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Nephstar Plus特定蛋白分析仪测定超敏C反应蛋白性能评价

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国际检验医学杂志 2013年第14期34卷 1870-1871页

作者：吴跃平曹科王丹王荣君马东礼深圳市儿童医院检验科广东深圳518026

目的了解Nephstar Plus特定蛋白分析仪测定超敏C反应蛋白(hs-CRP)的性能特点。方法对Nephstar Plus特定蛋白分析仪检测系统测定hs-CRP的精密度、正确度、线性、干扰等性能指标进行测试。结果重复性与稳定性:Nephstar Plus特定蛋白分析... 详细信息

目的了解Nephstar Plus特定蛋白分析仪测定超敏C反应蛋白(hs-CRP)的性能特点。方法对Nephstar Plus特定蛋白分析仪检测系统测定hs-CRP的精密度、正确度、线性、干扰等性能指标进行测试。结果重复性与稳定性:Nephstar Plus特定蛋白分析仪测定hs-CRP的批内精密度在浓度为2.54、53.38、134mg/L时的变异系数(CV)分别为6.61%、3.83%、2.31%;批间精密度在hs-CRP浓度为30.31、45.17mg/L的CV分别为7.51%、6.14%。正确度:Nephstar Plus测定结果与IMMAGE全自动免疫分析仪比较,回归方程为Y=0.941 7 X-0.942 6,r=0.987,在3个医学决定水平浓度的相对偏差分别为15.3%、7.7%、6.8%。线性:在hs-CRP 2.18～194.85mg/L范围内,经过测定6个浓度梯度的样品,测定值和理论值直线回归方程为Y=1.047 9 X-1.832 6,r2=0.992 7。干扰:通过测试黄疸和脂血标本,胆红素达30mg/dL、三酰甘油1.5mmol/L偏差分别为8.8%、-4.8%。结论 Nephstar Plus特定蛋白分析仪测定hs-CRP的主要分析性能基本满足临床需要。

关键词： C反应蛋白质精密度正确度线性干扰

儿童急性B淋巴细胞白血病CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞亚群改变及意义

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中华微生物学和免疫学杂志 2014年第3期34卷 194-199页

作者：王缨王国兵文飞球肖海荣李长钢麦惠容刘四喜袁秀丽马东礼深圳市儿童医院血液肿瘤科 518026 深圳市儿童医院儿科研究所

目的：探讨急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患儿CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞（ Treg）亚群改变及其在B-ALL免疫逃逸机制中的作用。方法急性期B-ALL患儿42例，正常同年龄对照组28例，分别于化疗前直接取血备检。采用流式细胞检测外周... 详细信息

目的：探讨急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患儿CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞（ Treg）亚群改变及其在B-ALL免疫逃逸机制中的作用。方法急性期B-ALL患儿42例，正常同年龄对照组28例，分别于化疗前直接取血备检。采用流式细胞检测外周血CD4＋CD25 high Foxp3＋、CD4＋CD25high ICOS＋Foxp3＋、CD4＋CD25high ICOS-Foxp3＋细胞比例及IL-10、TGF-β、IL-35、TGF-βRII、ICOS、CD28蛋白表达水平；荧光定量PCR （ real-time PCR）检测CD4＋T细胞Smad3/4、TIEG1、Itch等mRNA表达；ELISA检测血浆中TGF-β浓度。结果（1）急性B-ALL患儿CD4＋CD25high Foxp3＋Treg细胞比例显著升高（P＜0．05），其中ICOS＋Foxp3＋和ICOS-Foxp3＋细胞比例均明显高于对照组（P＜0．05）， ICOS＋Foxp3＋/ICOS -Foxp3＋比值低于对照组（0．73±0．21 vs 1．87±0．59，P＜0．05）；（2）急性期B-ALL患儿ICOS＋Foxp3＋细胞转录因子Foxp3及抑制性细胞因子IL-10、IL-35和TGF-β表达水平显著上调（P＜0．05），ICOS-Foxp3＋细胞Foxp3表达略有增加，但差异无统计学意义（P＞0．05），其mTGF-β表达明显高于对照组（ P＜0．05）；（3）急性B-ALL患儿血浆TGF-β浓度明显高于对照组[（25.83±12．65） ng/ml vs （8．59±5．73） ng/ml， P＜0．05]，CD4＋T细胞表面TGF-βRII及下游信号分子Smad3/4、TIEG1、Itch表达水平显著上调（P＜0．05），CD4＋CD25highFoxp3＋Treg细胞表面ICOS、CD28表达亦明显增高（P＜0．05）。结论 TGF-β、ICOS、CD28信号过度活化可能是导致急性B-ALL患儿CD4＋CD25highFoxp3＋Treg细胞异常及其亚群比例失调的重要因素。

