猫传染性腹膜炎病毒S1蛋白的截短表达及其单克隆抗体的研制

作     者：赵辉 杜吉革 李启红 勾倩倩 黄金龙 刘妍 赵洋 杨海燕 印春生 张传美 ZHAO Hui;DU Ji-ge;LI Qi-hong;GOU Qian-qian;HUANG Jin-long;LIU Yan;ZHAO Yang;YANG Hai-yan;YIN Chun-sheng;ZHANG Chuan-mei

作者机构：青岛农业大学动物医学院山东青岛266109 中国兽医药品监察所北京100081 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2022年第52卷第9期

页      面：1137-1143页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：中国兽医药品监察所“兽药行业公益性重点专项”(GY202005) 

主　　题：猫传染性腹膜炎病毒 S1蛋白 原核表达 单克隆抗体 

摘      要：为制备猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)S1蛋白的单克隆抗体,本研究通过大肠杆菌表达系统截短表达了FIPV S1蛋白(rS1)并进行纯化,以rS1免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合和间接ELISA方法筛选到3株能稳定分泌针对rS1抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2D7、3D8、5G1。抗体亚型鉴定结果表明,2D7、5G1株抗体亚型为Ig G2a,3D8株抗体亚型为Ig G1,轻链均为κappa链;杂交瘤细胞染色体组型鉴定结果显示,3株杂交瘤细胞染色体数分别为102、103、100条,属于杂交瘤染色体组型;小鼠腹水的间接ELISA抗体效价可达1∶204800。对小鼠腹水进行单克隆抗体纯化和鉴定,Western-blot结果显示,3株单克隆抗体均可与rS1发生特异性反应;IFA结果显示,3株单克隆抗体均能特异性识别细胞中的FIPV。上述结果表明,本研究获得了3株性能良好的抗rS1的单克隆抗体,为后期FIPV的早期诊断以及FIPV生物学功能的研究奠定了重要的物质基础。