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鸡源致病性大肠杆菌地方流行株外膜蛋白的制备及其免疫原性研究

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中国预防兽医学报 2019年第11期41卷 1141-1146页

作者：张艳英张召兴郭家媚李蕴玉李佩国索勋中国农业大学动物医学学院北京100094 河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室河北秦皇岛066004 河北旅游职业学院畜牧兽医系河北承德067000

为了分析鸡源致病性大肠杆菌地方流行株外膜蛋白(OMPs)免疫保护性,本研究采用Sarkosyl法提取10株鸡源致病性大肠杆菌地方流行株的OMPs,进行浓度测定和超微结构观察,经SDS-PAGE和western blot分析其免疫原性。结果显示,制备的OMPs浓度为1... 详细信息

为了分析鸡源致病性大肠杆菌地方流行株外膜蛋白(OMPs)免疫保护性,本研究采用Sarkosyl法提取10株鸡源致病性大肠杆菌地方流行株的OMPs,进行浓度测定和超微结构观察,经SDS-PAGE和western blot分析其免疫原性。结果显示,制备的OMPs浓度为1026.632μg/mL^1715.589μg/m L;电镜结果显示其超微结构呈双层泡状的C形或O形;SDS-PAGE分析显示其大小集中在25 ku^55 ku;动物免疫结果显示其具有一定的免疫原性。用提取的OMPs免疫小鼠和雏鸡后,以鸡源致病性大肠杆菌强毒株EC-9攻毒,结果显示:OMPs对小鼠和雏鸡均具有较好保护力,对小鼠保护率为70%,对鸡的保护率为80%;间接EILSA法检测免疫小鼠后的抗体效价最高为1:400,免疫雏鸡后抗体效价最高为1∶800;MTT法检测免疫小鼠后的T淋巴细胞转化率最高为1.582,免疫雏鸡后的T淋巴细胞转化率最高为2.215;常规法分析免疫小鼠脾脏指数为5.334,雏鸡脾脏指数为3.981,表明OMPs可以诱导小鼠和雏鸡产生良好的体液免疫应答和细胞免疫应答。本研究提取的鸡源致病性大肠杆菌地方流行株Omps对小鼠和雏鸡均具有一定的免疫保护性,为致病性大肠杆菌的亚单位疫苗的研制奠定基础。

关键词：鸡致病性大肠杆菌外膜蛋白制备免疫原性

金钗石斛农艺性状与品质指标的相关性分析及育种应用

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中国中药杂志 2021年第13期46卷 3330-3336页

作者：饶丹郑世刚赵庭梅颜寿胡亚东赵若茜李红杰王钦古良云淳泽中国科学院山地生态恢复与生物资源利用重点实验室生态恢复与生物多样性保育四川省重点实验室中国科学院成都生物研究所四川成都610041 中国科学院大学生命科学学院北京100049 广元市恒昌生物科技有限责任公司四川广元628003 四川联华农业科技开发有限公司四川自贡643000 中国科学院种子创新研究院北京100101

为了探讨金钗石斛农艺性状与品质指标的相关性及在农业育种等方面的应用价值,广泛收集了道地产区合江-赤水一带的金钗石斛栽培品系,对主要农艺性状和品质指标进行测定,通过相关性分析筛选与品质指标显著关联的农艺性状,根据关联性状筛... 详细信息

为了探讨金钗石斛农艺性状与品质指标的相关性及在农业育种等方面的应用价值,广泛收集了道地产区合江-赤水一带的金钗石斛栽培品系,对主要农艺性状和品质指标进行测定,通过相关性分析筛选与品质指标显著关联的农艺性状,根据关联性状筛选亲本品系和自交F_(1)代材料进一步验证。结果表明96份金钗石斛各品系间,可溶性多糖含量与石斛碱含量之间存在极显著负相关性(P0.9);根据茎宽厚比这一特征性状筛选出2个差异显著的品系JC-10和JC-35(P<0.05),其分别自花授粉获得的F_(1)代植株也显示茎宽厚比越大,石斛碱含量越高(P<0.01)。以上实验结果均表明在一定范围内,金钗石斛的茎越扁,其石斛碱含量相对越高。因此,在金钗石斛新品种选育过程中,可以结合这一特征性状筛选石斛碱等品质指标突出的材料。