关键词：急性B淋巴细胞白血病调节性T细胞 Foxp3 ICOS CD28

胶体金渗滤法检测血清淀粉样蛋白A方法评价及其在儿童感染性疾病诊断中的应用

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中华检验医学杂志 2014年第11期37卷 836-841页

作者：杨红玲郑磊周才刘露马东礼张鹏梁绮华黄艳芬王前广州市妇女儿童医疗中心临床检验部 510515 南方医科大学南方医院检验医学中心广东省妇幼保健院检验科惠州市中心人民医院检验科深圳市儿童医院检验科

目的：评估国产胶体金渗滤法试剂盒（SAA-SPOT）检测血清淀粉样蛋白A（SAA）的分析性能，探讨SAA在儿童感染性疾病诊断中的临床应用价值。方法（1）按EP文件评估SAA-SPOT方法的分析性能。（2）采用横断面调查研究设计方法，在2014年3月... 详细信息

目的：评估国产胶体金渗滤法试剂盒（SAA-SPOT）检测血清淀粉样蛋白A（SAA）的分析性能，探讨SAA在儿童感染性疾病诊断中的临床应用价值。方法（1）按EP文件评估SAA-SPOT方法的分析性能。（2）采用横断面调查研究设计方法，在2014年3月至7月间随机抽取广东省5家三级甲等医院386例细菌感染患儿和219例病毒感染患儿为研究对象，收集患儿临床一般情况、诊疗信息，以及血SAA、C-反应蛋白（CRP）和白细胞（WBC）检测指标。数据采用方差分析、独立t检验、ROC曲线和逐步回归统计方法分析。结果（1） SAA-SPOT平均回收率为103.74％，10 mg／L和100 mg／L的批内变异系数（ CV）分别为8.77％和3.61％；批间CV分别为9.01％和3.74％；天间CV分别为9.07％和4.03％；线性范围5 mg／L～200 mg／L；5 g／L血红蛋白，800μmol／L胆红素和22 mmol／L甘油三酯对检测无干扰。与西门子BNPRO定量系统SAA检测结果比对相关系数R2＝0.96。（2）与对照组相比，感染组血清SAA（细菌感染t ＝13.05，P＝0.001；病毒感染组t＝7.68，P＝0.001）和SAA／CRP比值（细菌感染组t＝2.29，P＝0.023；病毒感染组t＝3.32，P＝0.01）均显著升高。（3）细菌感染组，SAA与CRP呈平行升高，病毒感染SAA也显著升高，但CRP无显著变化。（4） SAA、CRP和WBC三指标的联合方程对细菌感染和病毒感染的正确判断率分别为92.25％和85.28％，鉴别诊断效率优于SAA／CRP比值。结论国产SAA-SPOT胶体金法分析性能良好，作为即时检测项目能满足临床检测要求。 SAA与CRP和WBC联合检测可提高感染的诊断效率。 SAA作为新的感染指标可为儿童病毒与细菌感染的早期辅助诊断和鉴别诊断提供有用的参考信息。

关键词：感染 C反应蛋白质胶体金试剂盒,诊断

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甲状腺功能亢进患儿的血尿酸水平变化分析

检验医学与临床 2019年第4期16卷 526-528页

作者：姜含芳黄晶黄宝兴邓芳梅马东礼广东省深圳市儿童医院检验科 518038 蚌埠医学院医学检验系安徽蚌埠233030

目的分析甲状腺功能亢进(简称甲亢)患儿血尿酸水平的变化情况。方法 92例甲亢患儿纳入甲亢组,116例健康体检儿童纳入健康组。分别检测甲亢组(治疗前和治疗后)与健康组血清总甲状腺素、血清总三碘甲腺原氨酸、血清游离甲状腺素、血清游... 详细信息

