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青蒿琥酯对人脐带间充质干细胞诱导的去分化肌成纤维细胞凋亡的影响

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实用医学杂志 2022年第13期38卷 1630-1636页

作者：王雅文吴苗耿素霞曾令基王玉连赖沛龙杜欣翁建宇华南理工大学医学院广州510006 广东省人民医院(广东省医学科学院) 广州510080

目的了解人脐带间充质干细胞(hUCMSC)对肺肌成纤维细胞(MFB)的作用,探索青蒿琥酯联合hUCMSC对肺MFB的作用。方法胶原酶消化贴壁法获得hUCMSC;人胚肺成纤维细胞(MRC-5)经TGF-β1(10 ng/mL)诱导48 h后,加入MFB和(或)青蒿琥酯共培养24 h;撤... 详细信息

目的了解人脐带间充质干细胞(hUCMSC)对肺肌成纤维细胞(MFB)的作用,探索青蒿琥酯联合hUCMSC对肺MFB的作用。方法胶原酶消化贴壁法获得hUCMSC;人胚肺成纤维细胞(MRC-5)经TGF-β1(10 ng/mL)诱导48 h后,加入MFB和(或)青蒿琥酯共培养24 h;撤除MSC后,在MSC-deMFB体系中重新加TGF-β1再刺激。流式检测细胞凋亡、CCK8检测细胞增殖及qPCR和WB分别检测纤维化相关蛋白的mRNA和蛋白表达水平。结果hUCMSC符合ISCT的MSC标准。经TGF-β1刺激后的MRC-5(即MFB)与hUCMSC共培养24 h后,细胞(MSC-deMFB)呈增殖状态,CCK8检测发现OD值较对照组增加(P<0.01);α-SMA、COL1A1及FN1的表达明显降低,接近FB(MRC-5)初始水平(P<0.01)。当撤除MSC后,在MSC-deMFB体系中重新加入TGF-β1时,细胞恢复MFB特征(α-SMA、COL1A1及FN1的表达升高),提示MSC诱导MFB去分化是可逆的。当青蒿琥酯和MSC同时作用MFB时,细胞总凋亡率较对照组增加;并进一步抑制α-SMA、COL1A1的表达(P<0.01)。结论间充质干细胞分泌物诱导肺肌成纤维细胞增殖、可逆性去分化及抑制细胞外基质合成;青蒿琥酯诱导MSC-deMFB凋亡,与MSC协同抑制MSC-deMFB细胞α-SMA及纤维化相关细胞外基质基因表达。青蒿琥酯协同人脐带间充质干细胞可能是抗纤维化的新策略。

关键词：人脐带间充质干细胞青蒿琥酯肺肌成纤维细胞去分化凋亡

骨髓增生异常综合征患者骨髓γδT细胞及其亚群的水平及意义

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实用医学杂志 2023年第24期39卷 3195-3199页

作者：奚睿汀耿素霞黄欣李敏明邓程新王玉连黄励思翁建宇杜欣华南理工大学医学院广州510006 南方医科大学附属广东省人民医院(广东省医学科学院)血液科广州510080

目的了解骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者骨髓γδT细胞及其亚群的水平,探索MDS患者骨髓微环境的免疫缺陷状况。方法收集MDS患者治疗前后及正常供者骨髓样本,多色流式检测骨髓γδT细胞及亚群水平,并分析MDS患者... 详细信息

目的了解骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者骨髓γδT细胞及其亚群的水平,探索MDS患者骨髓微环境的免疫缺陷状况。方法收集MDS患者治疗前后及正常供者骨髓样本,多色流式检测骨髓γδT细胞及亚群水平,并分析MDS患者治疗后各细胞亚群的变化。结果MDS患者骨髓γδT细胞和滤泡辅助性γδT细胞明显降低(P0.05)。免疫检查点PD1和TIM3阳性的γδT细胞分别存在一定程度的降低和升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后获得疗效患者的γδT细胞和初始γδT细胞水平较治疗前明显升高,效应记忆γδT细胞较治疗前明显降低(P<0.05),85.71%(6/7)的MDS患者γδ+TIM3+T细胞水平治疗后不同程度的降低。结论MDS患者骨髓微环境γδT细胞及其亚群的水平存在不同程度的异常,治疗有效的患者,异常的γδT细胞恢复,通过γδT细胞及亚群水平检测可了解MDS的免疫缺陷状态,有可能作为判断疗效的指标,并为抗肿瘤免疫疗法提供新的资料。

