指数,测量结肠长度,采用苏木素–伊红染色观察肺、肠组织病理,RNA-seq法进行结肠转录组测序,非靶向代谢组学检测盲肠内容物。结果感染模型组小鼠较空白对照组小鼠体质量减轻、活动减少,肺指数增加,结肠长度缩短,肺、结肠组织病理出现损伤。空白对照组和感染模型组小鼠共有1609个差异基因,437个差异代谢物,这些差异基因和差异代谢物共同富集到的通路包括花生四烯酸代谢通路和色氨酸代谢通路。结论甲型流感病毒感染可能通过改变小鼠结肠内基因表达水平和盲肠内的代谢产物造成小鼠肠道损伤。

关键词：甲型流感病毒肺损伤结肠损伤转录组学代谢组学

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甲型流感病毒宿主嗜性相关位点的多态性研究

上海预防医学 2023年第7期35卷 626-633页

作者：刘修良李艳娇陈伟杰王雨茜高其乐胡晶晶张志杰熊成龙复旦大学公共卫生学院公共卫生安全教育部重点实验室上海200032

【目的】以甲型流感病毒(IAV)毒株的完整内部蛋白编码基因为基础,发现并分析IAV传播过程中出现的影响宿主嗜性类型的单个或相互作用的关键氨基酸位点,为研究IAV的人类宿主适应性突变提供依据。【方法】在全球流感共享数据库(GISAID)EpiF... 详细信息

【目的】以甲型流感病毒(IAV)毒株的完整内部蛋白编码基因为基础,发现并分析IAV传播过程中出现的影响宿主嗜性类型的单个或相互作用的关键氨基酸位点,为研究IAV的人类宿主适应性突变提供依据。【方法】在全球流感共享数据库(GISAID)EpiFluTM数据库中,根据查询条件获得43671个IAV毒株对应的6个内部基因节段全长核苷酸序列,通过质控与去冗余后保留698个嗜人类亚型(HU)和1266个嗜禽类亚型(AV)代表株,使用R代码比较2种嗜性类别代表株的氨基酸共义序列,获得氨基酸差异位点及其多态性,并对差异位点进行多位点组合分析。【结果】AV与HU中H1N1、H3N2亚型代表株分别进行共有序列比对,各发现49个、57个保守差异位点。差异位点的多位点组合分析,在HU与AV间分别发现79个三位点组合与65个四位点组合。共有11个保守差异位点同时存在于2种组合内:PB2蛋白的271、684位点;PB1蛋白的336、486、581、621位点;PA蛋白的204、356位点;NP蛋白的33、305、357位点;M1和NS1中未发现符合条件的差异位点。【结论】IAV的嗜人和嗜禽类毒株间在PB2、PB1、PA与NP蛋白中存在若干保守氨基酸差异位点,这些位点彼此间可能存在一定形式的互相作用并进而形成特定的组合,共同(而非各自)决定着病毒的宿主嗜性。

关键词：甲型流感病毒基因宿主嗜性氨基酸多态性

甲型流感病毒通过调控TGF-β1介导的ORM2抑制CCL3表达

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中国兽医科学 2022年第10期52卷 1308-1316页

作者：潘宸胡精蕴张岩威赵森红张欣格彭本群毛亚楠王淑霖王松福建农林大学动物科学学院福建省畜禽病原感染与免疫学重点实验室福建福州350002 福建农林大学动物科学学院闽台动物病原生物学福建省高校重点实验室福建福州350002 福建农林大学动物科学学院福建省-尼泊尔畜禽重大疫病防控联合实验室福建福州350002

为探究甲型流感病毒(IAV)感染对类黏蛋白(ORM)表达的调控作用,利用H1N1、H9N2亚型流感病毒感染A549和DF1细胞,检测发现ORM1和ORM2的表达水平显著升高;H1N1亚型流感病毒感染BALB/c小鼠后,小鼠肺中ORM1和ORM2的表达水平同样显著升高。进... 详细信息

为探究甲型流感病毒(IAV)感染对类黏蛋白(ORM)表达的调控作用,利用H1N1、H9N2亚型流感病毒感染A549和DF1细胞,检测发现ORM1和ORM2的表达水平显著升高;H1N1亚型流感病毒感染BALB/c小鼠后,小鼠肺中ORM1和ORM2的表达水平同样显著升高。进一步筛选发现,IAV感染激活的转化生长因子β1(TGF-β1)能够显著诱导ORM1和ORM2的表达,使用TGF-β1受体抑制剂处理可以阻断IAV和TGF-β1诱导的ORM表达水平的升高。为探究ORM蛋白在流感病毒感染中发挥的作用,使用IAV感染ORM1和ORM2过表达及干扰细胞系。结果显示,细胞中干扰或过表达ORM1和ORM2后对IAV的复制没有影响,但ORM2能够抑制趋化因子CCL3的表达。综上所述,IAV通过TGF-β1介导的ORM2抑制趋化因子CCL3的表达,从而抑制体内炎症反应,拮抗宿主天然免疫应答。

关键词：甲型流感病毒类黏蛋白转化生长因子β1 CCL3

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甲型流感病毒反向遗传操作系统研究进展

中国动物传染病学报 2023年第4期31卷 207-212页

作者：杨景郭锦玥黄淑坚温峰佛山科学技术学院生命科学与工程学院佛山528225

甲型流感病毒(IAV)是一类严重危害人畜健康的人兽共患病病毒。经过三十多年的发展,从基因型到表型的反向遗传操作系统已被熟练应用于IAV各方面的研究。反向遗传操作系统彻底改变了传统的IAV研究策略,能够通过在基因组中引入特定的突变... 详细信息

甲型流感病毒(IAV)是一类严重危害人畜健康的人兽共患病病毒。经过三十多年的发展,从基因型到表型的反向遗传操作系统已被熟练应用于IAV各方面的研究。反向遗传操作系统彻底改变了传统的IAV研究策略,能够通过在基因组中引入特定的突变而改变病毒生物学特性,也为疫苗的研制提供了新思路。本文就IAV反向遗传操作系统的发展历史和基本原理进行了综述。

关键词：甲型流感病毒反向遗传操作系统疫苗