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水稻和梨铜转运因子HMA5的抗病功能分析

水稻和梨铜转运因子HMA5的抗病功能分析

作者：吴瑞瑞浙江大学

学位级别：硕士

由稻黄单胞杆菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)引起的水稻白叶枯病是粮食作物水稻的重要病害。由解淀粉欧文氏菌(Erwinia amylovora,Ea)引起的火疫病是梨和苹果的毁灭性病害。两种病害均为重要的细菌维管束病害。目前... 详细信息

由稻黄单胞杆菌水稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)引起的水稻白叶枯病是粮食作物水稻的重要病害。由解淀粉欧文氏菌(Erwinia amylovora,Ea)引起的火疫病是梨和苹果的毁灭性病害。两种病害均为重要的细菌维管束病害。目前国内对于这两种病害的主要应急防治措施是化学防治。铜制剂被广泛用于各种植物病害的防治,但因有些植物对铜敏感,其应用受到了限制。因此,如何降低铜制剂适用浓度从而扩大作物病害防控适用范围非常值得研究。重金属转运ATP酶(Heavy metal transporting ATPase,HMA)具有潜在的铜转运功能,但其抗病功能尚不明确。本研究阐述HMA5的铜转运功能以及铜对Xoo和Ea的抑菌和诱抗功能,分析在外施低浓度铜制剂条件下,利用HMA5将铜富集至病原菌侵入部位(维管束)杀死病菌Xoo和Ea的防控策略可行性。获得的主要结果如下:(1)阐明了水稻HMA5在水稻抗Xoo中的正调控作用及部分机制。创制了水稻Os HMA5超表达转基因株系和CRISPR/Cas9敲除突变体株系,明确了Os HMA5正调控水稻对Xoo的抗性。Os HMA5在植物不同生长期都主要在根部表达,起到将铜从根部通过木质部转运到地上部的作用。Os HMA5正调控植株地上部铜浓度、水稻叶片中flg22(Flagelin 22)激发的活性氧(Reactive oxygen species,ROS)迸发和Xoo诱导的早期ROS迸发。1.6 m M Cu SO可完全抑制至少8个Xoo代表菌株的生长。0.1μM以上浓度Cu喷雾水稻叶片或水培强烈诱导ROS积累。利用免疫共沉淀偶联质谱分析技术(IP-MS)鉴定获得Os HMA5的潜在互作蛋白铜伴侣蛋白Os ATX1(Antioxidant Protein 1),该蛋白负责转运细胞内的铜离子。并利用分子荧光互补、酵母双杂和萤火素酶互补分析证明了Os HMA5与ATX1直接结合,并定位在细胞膜上。Xoo接种后24 h、Cu处理后5 h均强烈诱导Os HMA5表达。表明Os HMA5可能通过与Os ATX1互作,将铜转运富集至叶片,发挥激发ROS等抗性反应和杀菌双重功能,抑制Xoo扩展。此外,Os HMA4和Os HMA9能响应Xoo的晚期侵染,也与Os ATX1直接结合,表明这两个Os HMAs也参与水稻抗Xoo中,但作用时间点等可能与Os HMA5不同。(2)初步明确了梨HMA5的抗Ea功能。通过梨实生苗嫩枝的带菌牙签刺入接种分析明确了梨品种玉露香对Ea的抗性。通过玉露香和感病品种库尔勒香梨的蛋白组学分析鉴定获得差异表达蛋白192个,其中包括HMA5等30个抗病和防卫相关蛋白和13个氧化还原相关蛋白。鉴定明确了杜梨(Pyrus betulifolia)和白梨(Pyrus bretschneideri‘Dangshansuli’)均含9个HMA家族成员。通过分子荧光互补、酵母双杂和萤火素酶互补分析证明了Pbe HMA5、Pbe HMA6、Pbe HMA7和Pbe HMA9与Pbe ATX1直接结合。1.5 m M Cu SO强烈抑制Ea的生长。瞬时异源表达Pbe HMA5强烈抑制Ea激发本氏烟产生的过敏反应。表明Pbe HMA5可能类似Os HMA5,通过转运富集铜抑制梨火疫病菌的扩展。综上所述,本研究阐明了Os HMA5的抗Xoo功能,揭示了Os HMA5与Os ATX1互作,将铜转运富集至叶片,同时发挥激发抗性反应和杀菌双重功能,抑制Xoo扩展的作用机制。探明梨HMA5可能对火疫病菌起类似作用。所获结果丰富了对维管束细菌病害抗性机制的认识,提供通过创制和利用HMA5超表达抗病作物种质拓宽铜制剂适用作物病害范围、减少铜制剂使用从而降低铜污染的新思路。