关键词：骨髓增生异常综合征 γδT细胞滤泡辅助性γδT细胞调节性γδT细胞程序性死亡受体1 T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3

Gene expression profiling based identification of CD28 and PI3K as new biomarkers for chronic GVHD

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Gene expression profiling based identification of CD28 and P...

BCR-ABL酪氨酸激酶区点突变检测多中心比对研究

第13届全国实验血液学会议

作者： Peilong Lai,Jianyu Weng,Zesheng Lu,Rong Guo,Chenwei Luo,Suijing Wu,Wei Ling,suxia geng,and Xin Department of Haematology,Guangdong General Hospital,Guangdong Academy of Medical Sciences Guangzhou,5100080

＜正＞Introduction:Chronic graft-versus-host disease（cGVHD） is a major cause of morbidity and mortality after allogeneic hematopoietic stem cell ***,no reliable biomarkers are available to predict the onset or progression of cGVHD. Methods:In this study,we collected peripheral blood mononuclear cells from four patients with cGVHD and four ones with non-GVHD after hematopoietic stem cell transplantation and employed Affymetrix GeneChip Human U133 Plus 2.0 microarrays to screen the genes differentially expressed in cGVHD versus non-GVHD groups,with the aim to identify potential clinical biomarkers to predict cGVHD risk or progression.

关键词：

来源： cnki会议评论

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中华血液学杂志 2015年第11期36卷 902-905页

作者：秦亚溱王冬梅乔纯沈宏杰耿素霞曹增黄晓军北京大学人民医院、北京大学血液病研究所 100044 浙江大学附属第一医院江苏省人民医院苏州大学附属第一医院广东省人民医院中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院

目的调查不同医院BCR-ABL酪氨酸激酶区点突变检测的准确性和一致性。方法由6家医院各制备10份来自于酪氨酸激酶抑制剂耐药的BCR-ABL（＋）患者骨髓或外周血样本的cDNA，每份分装成6管派发，每家医院按照自身的操作程序检测共60份比对样... 详细信息

目的调查不同医院BCR-ABL酪氨酸激酶区点突变检测的准确性和一致性。方法由6家医院各制备10份来自于酪氨酸激酶抑制剂耐药的BCR-ABL（＋）患者骨髓或外周血样本的cDNA，每份分装成6管派发，每家医院按照自身的操作程序检测共60份比对样本的BCR-ABL激酶区点突变，由北京大学人民医院结合测序图谱进行结果比对分析。结果37份（61．7％）比对样本的碱基及相应氨基酸突变类型6家医院报告均一致。53份样本可以确定突变类型，共涵盖23种；1份样本没有突变；6份样本由于室间图谱差异较大无法明确结果。突变比例低造成12份样本结果不一致，二者明显相关（Ps0．008）；测序图谱特殊及扩增区域未覆盖各造成1份样本结果不一致；3份样本发生扩增失败；7份样本发生检测或报告错误。80．6％的结果明确的样本室间报告突变比例差值在20％以内。标本内参弱与检测失败和室问测序图谱差异大均相关。结论通过样本比对能够发现临床常规检测存在的问题，促进检测水平的提高。突变比例低是导致室问突变报告不一致的主要因素。

关键词： BCR-ABL酪氨酸激酶区点突变测序图谱突变比例

青蒿琥酯调控Thl7/Treg平衡抑制慢性移植物抗宿主病的实验研究

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中华血液学杂志 2019年第1期40卷 63-68页

作者：陈晓梅翁建宇赖沛龙王玉连黄欣耿素霞郭礼妍黄恬曾令基杜欣广东省人民医院(广东省医学科学院)血液科、广东省老年医学研究所广州510080

目的探讨青蒿琥酯抗慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的作用及可能机制。方法将B10D2小鼠的骨髓细胞和脾脏细胞混合悬液通过尾静脉输入近交系雌性BALB/c小鼠体内建立cGVHD模型,分别予青蒿琥酯(实验组)和丙酮腹腔(对照组)注射治疗。观察两组小... 详细信息