关键词：金钗石斛扁圆柱形茎宽厚比多糖石斛碱育种

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哺乳动物青毛色相关基因研究进展

中国畜牧杂志 2023年第9期59卷 6-10页

作者：李媛媛毕晓昆赵春江中国农业大学动物科学技术学院北京100193 中国农业大学马研究中心北京100193

青毛色是哺乳动物中广泛存在的毛色,它既是品种特征性状,有时也与其他重要性状密切相关。本文介绍了哺乳动物青毛色的定义,阐述了马、小鼠、牛、羊、驴、狗、兔等常见哺乳动物青毛色基因的研究进展,并指明了该领域尚需进一步研究的问题... 详细信息

青毛色是哺乳动物中广泛存在的毛色,它既是品种特征性状,有时也与其他重要性状密切相关。本文介绍了哺乳动物青毛色的定义,阐述了马、小鼠、牛、羊、驴、狗、兔等常见哺乳动物青毛色基因的研究进展,并指明了该领域尚需进一步研究的问题,以期为哺乳动物青毛色遗传机制的深入研究和该毛色相关的选种选育提供参考依据。

关键词：哺乳动物青毛色青毛相关基因

基于Shannon-Cosine小波精细积分法的壁画降噪修复方法

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浙江大学学报（理学版） 2019年第3期46卷 279-287页

作者：李丽高若婉梅树立赵海英中国农业大学信息与电气工程学院北京100083 北京邮电大学世纪学院北京102613

为修复受破损且噪声点众多的壁画图像,提出了用偏微分方程(partial differential equation,PDE)扩散的方法对图像进行降噪修复。针对PDE法求解精度较低的问题,提出了一种Shannon-Cosine小波精细积分法,运用小波数值方法对偏微分方程进... 详细信息

为修复受破损且噪声点众多的壁画图像,提出了用偏微分方程(partial differential equation,PDE)扩散的方法对图像进行降噪修复。针对PDE法求解精度较低的问题,提出了一种Shannon-Cosine小波精细积分法,运用小波数值方法对偏微分方程进行离散处理,降低其方程组规模,并采用精细积分法求解,有效提高了计算速度。试验结果表明,采用该算法对受损壁画降噪处理后,视觉上,图像边界更清晰,且噪声点得到有效减少,达到了保边降噪的效果,更符合人眼的视觉效果;客观上,与中值滤波、均值滤波和维纳滤波方法相比,采用本算法处理后的图像其PSNR值和SSIM值均最大。因此,运用Shannon-Cosine小波精细积分法求解图像的PDE模型是可行的,取得了较好的图像降噪效果。

关键词：壁画降噪小波精细积分法偏微分方程

猪NLRC5基因启动子克隆及生物信息学分析

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黑龙江畜牧兽医 2021年第13期 1-5,143页

作者：刘翔尹灵丹薛美李亮赵立媛蒋成凡王文哲冯力刘平黄中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150069 中国农业大学动物医学院北京100193

为了构建猪NLR家族含CARD结构域5(NOD-like receptor family caspase recruitment domain family domain-containing 5,NLRC5)基因启动子双荧光素酶报告质粒,确认其活性,进而探索其转录调控机制,试验采用PCR方法从猪睾丸细胞(swine testicular cell,ST细胞)中扩增出猪NLRC5基因启动子,将其与pGL3-Basic载体连接,测序正确后将猪NLRC5基因启动子双荧光素酶报告质粒转染至ST细胞中,通过双荧光素酶报告检测试剂盒检测荧光素酶的表达活性,并使用生物信息学软件预测该基因启动子区域的CpG岛、调控元件及转录因子结合位点。结果表明:试验成功构建猪NLRC5基因启动子双荧光素酶报告质粒,该质粒的相对荧光素酶活性极显著高于pGL3-Basic载体(P<0.01)。NLRC5基因启动子区域中存在2个CpG岛,TATA box、CCAAT box和GC box等多种调控元件,以及IRF1、IRF3、STAT1、STAT3、STAT4和NF-κB转录因子结合位点。说明猪NLRC5基因的表达可能受甲基化的影响,同时也可能受顺式作用元件以及干扰素和NF-κB相关转录因子的调控。