关键词： HMA5 水稻白叶枯病梨火疫病铜抗病性

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岸田“新资本主义”政策的演进:理论与实践

国外理论动态 2023年第6期 114-124页

作者：刘瑞中国社会科学院日本研究所

作为岸田文雄执政的标志性经济政策,以实现增长与分配良性循环为目的的“新资本主义”构想尝试推动解决日本经济存在的一些结构性问题,但从实际效果来看,其政策仍延续“安倍经济学”的主要做法,未能深入解决日本经济社会发展的中长期问... 详细信息

作为岸田文雄执政的标志性经济政策,以实现增长与分配良性循环为目的的“新资本主义”构想尝试推动解决日本经济存在的一些结构性问题,但从实际效果来看,其政策仍延续“安倍经济学”的主要做法,未能深入解决日本经济社会发展的中长期问题。从“新资本主义”政策的演进过程可以看出其重视分配、政策功能叠加、扩大官民合作空间等特点。“新资本主义”构想的出台主要源于日本经济长期低迷、步入格差社会、企业创新动力不足、消费投资弱化以及国际政治经济环境变化等背景,其理论基础包括对新自由主义政策的矛盾与缺陷的反思、利益相关者资本主义理论和公益资本主义理论。这一政策面临着难以解决的政策性难题,如财政状况严峻、政策资金缺口大、经济安全过度化阻碍经济增长等。

关键词：岸田政府新资本主义新自由主义安倍经济学

太阳穴刺血治疗偏头痛的临床疗效及对脑电图的影响

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太阳穴刺血治疗偏头痛的临床疗效及对脑电图的影响

作者：张瑞瑞安徽中医药大学

学位级别：硕士

中等强度篮球运动干预对高一学生身体自尊和学校适应的影响

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中等强度篮球运动干预对高一学生身体自尊和学校适应的影响

作者：段瑞瑞扬州大学

学位级别：硕士

研究目的:本研究以篮球运动干预方案,进行8周的实验,探讨篮球运动干预方案与高一学生身体自尊、学校适应的关系,为高一学生学校适应及其相关研究提供借鉴。研究方法:采用方便取样选取常州市某高中高一年级2个班88名学生为实验对象,随机... 详细信息

研究目的:本研究以篮球运动干预方案,进行8周的实验,探讨篮球运动干预方案与高一学生身体自尊、学校适应的关系,为高一学生学校适应及其相关研究提供借鉴。研究方法:采用方便取样选取常州市某高中高一年级2个班88名学生为实验对象,随机分为实验组(篮球)44人(男20,女24);对照组(常规体育教学)44人(男23,女21)。运动干预持续8周,3次/周,累计约30分钟中等强度运动;对照组进行正常体育活动,运动强度不监控。使用《身体自尊量表》《学校适应量表》,分别在实验前、实验干预后,以班级团体方式进行测量,所有数据采用SPSS26.0进行统计分析。研究结果:(1)8周篮球运动干预后,高一学生学校适应后测水平明显高于前测(P<0.01),身体自尊后测水平明显高于前测(P<0.01)。(2)篮球运动干预可以直接影响高一学生学校适应,还可以通过身体自尊间接影响学校适应。直接效应为86.79%,间接效应为 13.21%。研究结论:(1)中等强度篮球运动干预可以改善高一学生学校适应和身体自尊。(2)中等强度篮球运动干预可以直接改善高一学生学校适应,也可以通过改善个体身体自尊改善学校适应,身体自尊在篮球运动和学校适应间起部分中介作用。