目的探讨青蒿琥酯抗慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的作用及可能机制。方法将B10D2小鼠的骨髓细胞和脾脏细胞混合悬液通过尾静脉输入近交系雌性BALB/c小鼠体内建立cGVHD模型,分别予青蒿琥酯(实验组)和丙酮腹腔(对照组)注射治疗。观察两组小鼠的cGVHD临床表现、生存时间和组织病理学改变;应用流式细胞术分析小鼠外周血和脾脏Th17和Treg细胞比例;免疫磁珠分选BALB/c小鼠脾脏CD4+T细胞,分别予丙酮和青蒿琥酯进行干预72 h,流式细胞术分析两组Th17/Treg细胞比例。结果①实验组小鼠cGVHD临床症状较对照组明显减轻,生存时间延长[(55.71±6.99)d对(46.57±7.83)d,χ^2=5.457,P=0.020]。②实验组小鼠皮肤及肺脏cGVHD病理损伤较轻。③与对照组比较,实验组小鼠外周血、脾脏Th17细胞比例均降低[(0.58±0.19)%对(1.51±0.18)%,t=7.233,P<0.001;(0.71±0.18)%对(1.48±0.38)%,t=3.653,P=0.011],Treg细胞比例增高[(8.40±0.23)%对(4.45±0.04)%,t=15.680,P<0.001;(10.48±0.48)%对(6.62±0.24)%,t=6.590,P=0.003],Th17/Treg细胞比值均下降(0.09±0.03对0.34±0.05,t=7.621,P=0.002;0.06±0.02对0.19±0.03,t=6.993,P=0.002)。④体外培养小鼠脾脏CD4+T细胞,青蒿琥酯干预组较对照组Th17细胞比例减低[(0.82±0.37)%对(3.39±1.22)%,t=4.044,P=0.007],Treg细胞比例明显增高[(34.63±1.29)%对(14.28±1.69)%,t=19.119,P<0.001],Th17/Treg细胞比值下降(0.24±0.09对0.02±0.01,t=4.780,P=0.003)。结论青蒿琥酯可通过减少Th17细胞及增加Treg细胞,恢复Th17/Treg平衡,减轻cGVHD的临床与病理学损伤,从而发挥抗cGVHD作用。

关键词：青蒿琥酯 Th17细胞调节性T细胞 Th17/Treg平衡慢性移植物抗宿主病

慢性粒单核细胞白血病患者骨髓成纤维集落形成单位功能及意义

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中国组织工程研究 2019年第21期23卷 3398-3403页

作者：徐若豪李超吴萍李敏明邓程新耿素霞赖沛龙陆泽生翁建宇杜欣华南理工大学医学院广东省广州市510006 广东省人民医院血液科广东省医学科学院广东省广州市510080

背景:研究表明,异常的骨髓微环境可能参与慢性粒单核细胞白血病的发生,成纤维集落形成单位(colony formingunit-fibroblast,CFU-F)代表了一组具有多系分化潜能的间充质干细胞,其功能、数量状态具有评价骨髓基质微环境状态的意义。目的:... 详细信息