目的分析甲状腺功能亢进(简称甲亢)患儿血尿酸水平的变化情况。方法 92例甲亢患儿纳入甲亢组,116例健康体检儿童纳入健康组。分别检测甲亢组(治疗前和治疗后)与健康组血清总甲状腺素、血清总三碘甲腺原氨酸、血清游离甲状腺素、血清游离三碘甲腺原氨酸、促甲状腺激素及尿酸水平。结果甲亢组与健康组的血尿酸水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。甲亢儿童治疗前后的甲状腺激素水平与血尿酸水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲亢患儿的血尿酸水平升高,应加强监测和控制甲亢患儿的血尿酸水平。

关键词：甲状腺功能亢进尿酸总甲状腺素总三碘甲腺原氨酸游离甲状腺素游离三碘甲腺原氨酸促甲状腺激素

深圳市15岁以下儿童HBV感染及抗体水平调查

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职业与健康 2013年第6期29卷 726-728页

作者：孙丽芳马东礼杨方华邓芳梅罗小娟广东省深圳市儿童医院检验科 518026

目的了解深圳市儿童乙型肝炎(以下简称乙肝)流行和乙肝疫苗接种状况,为制定和调整乙肝疫苗接种策略提供依据。方法采用时间分辨免疫荧光技术(TRFIA)对4 446名15岁以下儿童进行乙肝两对半定量检测,并对结果进行分析。结果 15岁以下儿童... 详细信息

目的了解深圳市儿童乙型肝炎(以下简称乙肝)流行和乙肝疫苗接种状况,为制定和调整乙肝疫苗接种策略提供依据。方法采用时间分辨免疫荧光技术(TRFIA)对4 446名15岁以下儿童进行乙肝两对半定量检测,并对结果进行分析。结果 15岁以下儿童乙肝表面抗原(HbsAg)阳性率为1.21%,其中男孩HBsAg阳性率为1.45%,女孩HBsAg阳性率为0.85%,差异没有统计学意义。HBsAg阳性率0～6岁组为0.85%,13～15岁组为4.80%,差异有统计学意义;乙肝表面抗体(HbsAb)阳性率(≥10 U/L)为85.43%,男孩HBsAb阳性率83.94%,女孩HBsAb阳性率88.42%,性别分布差异有统计学意义。HBsAb水平有随着年龄增加而下降的趋势,TRFIA定量分析抗HBsAb结果 100 U/L占52.61%。结论年龄越小HBsAg阳性率越低,说明近年该市的乙肝防治效果非常显著,定量测定HBsAb的浓度对于了解儿童对乙肝病毒(HBV)的免疫能力,评价全面免疫的接种效果,及时补种疫苗有重要意义,有47.39%的儿童HBsAb定量值低于100 U/L,需要补种或加强乙肝疫苗,推行乙肝疫苗加强免疫策略应该是今后乙肝防治工作的重点。

关键词：时间分辨免疫荧光技术乙型肝炎表面抗原乙型肝炎表面抗体儿童疫苗

XS-800i血细胞分析仪异常报警在儿科血液分析中的评价

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国际检验医学杂志 2009年第3期30卷 293-294页

作者：李德发曹科罗小娟王丹杨方华马东礼中国医科大学深圳儿童医院检验科深圳518026

目的评价XS-800i在儿科血液分析中白细胞分类异常报警的价值。方法采用显微镜人工分类与仪器分类对比。结果XS-800i五分类血细胞分析仪白细胞分类异常报警的敏感度为96.0%,特异性为68.5%,阳性预测值为83.3%,左移83.3%,原始细胞77.8%,异... 详细信息

目的评价XS-800i在儿科血液分析中白细胞分类异常报警的价值。方法采用显微镜人工分类与仪器分类对比。结果XS-800i五分类血细胞分析仪白细胞分类异常报警的敏感度为96.0%,特异性为68.5%,阳性预测值为83.3%,左移83.3%,原始细胞77.8%,异型淋巴细胞74.9%,有核红细胞73.9%,异淋69.2%。结论各实验室应根据显微镜人工分类与仪器分类对比结果制定出各自的复检标准,提高白细胞分类结果的准确性。

