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大鼠脑微血管周细胞的分离和鉴定

国际脑血管病杂志 2011年第7期19卷 531-534页

作者：秦伟伟鹿文葆刘淑英李宏伟修瑞娟中国医学科学院北京协和医学院微循环研究所北京100005

目的探讨大鼠脑微血管周细胞的分离、培养和鉴定方法。方法10只3周龄Wistar大鼠，无菌分离脑组织，采用2次酶消化和1次密度梯度离心法分离脑微血管片段，接种于35mm培养皿进行原代培养。采用相差显微镜观察细胞形态，免疫荧光法鉴定α-... 详细信息

目的探讨大鼠脑微血管周细胞的分离、培养和鉴定方法。方法10只3周龄Wistar大鼠，无菌分离脑组织，采用2次酶消化和1次密度梯度离心法分离脑微血管片段，接种于35mm培养皿进行原代培养。采用相差显微镜观察细胞形态，免疫荧光法鉴定α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、神经元-胶质抗原2（neuron—glial antigen2，NG2）、von Winebrand因子（von Willebrand factor，vWF）和胶质纤维酸性蛋白（giial fibrillary acidic protein，GFAP）相关抗原，甲基噻唑基四唑法测定细胞生长曲线。结果周细胞从贴壁的脑微血管片段周围爬出，呈多角性，12～14d后细胞融合95％。免疫荧光染色显示，周细胞分子标志物仪一SMA和NG2相关抗原呈双阳性，vWF和GFAP相关抗原呈双阴性，证实培养细胞为脑微血管周细胞。原代细胞初始生长速度较慢，传代细胞36～60h进入对数生长期，72～108h进入平台期。结论该方法能成功分离出纯度较高的大鼠脑微血管周细胞。

关键词：周细胞血脑屏障细胞分离细胞培养技术大鼠

ATR-UV光谱法分析亚硫酸盐废液中的生物抑制剂

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广西大学学报（自然科学版） 2011年第5期36卷 808-814页

作者：秦薇薇付时雨刘浩詹怀宇柴欣生华南理工大学制浆造纸工程国家重点实验室轻工与食品学院广东广州510640

酸性亚硫酸盐处理木质纤维素产生的废液含有木素磺酸盐、糠醛和羟甲基糠醛(HMF)等生物抑制剂,快速、同步测定这些物质对于生物质精炼具有重要意义。本文建立了衰减全反射(ATR)-UV光谱法用以快速、同步测定亚硫酸盐废液中三种生物抑制剂... 详细信息

酸性亚硫酸盐处理木质纤维素产生的废液含有木素磺酸盐、糠醛和羟甲基糠醛(HMF)等生物抑制剂,快速、同步测定这些物质对于生物质精炼具有重要意义。本文建立了衰减全反射(ATR)-UV光谱法用以快速、同步测定亚硫酸盐废液中三种生物抑制剂的浓度。使用单波长和双波长校正可以测定木素磺酸盐的浓度,这两种方法得到的数据非常接近。由于受到HSO3-和SO32-离子的干扰,总糠醛物质的浓度需用双波长校正才能获得;而糠醛和HMF各自的浓度则需要三波长校正方能获得。ATR-UV光谱法用于桉木亚硫酸盐预处理废液分析的结果表明,50%的木素磺酸盐和30%的糠醛类物质在预处理升温阶段即已生成。因此,本方法在生物质预处理的过程控制中有潜在的应用价值。

关键词：衰减全反射(ATR)-UV光谱法亚硫酸盐预处理木素磺酸盐糠醛

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米糠多糖脱蛋白工艺的研究

中国食品添加剂 2014年第1期25卷 183-187页

作者：秦微微金婷宋学东丁振铎张衡黑龙江生态工程职业学院哈尔滨150025 枣庄学院生命科学系枣庄277160 哈尔滨市农业信息中心哈尔滨150021

米糠多糖存在于稻谷颖果皮层中,在提取过程中,常混有一定量的蛋白质,影响多糖的纯度。本文比较了Sevag法、三氯乙酸法、酶法、酶-Sevag法及酶-TCA法对米糠多糖脱蛋白的效果。在单因素试验基础上,通过蛋白质脱除率和多糖损失率的比较得出... 详细信息