背景:研究表明,异常的骨髓微环境可能参与慢性粒单核细胞白血病的发生,成纤维集落形成单位(colony formingunit-fibroblast,CFU-F)代表了一组具有多系分化潜能的间充质干细胞,其功能、数量状态具有评价骨髓基质微环境状态的意义。目的:评估慢性粒单核细胞白血病患者骨髓间充质干细胞形成CFU-F的能力与成骨分化潜能,探讨CFU-F指标与患者外周血细胞计数、疾病表现型等指标的相关性。方法:①收集广东省人民医院血液科收治、资料齐全的慢性粒单核细胞白血病患者15例与对照组志愿者10例,比较两组间骨髓形成CFU-F的功能与分化潜能;②分析慢性粒单核细胞白血病患者骨髓CFU-F数量与初诊时外周血细胞计数、临床表现型、骨髓原始细胞及患者基因突变的相关性。实验方案得到广东省人民医院(广东省医学科学院)伦理委员会批准,批件号:[2018]002号。结果与结论:①15例慢性粒单核细胞白血病患者CFU-F数量低于对照组(P=0.04),其中67%(10/15)的慢性粒单核细胞白血病患者骨髓CFU-F数量显著降低(P=0.00),33%(5/15)患者CFU-F水平接近对照组(P=0.14);②全组慢性粒单核细胞白血病患者骨髓间充质干细胞成骨转录因子Osterix及RUNX2的表达量显著降低(P <0.05),成骨分化潜能显著下降(P=0.00);③慢性粒单核细胞白血病患者CFU-F数量与初诊时外周血白细胞、中性粒细胞以及单核细胞计数呈负相关,与外周血小板计数呈正相关;④在CFU-F数量显著降低的10例患者中,90%(9/10)外周血白细胞计数均升高(≥13×10~9L^(-1),P=0.01),50%(5/10)患者携带有NRAS/KRAS基因位点突变。⑤结果表明:慢性粒单核细胞白血病患者骨髓间充质干细胞功能受损,形成的CFU-F数量降低,CFU-F数量与外周血细胞计数以及患者临床特征具有相关性,提示了CFU-F指标具有潜在的临床价值。

关键词：成纤维集落形成单位骨髓间充质干细胞慢性粒单核细胞白血病 KRAS基因 NRAS基因成骨分化外周血细胞计数 MPN-CMML型 MDS-CMML型骨髓微环境

骨髓增生异常综合征患者去甲基化治疗后WT1 mRNA水平的变化及其预后意义

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中华血液学杂志 2019年第5期40卷 417-421页

作者：张弘扬耿素霞李敏明赖沛龙邓程新陆泽生黄欣王玉连翁建宇杜欣南方医科大学第二临床医学院广州510515 广东省人民医院(广东省医学科学院) 广州510080 广东省老年医学研究所广州510080 华南理工大学医学院广州510006

目的监测骨髓增生异常综合征(MDS)患者去甲基化治疗后WT1 mRNA水平的变化,评估WT1 mRNA水平变化在判断患者疗效、区分不同疾病稳定(stable disease,SD)状态中的意义.方法以2009年11月至2018年3月56例在广东省人民医院接受去甲基化治疗(... 详细信息

目的监测骨髓增生异常综合征(MDS)患者去甲基化治疗后WT1 mRNA水平的变化,评估WT1 mRNA水平变化在判断患者疗效、区分不同疾病稳定(stable disease,SD)状态中的意义.方法以2009年11月至2018年3月56例在广东省人民医院接受去甲基化治疗(≥4个疗程)的MDS患者为研究对象,实时定量PCR检测其骨髓或外周血WT1 mRNA的表达,观察WT1 mRNA表达水平的动态变化与患者临床疗效和预后的相关性.结果去甲基化治疗3个疗程后,MDS患者WT1 mRNA水平较治疗前显著降低.20例疾病进展患者病情进展或转为急性髓系白血病(AML)后WT1 mRNA表达水平较治疗前明显升高.45例SD的MDS患者,根据SD期间WT1 mRNA表达水平变化分为WT1升高与未升高两组,SD期间WT1 mRNA表达水平升高的患者中病情进展或转AML的比例为95.65%(22/23),而SD期间WT1 mRNA表达水平未升高的患者中病情进展或转为AML的比例为9.09%(2/22)(X^2=33.852,P<0.001).与SD期间WT1 mRNA表达水平未升高的患者相比,SD期间WT1 mRNA表达水平升高的患者的总生存期[17(95%CI11~23)个月对未达到,P<0.001]和无进展生存期[13(95%CI8~18)个月对未达到,P<0.001]明显缩短.结论WT1 mRNA表达水平是评估MDS患者去甲基化治疗后疗效变化有效的实验室指标,尤其对于SD的患者,动态检测WT1 mRNA表达水平,可预测病情演变,从而指导临床治疗.