关键词：血细胞计数医院,儿科设备和供应

一步法多重RT-PCR对儿童急性淋巴细胞白血病常见融合基因的检测及意义

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中国当代儿科杂志 2015年第4期17卷 332-336页

作者：陈小文文飞球吕荣钰张民祖莹麦惠容王缨袁秀丽李长钢马东礼深圳市儿童医院儿科研究所广东深圳518038 深圳市儿童医院血液肿瘤科广东深圳518038

目的探讨一步法多重RT-PCR对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)常见4种融合基因的检测效果。方法 2003年1月至2010年12月确诊的ALL患儿76例,采集所有患儿骨髓标本,提取细胞总RNA,一步法多重RT-PCR或常规巢式PCR法对E2A/PBX1、MLL/AF4、BCR/AB... 详细信息

目的探讨一步法多重RT-PCR对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)常见4种融合基因的检测效果。方法 2003年1月至2010年12月确诊的ALL患儿76例,采集所有患儿骨髓标本,提取细胞总RNA,一步法多重RT-PCR或常规巢式PCR法对E2A/PBX1、MLL/AF4、BCR/ABL和TEL/AML1融合基因进行检测;DNA测序对PCR结果进行验证。结果一步法多重RT-PCR及DNA测序验证显示76例ALL患儿中,TEL/AML1融合基因阳性12例(产物长度分别为298 bp 9例,259 bp 3例),E2A/PBX1融合基因阳性3例(产物长度373 bp),BCR/ABL融合基因阳性1例(产物长度2124 bp),MLL/AF4融合基因阳性7例(产物长度分别为427 bp 1例,673 bp 6例),与常规巢式PCR检出结果一致。结论一步法多重RT-PCR可应用于儿童ALL常见融合基因的检测。

关键词：急性淋巴细胞白血病融合基因多重逆转录聚合酶链式反应儿童

p300/CBP对急性期川崎病Foxp3组蛋白乙酰化的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2017年第5期37卷 347-354页

作者：梅洁花王勤王国兵温鹏强徐明国唐根崔冬刘琮马东礼李成荣遵义医学院深圳市儿童医院儿科研究所深圳518038 南方医科大学附属深圳市妇幼保健院中心实验室深圳518028 深圳市儿童医院儿科研究所 518038

目的探讨p300/CBP对急性期川崎病（KD） Foxp3组蛋白乙酰化的影响及其在KD免疫发病机制中的作用.方法急性期KD患儿46例,正常同年龄对照组28例,KD患儿分别于IVIG治疗前、后直接取血备检.采用染色质免疫共沉淀-荧光定量PCR检测外周血CD4... 详细信息