米糠多糖存在于稻谷颖果皮层中,在提取过程中,常混有一定量的蛋白质,影响多糖的纯度。本文比较了Sevag法、三氯乙酸法、酶法、酶-Sevag法及酶-TCA法对米糠多糖脱蛋白的效果。在单因素试验基础上,通过蛋白质脱除率和多糖损失率的比较得出酶-Sevag法效果优于其它方法。选取酶的添加量、pH值、Sevag试剂添加量、脱蛋白次数为四因素,各取三个水平,以蛋白质脱除率和多糖损失率为指标,做L9(34)正交实验确定酶-Sevag法的最佳脱蛋白工艺。结果显示:最佳工艺为酶的添加量为2.0%,pH为6.0,Sevag试剂用量为1/6糖液体积,脱蛋白次数为1次,在此条件下蛋白质脱除率可达76.89%,多糖损失率仅为13.45%。因此,酶-Sevag法是一种有效的米糠多糖脱蛋白方法,本文可为米糠多糖的开发提供参考。

关键词：米糠多糖蛋白脱除率多糖损失率

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双水相萃取米糠多糖工艺条件的探究

中国调味品 2014年第3期39卷 54-58页

作者：秦微微金婷宋学东丁振铎张衡黑龙江生态工程职业学院哈尔滨150025 枣庄学院生命科学系山东枣庄277160 哈尔滨市农业信息中心哈尔滨150021

旨在探究聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取米糠中多糖成分的最佳条件。以双水相系统的相比、分配系数、收率等为参数,探究了PEG的相对分子质量、PEG的质量分数以及硫酸铵质量分数对米糠多糖在两相系统中的分配行为的影响。结果表明:萃取... 详细信息

旨在探究聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取米糠中多糖成分的最佳条件。以双水相系统的相比、分配系数、收率等为参数,探究了PEG的相对分子质量、PEG的质量分数以及硫酸铵质量分数对米糠多糖在两相系统中的分配行为的影响。结果表明:萃取最佳条件为PEG分子量为6000,硫酸铵质量分数为14.8%,PEG 6000质量分数为14.3%,多糖得率为0.826388。

关键词：双水相米糠多糖硫酸铵

人源抗HER2单链抗体/轻链恒定区/鱼精蛋白截短体融合蛋白的基因构建、表达及活性鉴定

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第四军医大学学报 2007年第7期28卷 581-584页

作者：王凯温伟红王涛张瑞秦炜炜雷小英杨安钢第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室陕西西安710033 第四军医大学基础部免疫学教研室陕西西安710033

目的:构建人抗HER2单链抗体(ScFv)/人轻链恒定区(Ck)/鱼精蛋白截短体(tP)融合蛋白基因,在大肠杆菌中表达、纯化并分析该融合蛋白的活性.方法:设计引物扩增人抗HER2单链抗体e23sFv基因和轻链恒定区编码序列(Ck),连接成ScFv/Ck片段,人工合... 详细信息

目的:构建人抗HER2单链抗体(ScFv)/人轻链恒定区(Ck)/鱼精蛋白截短体(tP)融合蛋白基因,在大肠杆菌中表达、纯化并分析该融合蛋白的活性.方法:设计引物扩增人抗HER2单链抗体e23sFv基因和轻链恒定区编码序列(Ck),连接成ScFv/Ck片段,人工合成tP序列,连接于ScFv/Ck末端,构建成ScFv/Ck/tP融合基因,将其克隆入原核表达载体pET32a后,在大肠杆菌BL21(DE3)LysS中诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western Blot鉴定后,用Ni-NTA螯合层析介质纯化.细胞ELISA分析ScFv/Ck/tP融合蛋白抗原亲合活性,凝胶迁移实验检测ScFv/Ck/tP融合蛋白与DNA的结合活性.结果:成功构建了人抗HER2ScFv/Ck/tP融合基因,经IPTG诱导后在大肠杆菌中实现了可溶性表达.表达的ScFv/Ck/tP融合蛋白保持了与抗原的结合活性,同时具有结合DNA的能力.结论:ScFv与Ck,tP融合后,同时具有抗原和DNA结合活性,为该ScFv用于HER2阳性肿瘤的靶向基因治疗奠定了基础.