关键词：骨髓增生异常综合征基因,WT1 去甲基化治疗疾病稳定

γ干扰素联合脂多糖诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化

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中国组织工程研究 2020年第13期24卷 2020-2027页

作者：黄恬黄欣赖沛龙耿素霞陈晓梅王玉连郭礼妍曾高淳韩凤珍李晓红杜欣翁建宇华南理工大学医学院广东省广州市510006 广东省人民医院血液科广东省医学科学院广东省广州市510080 广东省人民医院产科广东省医学科学院广东省广州市510080 广东省人民医院医学研究中心广东省医学科学院广东省广州市510080

背景:间充质干细胞的免疫调节特性已被临床广泛应用于自身免疫性疾病和移植物抗宿主病,但是其免疫调节的可塑性导致间充质干细胞临床治疗效果出现异质性和不稳定性。目的:探索γ干扰素联合脂多糖模拟炎症微环境诱导人脐带间充质干细胞向... 详细信息

背景:间充质干细胞的免疫调节特性已被临床广泛应用于自身免疫性疾病和移植物抗宿主病,但是其免疫调节的可塑性导致间充质干细胞临床治疗效果出现异质性和不稳定性。目的:探索γ干扰素联合脂多糖模拟炎症微环境诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化的作用。方法:体外分离培养人脐带间充质干细胞,进行形态学、表面标志物、成脂及成骨诱导分化能力鉴定。分别用γ干扰素(10μg/L)、脂多糖(100μg/L)及二者联合刺激人脐带间充质干细胞24h,与植物凝集素刺激的外周血单个核细胞直接共培养或Transwell间接共培养5 d。流式细胞术检测共培养不同时间点调节性T细胞和Th1细胞比例,荧光定量PCR检测人脐带间充质干细胞的Toll样受体2,3,4 mRNA表达水平。结果与结论:①人脐带间充质干细胞呈梭形或成纤维形,高表达CD73、CD90、CD105,低表达CD34、CD45、HLA-DR;②在直接与间接共培养条件下,γ干扰素联合脂多糖刺激人脐带间充质干细胞均可增加调节性T细胞的比例,优于γ干扰素或脂多糖单独刺激组、未刺激组及外周血单个核细胞对照组(P <0.05);③Th1细胞比例随共培养时间的延长呈逐渐下降的趋势;④在间接共培养的条件下,γ干扰素联合脂多糖刺激人脐带间充质干细胞更早向免疫抑制型MSC2极化,Toll样受体3表达显著增高(P <0.05);⑤以上结果表明间接共培养体系下γ干扰素(10μg/L)联合脂多糖(100μg/L)是诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化的高效组合,并且MSC2的免疫抑制作用不依赖于细胞间的直接接触,为MSC2来源外泌体将来应用于临床研究奠定实验基础。

关键词：人脐带间充质干细胞 γ干扰素脂多糖调节性T细胞 Toll样受体

伴del（5q）骨髓增生异常综合征50例临床分析

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中华血液学杂志 2017年第2期38卷 153-156页

作者：何裕杜欣翁建宇邓程新耿素霞陆泽生李敏明廖鹏军罗成伟吴穗晶钟立业广东省人民医院广东省医学科学院广州510080

细胞遗传学异常是髓性恶性肿瘤最常见的分子事件，且在疾病的发病、诊断及预后分析等方面起着关键作用。在初诊成人原发性骨髓增生异常综合征（MDS）中染色体异常占50％-60％，在继发性MDS中高达80％。del（5q）在MDS中最常见，占10％-1... 详细信息

细胞遗传学异常是髓性恶性肿瘤最常见的分子事件，且在疾病的发病、诊断及预后分析等方面起着关键作用。在初诊成人原发性骨髓增生异常综合征（MDS）中染色体异常占50％-60％，在继发性MDS中高达80％。del（5q）在MDS中最常见，占10％-15％。5q31-5q33为其主要缺失区域，

关键词：原发性骨髓增生异常综合征临床分析细胞遗传学异常染色体异常分子事件恶性肿瘤预后分析 MDS