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当归补血汤提取工艺优化及其对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的脑保护作用研究

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中国医院药学杂志 2024年

作者：秦琴刘文石娅刘兴德宋信莉王洪鑫李鑫舒万芬张甘纯贵州中医药大学药学院/国家苗药工程技术研究中心/贵州中药炮制与制剂工程技术研究中心贵州医科大学药学院/贵州省特色天然药物资源高效利用工程中心重庆希尔安药业有限公司

目的：优化当归补血汤（Danggui Buxue Tang， DBT）的提取工艺，并探讨其对脑缺血再灌注损伤模型大鼠症状的改善作用。方法：以黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、藁本内酯6种成分含量为评价指标，采用熵权... 详细信息

目的：优化当归补血汤（Danggui Buxue Tang， DBT）的提取工艺，并探讨其对脑缺血再灌注损伤模型大鼠症状的改善作用。方法：以黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、藁本内酯6种成分含量为评价指标，采用熵权法-层次分析法（analytic hierarchy process，AHP）计算权重系数，多指标综合评分结合Box-Behnken响应面法考察溶剂浓度、料液比、提取时间对DBT提取工艺的影响；采用大鼠大脑中动脉栓塞/再灌注（Middle Cerebral Artery Occlusion/reperfusion， MCAO/R）模型评价工艺优化后的DBT对脑缺血再灌注损伤的脑保护作用。结果：最佳提取工艺条件为乙醇浓度86%，料液比10:1(mL·g-1)，提取2次，每次2.5 h，9号筛过滤，减压浓缩（＜50℃），冷冻干燥成冻干粉。药效学结果显示，当归补血冻干粉可改善神经功能缺损，减少脑梗死面积，减轻组织病理形态学损伤，降低大鼠脑组织中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）、白细胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）的含量（P＜0.05），升高过氧化氢酶（Catalase assay kit，CAT）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）的活性（P＜0.05）。结论：优化后的DBT提取工艺科学合理、稳定可行，此工艺制得的当归补血冻干粉可改善大鼠脑缺血再灌注损伤，可为该方后续的新制剂研究提供依据。

关键词：当归补血汤熵权法-AHP 多指标综合评分 Box-Behnken响应面法脑缺血再灌注损伤

基于网络药理学-分子对接技术探讨高粱泡叶抗炎作用的分子机制

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贵州科学 2024年第5期42卷 33-41页

作者：韦美燕韩伟李哲田孟斌吴静澜陈汝玲贵州中医药大学药学院贵州贵阳550025 国家苗药工程技术研究中心贵州贵阳550025 贵州中药炮制与制剂工程技术研究中心贵州贵阳550025 罗定市中医院广东罗定527200

目的:本研究旨在采用网络药理学与分子对接技术,揭示高粱泡叶在抗炎治疗中的潜在作用机制。方法:通过网络药理学数据库筛选识别出高粱泡叶关联的抗炎靶点,并进行蛋白互作网络(PPI)、基因本体论(GO)富集分析及京都基因与基因组百科全书(K... 详细信息

目的:本研究旨在采用网络药理学与分子对接技术,揭示高粱泡叶在抗炎治疗中的潜在作用机制。方法:通过网络药理学数据库筛选识别出高粱泡叶关联的抗炎靶点,并进行蛋白互作网络(PPI)、基因本体论(GO)富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析;同时,利用Autodock软件对关键靶点进行分子对接模拟。结果:从高粱泡叶中鉴定了30种活性成分,涉及493个潜在靶点和2004个疾病相关靶点,其中直接参与抗炎治疗的核心靶点共计131个,如IL-6、TNF-α、IL-1β、ALB、AKT1、EGFR、SRC、TP53、ATAT3、PTGS2等。GO功能富集与KEGG通路分析表明,高粱泡叶抗炎效应可能与PI3K-AKT信号通路、MAPK信号传导途径以及cAMP信号通路在内的170条生物通路密切相关。分子对接实验证实这些主要活性成分与相应靶蛋白间具有良好的结合亲和力。结论:高粱泡叶可能通过多种成分、多靶点、多信号通路发挥抗炎作用与机制,为深入研究高粱泡叶及其活性成分抗炎的作用机制提供实验依据和理论参考。

