大鼠脑微血管周细胞的分离和鉴定
Isolation and identification brain microvessel pericytes in rats作者机构：中国医学科学院北京协和医学院微循环研究所北京100005
出 版 物：《国际脑血管病杂志》 (International Journal of Cerebrovascular Diseases)
年 卷 期：2011年第19卷第7期
页 面：531-534页
学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学]
摘 要：目的探讨大鼠脑微血管周细胞的分离、培养和鉴定方法。方法10只3周龄Wistar大鼠，无菌分离脑组织，采用2次酶消化和1次密度梯度离心法分离脑微血管片段，接种于35mm培养皿进行原代培养。采用相差显微镜观察细胞形态，免疫荧光法鉴定α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、神经元-胶质抗原2（neuron—glial antigen2，NG2）、von Winebrand因子（von Willebrand factor，vWF）和胶质纤维酸性蛋白（giial fibrillary acidic protein，GFAP）相关抗原，甲基噻唑基四唑法测定细胞生长曲线。结果周细胞从贴壁的脑微血管片段周围爬出，呈多角性，12～14d后细胞融合95％。免疫荧光染色显示，周细胞分子标志物仪一SMA和NG2相关抗原呈双阳性，vWF和GFAP相关抗原呈双阴性，证实培养细胞为脑微血管周细胞。原代细胞初始生长速度较慢，传代细胞36～60h进入对数生长期，72～108h进入平台期。结论该方法能成功分离出纯度较高的大鼠脑微血管周细胞。
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