关键词：启动子质粒双荧光素酶 NLR家族含CARD结构域5(NLRC5)基因启动子调控元件转录因子结合位点生物信息学

苦荞转录因子FtNAC11的克隆及其功能分析

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植物遗传资源学报 2021年第5期22卷 1430-1441页

作者：杨迪张凯旋赵辉伍小方杨克理周美亮张金林兰州大学草地农业科技学院/草地农业生态系统国家重点实验室兰州730000 中国农业科学院作物科学研究所北京100081

NAC(NAM、ATAF1/2、CUC2)转录因子在植物响应非生物胁迫中发挥着重要的作用。本研究以苦荞品苦1号为材料,从中克隆得到FtNAC11基因。其cDNA全长为774 bp,编码257个氨基酸,分子量为28954.58 Da,等电点为5.91。氨基酸序列比对和系统进化... 详细信息

NAC(NAM、ATAF1/2、CUC2)转录因子在植物响应非生物胁迫中发挥着重要的作用。本研究以苦荞品苦1号为材料,从中克隆得到FtNAC11基因。其cDNA全长为774 bp,编码257个氨基酸,分子量为28954.58 Da,等电点为5.91。氨基酸序列比对和系统进化树分析表明,FtNAC11与拟南芥AtNAC61有较高的同源性。qRT-PCR显示FtNAC11在苦荞中的表达受NaCl和PEG的诱导。转录激活活性分析表明,FtNAC11的C末端具有转录激活活性。亚细胞定位显示,该基因定位于细胞核中。利用根癌农杆菌介导法将FtNAC11基因转入拟南芥,过表达FtNAC11基因显著提高了拟南芥植株的耐盐性和抗旱性。以上结果表明,FtNAC11参与苦荞非生物胁迫适应过程,为进一步研究FtNAC11调控苦荞抗旱和耐盐的分子机制奠定了前期工作基础。

关键词：苦荞 NAC11 克隆功能分析抗旱耐盐

FtMYB1转录因子调控苦荞毛状根黄酮醇合成的机理研究

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植物遗传资源学报 2020年第5期21卷 1270-1278页

作者：伍小方高国应左倩赵辉张凯旋严明理周美亮湖南科技大学生命科学学院湘潭411201 中国农业科学院作物科学研究所北京100081 湖南科技大学经济作物遗传改良与综合利用湖南省重点实验室湘潭411201

R2R3-MYB转录因子在植物类黄酮合成中起重要的调控作用。本研究从川荞1号中克隆获得一个R2R3-MYB家族基因FtMYB1,酵母转录激活分析显示其具有转录激活活性,激素处理下的表达模式分析显示,FtMYB1基因能够被茉莉酸甲酯(MeJA)和脱落酸(ABA... 详细信息

R2R3-MYB转录因子在植物类黄酮合成中起重要的调控作用。本研究从川荞1号中克隆获得一个R2R3-MYB家族基因FtMYB1,酵母转录激活分析显示其具有转录激活活性,激素处理下的表达模式分析显示,FtMYB1基因能够被茉莉酸甲酯(MeJA)和脱落酸(ABA)诱导表达。在苦荞毛状根中过表达FtMYB1基因,结果表明转基因毛状根株系中总黄酮和芦丁含量显著低于野生型,且在黄酮醇合成途径下游分别编码黄酮醇合酶(FLS)和鼠李糖基转移酶(RT)的FLS和RT1基因表达量在转基因株系中显著降低,表明FtMYB1可能通过调控FLS和RT1的表达来抑制黄酮醇的生物合成。