关键词：高粱泡叶网络药理学分子对接抗炎分子机制

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水凝胶微针的进展

塑料 2024年第5期53卷 113-117+129页

作者：万开龙宋信莉沈丽杨小双石佳楠钱舒琪陈丽贵州中医药大学药学院国家苗药工程技术研究中心贵州中药炮制与制剂工程技术研究中心

水凝胶微针是由具有三维网络结构的水凝胶材料制备得到，微针针体可以刺穿皮肤角质层，吸收皮肤间质液后溶胀转化为凝胶态，该性质使其在药物经皮促渗及对皮肤内生物标志物的提取识别领域具有重要作用。水凝胶微针能增大药物的经皮渗透... 详细信息

水凝胶微针是由具有三维网络结构的水凝胶材料制备得到，微针针体可以刺穿皮肤角质层，吸收皮肤间质液后溶胀转化为凝胶态，该性质使其在药物经皮促渗及对皮肤内生物标志物的提取识别领域具有重要作用。水凝胶微针能增大药物的经皮渗透性，使用方便，由于针尖仅有微米级长度，使用时能达到无痛/微痛的目的，使用结束后，皮肤内无基质残留，还能通过改变水凝胶交联度调节释药速率。因此，总结了近年来水凝胶微针相关的国内外代表文献，介绍在制备工艺、性能评价方法及其应用的研究进展。

关键词：水凝胶微针制备工艺性能评价高分子材料应用

基于PI3K/Akt信号通路探究当归补血汤干预大鼠实验性脑缺血再灌注损伤的作用机制

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中草药 2022年第16期53卷 5052-5065页

作者：石娅刘文刘兴德宋信莉李鑫舒万芬张甘纯秦琴王洪鑫贵州中医药大学贵州贵阳550025 贵州中医药大学药学院国家苗药工程技术研究中心贵州中药炮制与制剂工程技术研究中心贵州贵阳550025 贵州医科大学贵州贵阳550025

目的基于网络药理学结合体内实验探讨当归补血汤对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠的干预作用及相关作用机制。方法通过数据库收集当归补血汤中的活性成分及其治疗CIRI的靶点,构建蛋白质-蛋白质相互作... 详细信息

目的基于网络药理学结合体内实验探讨当归补血汤对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠的干预作用及相关作用机制。方法通过数据库收集当归补血汤中的活性成分及其治疗CIRI的靶点,构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,并进行基因本体(gene ontology,GO)功能和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析;通过Auto Dock软件对关键作用靶点与主要活性成分进行分子对接验证。SD大鼠给予尼莫地平或当归补血汤2周后,采用改良Longa线栓法复制大脑中动脉栓塞/再灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)模型,对神经行为学进行评分,并测定脑组织梗死面积;采用TUNEL染色法测定脑组织细胞凋亡情况;采用苏木素-伊红(HE)染色法考察脑组织病理变化;采用ELISA测定血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和IL-1β水平;采用qRT-PCR检测脑组织TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA表达;采用Western blotting检测脑组织蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、磷酸化Akt(phosphorylated Akt,p-Akt)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)蛋白表达。结果筛选出当归补血汤30种活性成分,得到当归补血汤治疗CIRI的靶点467个,核心靶点55个。KEGG通路富集分析表明磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/Akt信号通路是当归补血汤抗CIRI的关键机制之一。分子对接显示,当归补血汤中主要活性成分与核心作用靶点中的Akt1、信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、转录因子AP-1(transcription factor AP-1,JUN)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、细胞肿瘤抗原p53(cellular tumor antigen p53,TP53)、TNF和IL-6等具有较为稳定的结合活性。动物实验结果表明,当归补血汤能够改善CIRI大鼠神经功能损伤(P<0.05);减少脑组织梗死面积(P<0.05、0.01);减轻脑组织病理损伤;降低脑组织细胞凋亡指数(P<0.05、0.01、0.001);降低血清中TNF-α、IL-6和IL-1β水平(P<0.05、0.01);降低脑组织中TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA表达(P<0.01、0.001);增加脑组织中Akt的磷酸化水平(P<0.01、0.001)而激活PI3K/Akt信号通路,进一步上调Bcl-2蛋白表达(P<0.05、0.01、0.001),下调Bax蛋白表达(P<0.05、0.001)。结论当归补血汤可能通过作用多靶点及多通路治疗CIRI,其机制与影响Akt1、TNF、IL-6、IL-1β等蛋白的表达进而调控PI3K/Akt信号通路抑制炎症和细胞凋亡有关。

