γ干扰素联合脂多糖诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化

作     者：黄恬 黄欣 赖沛龙 耿素霞 陈晓梅 王玉连 郭礼妍 曾高淳 韩凤珍 李晓红 杜欣 翁建宇 Huang Tian;Huang Xin;Lai Peilong;Geng Suxia;Chen Xiaomei;Wang Yulian;Guo Liyan;Zeng Gaochun;Han Fengzhen;Li Xiaohong;Du Xin;Weng Jianyu

作者机构：华南理工大学医学院广东省广州市510006 广东省人民医院血液科广东省医学科学院广东省广州市510080 广东省人民医院产科广东省医学科学院广东省广州市510080 广东省人民医院医学研究中心广东省医学科学院广东省广州市510080 

出 版 物：《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2020年第24卷第13期

页      面：2020-2027页

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100102[医学-免疫学] 100215[医学-康复医学与理疗学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81671585 81370665) 项目负责人:翁建宇~~ 

主　　题：人脐带间充质干细胞 γ干扰素 脂多糖 调节性T细胞 Toll样受体 

摘      要：背景:间充质干细胞的免疫调节特性已被临床广泛应用于自身免疫性疾病和移植物抗宿主病,但是其免疫调节的可塑性导致间充质干细胞临床治疗效果出现异质性和不稳定性。目的:探索γ干扰素联合脂多糖模拟炎症微环境诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化的作用。方法:体外分离培养人脐带间充质干细胞,进行形态学、表面标志物、成脂及成骨诱导分化能力鉴定。分别用γ干扰素(10μg/L)、脂多糖(100μg/L)及二者联合刺激人脐带间充质干细胞24h,与植物凝集素刺激的外周血单个核细胞直接共培养或Transwell间接共培养5 d。流式细胞术检测共培养不同时间点调节性T细胞和Th1细胞比例,荧光定量PCR检测人脐带间充质干细胞的Toll样受体2,3,4 mRNA表达水平。结果与结论:①人脐带间充质干细胞呈梭形或成纤维形,高表达CD73、CD90、CD105,低表达CD34、CD45、HLA-DR;②在直接与间接共培养条件下,γ干扰素联合脂多糖刺激人脐带间充质干细胞均可增加调节性T细胞的比例,优于γ干扰素或脂多糖单独刺激组、未刺激组及外周血单个核细胞对照组(P 0.05);③Th1细胞比例随共培养时间的延长呈逐渐下降的趋势;④在间接共培养的条件下,γ干扰素联合脂多糖刺激人脐带间充质干细胞更早向免疫抑制型MSC2极化,Toll样受体3表达显著增高(P 0.05);⑤以上结果表明间接共培养体系下γ干扰素(10μg/L)联合脂多糖(100μg/L)是诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化的高效组合,并且MSC2的免疫抑制作用不依赖于细胞间的直接接触,为MSC2来源外泌体将来应用于临床研究奠定实验基础。