关键词：人源抗HER2单链抗体轻链恒定区鱼精蛋白基因构建活性鉴定

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金属有机骨架在色谱吸附和分离中的应用进展

四川环境 2019年第1期38卷 144-149页

作者：秦伟伟主曦曦西南交通大学地球科学与环境工程学院成都611756 山东科技大学化学与环境工程学院山东青岛266590

金属有机骨架材料(Metal-organic frameworks, MOFs)是一种大约20年前新兴起的、目前最年轻的多孔复合材料。由于其出色的物理和化学特性, MOFs已被广泛应用于多种领域。色谱技术作为一种重要的分析和分离方法,在环境监测分析和污染治... 详细信息

金属有机骨架材料(Metal-organic frameworks, MOFs)是一种大约20年前新兴起的、目前最年轻的多孔复合材料。由于其出色的物理和化学特性, MOFs已被广泛应用于多种领域。色谱技术作为一种重要的分析和分离方法,在环境监测分析和污染治理中起着重要的作用。着重介绍了MOFs在色谱技术中的应用,包括气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)及毛细管电色谱(CEC)等。除了MOFs在色谱领域取得的重要影响,也探讨了MOFs作为色谱材料,与传统色谱材料相比所具有的诸多应用前景及局限,以期为将来MOFs的理论和色谱应用研究提供指导。

关键词：金属有机骨架气相色谱高效液相色谱毛细管电色谱吸附分离

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高校创业教育创新模式研究

黑龙江教育学院学报 2016年第4期35卷 7-9页

作者：秦蔚蔚谢鑫建江苏经贸职业技术学院南京211168

国家鼓励高校加大力度投入创业教育事业,各高校积极响应国家政策号召,创业教育整体状态良好,但仍有很多不足之处,有待创新改进。创业教育模式改革,可从加强师生创业教育理念的变革,实现创业教育大众化、普及化;充分利用地域特征优势,共... 详细信息

国家鼓励高校加大力度投入创业教育事业,各高校积极响应国家政策号召,创业教育整体状态良好,但仍有很多不足之处,有待创新改进。创业教育模式改革,可从加强师生创业教育理念的变革,实现创业教育大众化、普及化;充分利用地域特征优势,共建公共服务平台;科学合理建设各高校创业教育教学体系;增强创业教育师资队伍力量,强化师资内涵深度等几方面着手进行,力求符合时代特征,符合人才综合发展要求,培养具有创新意识、创业能力的高素质人才。

关键词：创业教育创新模式研究

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如何防范信用证方式下的风险

科技情报开发与经济 2005年第24期15卷 94-95页

作者：王爱萍秦玮玮大同煤矿集团公司忻州窑矿山西大同037003 大同煤矿集团公司外经贸处山西大同037003

根据信用证的特点,评述了信用证各方当事人(进口商、出口商、银行)所面临的风险,提出了必要的防范措施。

关键词：信用证进口商出口商银行风险防范

n-3多不饱和脂肪酸饮食对小鼠肥胖及相关细胞因子的影响

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食品科学 2010年第19期31卷 342-346页

作者：郑征葛银林薛美兰秦伟伟徐艳君侯琳青岛大学医学院生物化学与分子生物学教研室山东青岛266021

目的:研究n-3多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fat acids,PUFAs)饮食对小鼠肥胖程度及相关细胞因子血清水平的影响,探讨其作用机理。方法:将健康小鼠分为高饱和脂肪酸饮食组、n-3多不饱和脂肪酸饮食组和对照组,记录每周小鼠进食量和体质... 详细信息

目的:研究n-3多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fat acids,PUFAs)饮食对小鼠肥胖程度及相关细胞因子血清水平的影响,探讨其作用机理。方法:将健康小鼠分为高饱和脂肪酸饮食组、n-3多不饱和脂肪酸饮食组和对照组,记录每周小鼠进食量和体质量,实验结束时用ELISA法检测小鼠血清增食因子A(orexin-A)、抵抗素(resistin)、脂联素(adiponectin)水平。结果:n-3多不饱和脂肪酸饮食组小鼠与高饱和脂肪酸饮食组小鼠相比,肥胖程度明显降低(P<0.05),血清的增食因子A水平明显降低(P<0.05),血清的抵抗素水平明显升高(P<0.05),血清的脂联素水平升高但无统计学差异;n-3多不饱和脂肪酸饮食组小鼠的各项指标和对照组相比均无统计学差异。结论:n-3多不饱和脂肪酸饮食与饱和脂肪酸饮食相比,可抑制肥胖的发生和发展。

关键词： n-3多不饱和脂肪酸肥胖脂联素增食因子A 抵抗素