关键词：当归补血汤脑缺血再灌注损伤网络药理学磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路炎症细胞凋亡毛蕊异黄酮葡萄糖苷毛蕊异黄酮阿魏酸芒柄花素藁本内酯黄芪甲苷

微针长度与马钱子碱可溶性微针刺入性能及治疗效果的关联性研究

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中草药 2022年第11期53卷 3338-3347页

作者：汪云霞宋信莉王永林刘文张永萍王群陈欢欢石佳楠杨小双杨胜磊贵州中医药大学药学院贵州贵阳550025 贵州医科大学省级制剂重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550025 国家苗药工程技术研究中心贵州中药炮制与制剂工程技术研究中心贵州贵阳550025

目的制备不同微针长度(针长)马钱子碱(brucnine,Bru)可溶性微针(Bru-DMNs),探讨针长对微针刺入性能及治疗效果的影响。方法采用两步离心法制备不同针长(350、450、550、650、750、850μm)Bru-DMNs。通过铝箔及鼠皮穿刺实验考察各针长微... 详细信息

目的制备不同微针长度(针长)马钱子碱(brucnine,Bru)可溶性微针(Bru-DMNs),探讨针长对微针刺入性能及治疗效果的影响。方法采用两步离心法制备不同针长(350、450、550、650、750、850μm)Bru-DMNs。通过铝箔及鼠皮穿刺实验考察各针长微针穿刺性能;在体溶解实验考察各针长微针溶解性能;皮肤HE染色观察各针长微针刺入皮肤的深度;皮肤屏障恢复实验评估各针长微针对皮肤角质层的影响;采用Franz扩散池考察各针长微针体外透皮性能;体内药效学评估各针长微针对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的治疗作用。结果350、850μm针长微针穿刺效果较差,450、550、650、750μm针长微针穿刺性能较佳,能成功刺入皮肤形成微孔通道成功递送药物,刺入皮肤后可快速溶解,微针越长,溶解越快;针长越长,刺入皮肤越深,皮肤角质层孔道闭合越慢(4~6 h);450μm针长微针促渗效果较差,长度达到550μm时即有较好促渗效果;各针长微针均可不同程度缓解和治疗RA,长度达到550μm时即可达到理想疗效。结论当微针长度达到550μm时,各项性能良好,具有显著的促渗效果和治疗效果。

关键词：马钱子碱可溶性微针微针长度经皮给药类风湿性关节炎两步离心法药效学促渗

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雷公藤甲素双室可溶性微针的工艺研究及评价

中草药 2022年第9期53卷 2668-2677页

作者：陈欢欢宋信莉汪云霞刘文张永萍韩伟吴静澜刘兴德石佳楠杨小双贵州中医药大学贵州贵阳550025 贵州中医药大学药学院国家苗药工程技术研究中心贵州中药炮制与制剂工程技术研究中心贵州贵阳550025 贵州医科大学贵州贵阳550025

目的研究雷公藤甲素双室可溶性微针制备工艺,并进行质量评价及体外透皮性能的考察。方法以硫酸软骨素(chondroitinsulfate,CS)与羟丙基甲基纤维素(hydroxypropylmethylcellulose,HPMC)为针尖材料,聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone,PVP)K30与聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)为背衬材料。采用两步离心法制备双室载药微针,单因素试验及Box-Behnken设计-响应面法,优选针尖层、背衬层工艺参数。光学显微镜、电子扫描显微镜表征双室载药微针,倒置荧光显微镜观察药物分布,HPLC法测定载药量,大鼠体内外皮肤穿刺考察机械性能;采用Franz扩散池考察其体外透皮性能。结果双室载药微针的最优处方为40%乙醇-水溶液为药物溶剂;针尖工艺参数:HPMC与CS的比例为1∶4,材料与溶剂的比例为1∶1,针尖药物总质量浓度为6 mg/mL;背衬工艺参数:PVA与PVP K30的比例为1∶2,材料与溶剂的比例为1∶2,微针离心时间10 min,背衬药物总质量浓度为0.5 mg/mL。制备的双室载药微针外观形态、机械性能良好;针尖部位的药物主要分布于针尖尖端,背衬药物有些许下渗至针尖2/3处;每片含药量为(218.88±0.10)μg;体外透皮实验表明,72 h内雷公甲素累积透皮率达98%。结论雷公藤甲素双室载药的设计,增大载药量的同时还具有良好的缓释作用,该设计可为中药微针的研究奠定实验基础。