目的探讨p300/CBP对急性期川崎病（KD） Foxp3组蛋白乙酰化的影响及其在KD免疫发病机制中的作用.方法急性期KD患儿46例,正常同年龄对照组28例,KD患儿分别于IVIG治疗前、后直接取血备检.采用染色质免疫共沉淀-荧光定量PCR检测外周血CD4＋ T细胞Foxp3基因组蛋白H4乙酰化及p300、CBP、pSmad3、NF-AT结合水平;流式细胞术检测外周血CD4＋CD25high Foxp3＋细胞（Treg）比例及Foxp3、CTLA4、p300、CBP、TGF-βRⅡ、pLAT1蛋白表达水平;实时荧光定量PCR检测Treg细胞Foxp3、IL-10、TGF-β、TGF-βRⅠ、Egr-1、RARα、PLCγ1 mRNA表达;ELISA检测外周血浆TGF-β、RA（retinol acid）浓度.结果（1）急性期KD患儿Treg细胞比例、抑制功能相关分子（TGF-β、IL-10和CTLA4）表达、Foxp3表达及启动子、非编码保守序列1（CNS1）、CNS2组蛋白乙酰化水平显著降低（P〈0.05）,其中KD合并冠状动脉损伤组（KD-CAL＋）前述各项指标均低于无冠状动脉损伤组（KD-CAL-）（P〈0.05）,经IVIG治疗后明显恢复（P〈0.05）.各组Foxp3基因CNS3组蛋白乙酰化水平差异无统计学意义（P〉0.05）.（2）急性期KD患儿外周血Treg细胞组蛋白乙酰化酶p300、CBP表达及Foxp3结合水平显著下调（P〈0.05）、其中p300、CBP表达与Foxp3基因组蛋白乙酰化水平呈正相关关系（r=0.65、0.42, P〈0.05）,经IVIG治疗后均有不同程度恢复（P〈0.05）.其中KD-CAL＋组p300、CBP表达及Foxp3结合水平明显低于KD-CAL-组（P〈0.05）.（3）急性期KD患儿血浆TGF-β、RA浓度及Treg细胞TGF-βRⅠ/Ⅱ/Egr-1、RARα、pLAT1/PLCγ1表达显著降低（P〈0.05）,pSmad3、NFAT与Foxp3基因的结合水平明显下调（P〈0.05）,其中KD-CAL＋组前述多项均低于KD-CAL-组（P〈0.05）,经IVIG治疗后均有不同程度恢复（P〈0.05）.（4）经TGF-β、RA及TCR联合刺激后,急性期KD患儿CD4＋ T细胞Foxp3基因启动子、CNS1、CNS2组蛋白乙酰化水平及p300、CBP结合水平均明显高于未刺激组（P〈0.05）,CNS3位点组蛋白乙酰化水平无显著性差异（P〈0.05）.结论 p300/CBP表达及结合水平不足所导致的Foxp3基因乙酰化水平低下可能与急性期KD患儿免疫功能紊乱有关,而IVIG可通过上调TGF-β信号而调节p300/CBP的表达及与Foxp3结合水平.

关键词：川崎病 Foxp3 组蛋白乙酰化调节性T细胞免疫

一例肉碱棕榈酰转移酶1A缺乏症患儿的临床特点及基因突变分析

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中华医学遗传学杂志 2017年第2期34卷 228-231页

作者：崔冬胡宇慧沈丹唐根张民段婧温鹏强廖建湘马东礼陈淑丽汕头大学医学院附属深圳儿童医院遗传代谢科广东深圳518038 汕头大学医学院附属深圳儿童医院检验科广东深圳518038 汕头大学医学院附属深圳儿童医院神经内科广东深圳518038 汕头大学医学院附属深圳儿童医院儿科研究所遗传代谢病研究室广东深圳518038

目的分析1例肉碱棕榈酰转移酶1A（carnitine palmitoyltransferase 1A，CPTIA）缺乏症患儿的临床和基因突变特征，探讨其分子遗传学发病机制。方法收集患儿的临床资料，串联质谱分析血液酰基肉碱，提取患儿及父母外周血基因组DNA，应用P... 详细信息

目的分析1例肉碱棕榈酰转移酶1A（carnitine palmitoyltransferase 1A，CPTIA）缺乏症患儿的临床和基因突变特征，探讨其分子遗传学发病机制。方法收集患儿的临床资料，串联质谱分析血液酰基肉碱，提取患儿及父母外周血基因组DNA，应用PCR-直接测序法对CPT1A基因所有外显子及侧翼进行突变分析。结果测序结果显示患儿携带CPTIA基因c．1787T〉C（p．L596P）与c．2201T〉C（p．F734S）复合杂合突变，父亲携带c．1787T〉C（p．L596P）突变，母亲携带c．2201T〉C（p．F734S）突变。经检索dbSNP数据库、HGMD数据库及千人基因组数据库两个突变均为未报道过的新突变。生物学信息分析软件预测蛋白功能，提示均为致病突变。结论酰基肉碱分析是CPT1A缺乏症的主要诊断方法。CPT1A基因c．1787T〉C和c．2201T〉C突变可能为该患儿致病原因。上述发现丰富了CPT1A基因突变谱，并为家系遗传咨询及产前诊断提供依据。

关键词：肉碱棕榈酰转移酶1A缺乏症串联质谱基因突变