鸡源致病性大肠杆菌地方流行株外膜蛋白的制备及其免疫原性研究

作     者：张艳英 张召兴 郭家媚 李蕴玉 李佩国 索勋 ZHANG Yan-ying;ZHANG Zhao-xing;GUO Jia-mei;LI Yun-yu;LI Pei-guo;SUO Xun

作者机构：中国农业大学动物医学学院北京100094 河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室河北秦皇岛066004 河北旅游职业学院畜牧兽医系河北承德067000 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2019年第41卷第11期

页      面：1141-1146页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：河北省现代农业产业技术体系蛋鸡产业创新团队岗位资助项目(HBCT2018150206) 河北省高等院校科学技术研究项目(QN20131123,ZD2019092) 

主　　题：鸡 致病性大肠杆菌 外膜蛋白制备 免疫原性 

摘      要：为了分析鸡源致病性大肠杆菌地方流行株外膜蛋白(OMPs)免疫保护性,本研究采用Sarkosyl法提取10株鸡源致病性大肠杆菌地方流行株的OMPs,进行浓度测定和超微结构观察,经SDS-PAGE和western blot分析其免疫原性。结果显示,制备的OMPs浓度为1026.632μg/mL^1715.589μg/m L;电镜结果显示其超微结构呈双层泡状的C形或O形;SDS-PAGE分析显示其大小集中在25 ku^55 ku;动物免疫结果显示其具有一定的免疫原性。用提取的OMPs免疫小鼠和雏鸡后,以鸡源致病性大肠杆菌强毒株EC-9攻毒,结果显示:OMPs对小鼠和雏鸡均具有较好保护力,对小鼠保护率为70%,对鸡的保护率为80%;间接EILSA法检测免疫小鼠后的抗体效价最高为1:400,免疫雏鸡后抗体效价最高为1∶800;MTT法检测免疫小鼠后的T淋巴细胞转化率最高为1.582,免疫雏鸡后的T淋巴细胞转化率最高为2.215;常规法分析免疫小鼠脾脏指数为5.334,雏鸡脾脏指数为3.981,表明OMPs可以诱导小鼠和雏鸡产生良好的体液免疫应答和细胞免疫应答。本研究提取的鸡源致病性大肠杆菌地方流行株Omps对小鼠和雏鸡均具有一定的免疫保护性,为致病性大肠杆菌的亚单位疫苗的研制奠定基础。