关键词：雷公藤甲素双室可溶性微针 Box-Behnken设计质量评价体外透皮性能硫酸软骨素羟丙基甲基纤维素 Box-Behnken设计-响应面法聚乙烯吡咯烷酮聚乙烯醇

UPLC-Q-Exactive-MS/MS联合网络药理学初探金乌骨通胶囊治疗骨质疏松症的活性成分及作用机制

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中国中药杂志 2023年第12期48卷 3360-3372页

作者：杨小双宋信莉宋学丽杨应勇刘文杨胜磊石佳楠沈丽万开龙刘兴德贵州中医药大学药学院贵州贵阳550025 国家苗药工程技术研究中心贵州贵阳550025 贵州中药炮制与制剂工程技术研究中心贵州贵阳550025 贵州神奇药业有限公司贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550025

基于UPLC-Q-Exactive-MS/MS技术,联合网络药理学初步探讨金乌骨通胶囊治疗骨质疏松症的活性成分及作用机制。首先采用UPLC-Q-Exactive-MS/MS对金乌骨通胶囊化学成分进行表征,并通过网络药理学的研究方法构建“药物-成分-靶点-通路-疾病... 详细信息

基于UPLC-Q-Exactive-MS/MS技术,联合网络药理学初步探讨金乌骨通胶囊治疗骨质疏松症的活性成分及作用机制。首先采用UPLC-Q-Exactive-MS/MS对金乌骨通胶囊化学成分进行表征,并通过网络药理学的研究方法构建“药物-成分-靶点-通路-疾病”网络,获取关键靶点及主要活性成分。其次,应用AutoDock软件对主要活性成分与关键靶点进行分子对接验证。最后,建立骨质疏松动物模型,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定金乌骨通胶囊对关键靶点AKT1、ALB、TNF-α表达的影响。从金乌骨通胶囊中共鉴定出化学成分59个,其中补骨脂甲素、8-异戊烯基柚皮素、去甲氧基姜黄素、异补骨脂二氢黄酮、金雀异黄酮等可能为金乌骨通胶囊治疗骨质疏松症的主要活性成分。蛋白-蛋白互作(PPI)网络拓扑分析得到AKT1、ALB、CTNNB1、TNF、EGFR等10个核心靶点。KEGG富集显示金乌骨通胶囊主要通过调控PI3K-AKT信号通路、神经活性配体-受体相互作用、MAPK信号通路、Rap1信号通路等发挥作用。分子对接显示金乌骨通胶囊主要活性成分与关键靶点结合良好,ELISA结果表明金乌骨通胶囊可以下调AKT1、TNF-α水平,上调ALB水平,初步验证了网络药理学的可靠性。该研究表明金乌骨通胶囊可能通过“多成分-多靶点-多途径”发挥治疗骨质疏松症的作用,可为后续深入研究提供参考。

关键词：金乌骨通胶囊骨质疏松症 UPLC-Q-Exactive-MS/MS 网络药理学分子对接

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芍药甘草汤对急性肺损伤大鼠肠道菌群的影响

中国药房 2023年第17期34卷 2063-2068页

作者：张甘纯刘文宋信莉刘兴德舒万芬秦琴王洪鑫贵州中医药大学药学院贵阳550025 贵州医科大学药学院贵阳550025

目的研究芍药甘草汤(SGD)对急性肺损伤(ALI)大鼠的改善作用及对肠道菌群的影响。方法将60只大鼠按随机数字表法分为正常组(CON组,生理盐水)、模型组(MOD组,生理盐水)、阳性对照组(DEX组,5 mg/kg地塞米松)和芍药甘草汤低、中、高剂量组... 详细信息

