甲型流感病毒血凝素头部蛋白结构域的原核表达及血清学分析

作     者：年悬悬 刘京 邓涛 李军英 周蓉 张国梅 马宁 张哲罡 张家友 杨晓明 Nian Xuanxuan;Liu Jing;Deng Tao;Li Junying;Zhou Rong;Zhang Guomei;Ma Ning;Zhang Zhegang;Zhang Jiayou;Yang Xiaoming

作者机构：武汉生物制品研究所病毒性疫苗研究二室武汉430207 国家联合疫苗工程技术研究中心武汉430207 中国生物技术股份有限公司北京100029 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2022年第42卷第11期

页      面：857-864页

核心收录：

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

主　　题：甲型流感病毒 血凝素头部结构域 原核表达 多克隆抗体 免疫原性 

摘      要：目的在原核系统中表达流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)头部蛋白并进行血清学分析。方法将H1N1和H3N2型流感病毒的HA头部蛋白编码基因克隆到pET-22b(+)原核表达质粒中,通过IPTG诱导,在大肠埃希菌BL21中获得含有HA头部与His-Tag的融合蛋白rH1N1-HA和rH3N2-HA。SDS-PAGE分析IPTG诱导前后的融合蛋白,验证表达的准确性,Western blot验证重组蛋白的表达。纯化重组蛋白,多剂次免疫家兔,获得针对H1N1-HA和H3N2-HA头部的多克隆抗体。同时,重组蛋白免疫BALB/c小鼠,评价其免疫原性。结果rH1N1-HA和rH3N2-HA蛋白在小鼠体内诱导了滴度高于40的血凝抑制抗体,可作为一种保护性抗原。rH1N1-HA和rH3N2-HA蛋白制备的多克隆抗体,可作为Western blot、ELISA等免疫学应用的重要材料。结论本研究制备的HA头部蛋白可作为一种保护性抗原,在小鼠体内诱导保护性抗体。HA头部制备的多克隆抗体,可用于甲型流感病毒的免疫学和血清学研究。