甲型流感病毒核蛋白和基质蛋白2胞外域融合mRNA疫苗在小鼠体内的免疫应答研究

作     者：郭俊佳 王文玲 邓瑶 黄保英 叶飞 阿茹罕 王娜 孙新蕾 谭文杰 Guo Junjia;Wang Wenling;Deng Yao;Huang Baoying;Ye Fei;A Ruhan;Wang Na;Sun Xinlei;Tan Wenjie

作者机构：温州医科大学检验医学院、生命科学学院浙江省医学遗传学重点实验室温州325035 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会生物安全重点实验室北京102206 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2022年第42卷第3期

页      面：209-215页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(82041041) 国家重点研发计划项目(2020YFC0842200,2020YFC0860300) 

主　　题：甲型流感病毒 mRNA疫苗 免疫应答 核蛋白 基质蛋白2胞外域 

摘      要：目的:基于脂质多聚复合物(lipopolyplex,LPP)递送平台和保守抗原开发的新型流感病毒mRNA疫苗在小鼠体内的免疫原性评价。方法:将4个拷贝的甲型流感病毒基质蛋白2胞外域(extracellular domain of matrix 2 protein,M2e)与核蛋白(nucleoprotein,NP)编码基因按照真核密码子优化,串联构建融合抗原并体外转录为4M2eNP-mRNA,利用LPP技术平台制备甲型流感病毒mRNA疫苗(LPP-4M2eNP)。转染真核细胞后通过免疫荧光体外验证NP和M2e表达;BALB/c小鼠经肌肉注射10μg、30μg mRNA疫苗,间隔4周加强免疫一次,酶联免疫法检测免疫后血清抗体滴度,免疫斑点法检测细胞免疫应答。结果:间接免疫荧光检测表明4M2eNP-mRNA转染真核细胞后NP和M2e正确表达。单针免疫可明显诱导抗原(NP和M2e)特异性细胞免疫应答,加强免疫后在小鼠中诱发了抗原特异性体液免疫应答呈Th1型偏向;NP细胞免疫应答显著提高,但M2e细胞免疫应答强度无明显改变。结论:本研究制备的LPP-4M2eNP疫苗在小鼠中单针免疫即可诱导较强的细胞免疫应答,加强免疫后可诱导明显的体液和细胞免疫应答,表明该疫苗具有较好的研发和应用前景。