目的研究芍药甘草汤(SGD)对急性肺损伤(ALI)大鼠的改善作用及对肠道菌群的影响。方法将60只大鼠按随机数字表法分为正常组(CON组,生理盐水)、模型组(MOD组,生理盐水)、阳性对照组(DEX组,5 mg/kg地塞米松)和芍药甘草汤低、中、高剂量组(SGD-L、SGD-M、SGD-H组,给药剂量以生药量计分别为5.8、11.6、23.2 g/kg),每组10只。各组大鼠每天灌胃1次,灌胃体积均为10 mL/kg,连续7 d。末次灌胃30 min后,CON组大鼠气道滴注等体积生理盐水,其余各组大鼠气道滴注脂多糖(5 mg/kg)建立ALI模型。造模12 h后,计算大鼠肺组织湿/干重比,检测大鼠肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,以苏木素-伊红染色后观察肺组织病理形态学变化。采用16S rRNA测序技术分析大鼠粪便中菌群,并分析差异菌属与炎症因子的相关性。结果与MOD组比较,SGD各剂量组大鼠肺组织炎症细胞浸润均减少,肺泡隔增厚和肺泡水肿情况均有所改善;肺组织湿/干重比及BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。SGD(中剂量)可以改善ALI大鼠肠道菌群紊乱,恢复肠道菌群的多样性与丰富度,调节菌群结构,降低乳杆菌属、链球菌属和大肠埃氏菌属-志贺氏菌属的相对丰度,并增加厚壁菌属、毛螺菌属、瘤胃球菌属、梭状芽孢杆菌属、杜氏杆菌属和阿克曼菌属的相对丰度。相关性分析发现,乳杆菌属、链球菌属、大肠埃氏菌属-志贺氏菌属的相对丰度与炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平呈显著正相关(P<0.05或P<0.01);毛螺菌属、杜氏杆菌属、厚壁菌属的相对丰度与上述炎症因子的水平呈显著负相关(P<0.05或P<0.01)。结论 SGD可能通过减轻大鼠肺组织损伤和炎症反应、调节菌群结构来改善ALI。

关键词：芍药甘草汤急性肺损伤肠道菌群 16S rRNA测序炎症反应

桃核承气汤化瘀泻热“性-效”相关物质基础研究

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中国药房 2022年第22期33卷 2706-2711页

作者：舒万芬刘文宋信莉刘兴德张甘纯秦琴王洪鑫贵州中医药大学药学院贵阳550025 贵州医科大学药学院贵阳550025

目的研究经典名方桃核承气汤化瘀泻热的“性-效”相关物质基础。方法建立蓄血证大鼠模型,考察桃核承气汤全方(17.29 g/kg)及其药性拆分成分[苦寒组(大黄+芒硝)9.43 g/kg、辛温组(桂枝+桃仁)4.71 g/kg、甘平组(甘草)3.14 g/kg]对大鼠凝... 详细信息

目的研究经典名方桃核承气汤化瘀泻热的“性-效”相关物质基础。方法建立蓄血证大鼠模型,考察桃核承气汤全方(17.29 g/kg)及其药性拆分成分[苦寒组(大黄+芒硝)9.43 g/kg、辛温组(桂枝+桃仁)4.71 g/kg、甘平组(甘草)3.14 g/kg]对大鼠凝血指标(凝血酶原时间、凝血酶原活动度、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原、凝血酶时间、内皮素1)和炎症指标(C反应蛋白、肿瘤坏死因子α、超氧化物歧化酶)的影响。在确定优势药性组的基础上,采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法鉴定其成分,进行分子对接并筛选结合能≤-5.0 kcal/mol的成分作为“性-效”相关物质基础。结果桃核承气汤全方和辛温组药材均能显著改善模型大鼠的凝血指标(P<0.05或P<0.01),其全方和苦寒组药材均能显著改善模型大鼠的炎症指标(P<0.05或P<0.01)。辛温组为化瘀优势药性组,苦寒组为泻热优势药性组。分别从辛温组、苦寒组药材中鉴定出32、35个成分;结合能≤-5.0 kcal/mol的辛温组药材成分有10个(脱落酸、羟基酪醇、原花青素B1等),苦寒组药材成分有13个(黄芩素、芦荟大黄素、去甲蟛蜞菊内酯等)。结论桃核承气汤全方有化瘀、泻热的功效,其物质基础分别来自辛温组药材(桂枝、桃仁)和苦寒组药材(大黄、芒硝)。

关键词：桃核承气汤蓄血证药性凝血指标炎症指标物质基础大鼠