关键词： R2R3-MYB转录因子黄酮醇苦荞毛状根

土壤污染及乳酸菌添加对紫花苜蓿青贮品质的影响

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中国草地学报 2021年第8期43卷 114-120页

作者：孙娟娟赵金梅薛艳林刘洪林李薇玉柱白春生中国农业科学院草原研究所内蒙古呼和浩特010010 内蒙古自治区农牧业科学院内蒙古呼和浩特010031 中国农业大学草业科学与技术学院北京100193 沈阳农业大学辽宁沈阳110866

以不添加土壤和乳酸菌为对照,设土壤添加、乳酸菌添加及土壤与乳酸菌混合添加处理,在室温罐贮条件下测定贮藏第7d、14d、28d和49d的pH值、发霉率以及贮藏49d青贮微生物数量、营养成分和发酵品质,分析土壤污染和乳酸菌添加对紫花苜蓿青... 详细信息

以不添加土壤和乳酸菌为对照,设土壤添加、乳酸菌添加及土壤与乳酸菌混合添加处理,在室温罐贮条件下测定贮藏第7d、14d、28d和49d的pH值、发霉率以及贮藏49d青贮微生物数量、营养成分和发酵品质,分析土壤污染和乳酸菌添加对紫花苜蓿青贮的影响。结果表明,土壤添加处理苜蓿青贮饲料的pH值和发霉率从青贮14d开始显著高于对照(P<0.05),青贮49d时大肠杆菌数是对照的10倍以上(P<0.05),粗蛋白含量比对照降低了10.6%(P<0.05),灰分含量比对照增加了62.9%(P<0.05);土壤与乳酸菌混合添加青贮14d时的pH值显著低于对照和土壤添加处理(P<0.05),青贮28d才有少量的发霉现象,中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量显著降低(P<0.05),霉菌与酵母菌数量约为对照的1/10(P<0.05),大肠杆菌数量约为对照的1/100(P<0.05);表明土壤污染导致紫花苜蓿青贮饲料发霉率增加,发酵品质和粗蛋白含量降低,增加了灰分含量,而乳酸菌添加能够有效抑制被土壤污染的苜蓿青贮饲料的不良微生物数量,降低发霉率,减少了土壤污染对苜蓿青贮造成的损失。

关键词：土壤污染紫花苜蓿乳酸菌添加剂发霉率微生物数量

猫传染性腹膜炎病毒S1蛋白的截短表达及其单克隆抗体的研制

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中国兽医科学 2022年第9期52卷 1137-1143页

作者：赵辉杜吉革李启红勾倩倩黄金龙刘妍赵洋杨海燕印春生张传美青岛农业大学动物医学院山东青岛266109 中国兽医药品监察所北京100081

为制备猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)S1蛋白的单克隆抗体,本研究通过大肠杆菌表达系统截短表达了FIPV S1蛋白(rS1)并进行纯化,以rS1免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合和间接EliSA方法筛选到3株能稳定分泌针对rS1抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2D7... 详细信息

为制备猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)S1蛋白的单克隆抗体,本研究通过大肠杆菌表达系统截短表达了FIPV S1蛋白(rS1)并进行纯化,以rS1免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合和间接EliSA方法筛选到3株能稳定分泌针对rS1抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2D7、3D8、5G1。抗体亚型鉴定结果表明,2D7、5G1株抗体亚型为Ig G2a,3D8株抗体亚型为Ig G1,轻链均为κappa链;杂交瘤细胞染色体组型鉴定结果显示,3株杂交瘤细胞染色体数分别为102、103、100条,属于杂交瘤染色体组型;小鼠腹水的间接EliSA抗体效价可达1∶204800。对小鼠腹水进行单克隆抗体纯化和鉴定,Western-blot结果显示,3株单克隆抗体均可与rS1发生特异性反应;IFA结果显示,3株单克隆抗体均能特异性识别细胞中的FIPV。上述结果表明,本研究获得了3株性能良好的抗rS1的单克隆抗体,为后期FIPV的早期诊断以及FIPV生物学功能的研究奠定了重要的物质基础。

关键词：猫传染性腹膜炎病毒 S1蛋白原核表达单克隆抗体