关键词：运动干预高一学生学校适应身体自尊中介效应

基于“分解—集成”的集装箱吞吐量组合模型预测研究

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基于“分解—集成”的集装箱吞吐量组合模型预测研究

作者：张瑞瑞大连海事大学

学位级别：硕士

港口作为我国参与全球经济合作和竞争的重要战略资源,其在“双循环”发展新格局和经济一体化进程中的关键地位不可忽视,随着各国之间经济贸易往来的增加,集装箱运输在整个货物运输中的比例日益提升,这使得港口成为海上运输中不可或缺的... 详细信息

港口作为我国参与全球经济合作和竞争的重要战略资源,其在“双循环”发展新格局和经济一体化进程中的关键地位不可忽视,随着各国之间经济贸易往来的增加,集装箱运输在整个货物运输中的比例日益提升,这使得港口成为海上运输中不可或缺的关键节点和重要枢纽。然而,当前港口集装箱吞吐量的预测面临着一系列新的挑战和变化,包括增长速度的加快、增长幅度的扩大以及环境因素的不断变化等。传统的预测方法和模型已经难以满足当前对集装箱吞吐量的准确预测需求。因此本文以多个港口作为研究对象,根据不同港口数据类型采用最合适的预测方法以建立更准确、可靠的预测模型。本文所提出的预测模型可以更好地应对集装箱吞吐量变化情况,为港口运营和管理提供更科学、可持续的决策依据。针对港口集装箱吞吐量数据所呈现的复杂非线性特点,本文首先采用经验模态分解(EMD)技术,将各个港口的初始时间序列分解为若干个本征模函数和一个残差序列,从不同时间尺度获取原始时间序列的特征信号;进一步考虑到各种本征模函数的非线性及随机性,运用长短期记忆网络(LSTM)、循环门控单元(GRU)、卷积神经网络(CNN)和支持向量回归算法(SVR)四种模型作为基准模型,分别对其进行预测,采用ARIMA模型对残差序列进行预测;最后以改进的粒子群算法优化各分量不同的权重占比进行集成预测,得到最终集装箱吞吐量预测值。本文在自适应粒子群算法的基础之上,将预测模型的评价指标加权组合,提出了多目标化的适应度函数,以提升算法的全局搜索能力和局部搜索能力,进而在较低的计算代价下取得最优结果。实验结果表明该算法可以依据输入数据自身特性赋予最适当的权重占比,进而能够有效地促进集装箱吞吐量组合预测最优化问题的求解。改进的适应度函数能够使得粒子更准确、更全面的评价预测模型,提升了自适应粒子群算法在组合预测模型中的鲁棒性。本文的目的在于验证所提出的模型在预测集装箱吞吐量方面的性能表现,以确保其在实际应用中的可靠性和有效性。为此,本文选取了我国四个吞吐量规模不同的港口作为研究对象进行实证分析。根据实际情况建立相应的预测模型,并对模型参数和误差指标做了详细地计算和比较。结果表明该模型在四个港口上均取得了较好的预测效果,证明本文所提出的模型具有很好的适用性,进一步拓展了港口集装箱吞吐量预测研究思路。

关键词：集装箱吞吐量分解-集成深度学习自适应粒子群算法

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一种红外光谱仪用于农机设备故障检测研究

农机化研究 2023年第9期45卷 255-259页

作者：张瑞瑞郑州科技学院基础部郑州450064

柴油发动机是农业机械设备的主要动力源,工作过程中故障形式主要表现为异常磨损。为此,基于红外光谱仪构建农用柴油发动机异常磨损故障检测技术手段,结合故障监测与诊断分析流程对农用柴油发动机运转过程进行跟踪监测,判断柴油发动机的... 详细信息

柴油发动机是农业机械设备的主要动力源,工作过程中故障形式主要表现为异常磨损。为此,基于红外光谱仪构建农用柴油发动机异常磨损故障检测技术手段,结合故障监测与诊断分析流程对农用柴油发动机运转过程进行跟踪监测,判断柴油发动机的异常磨损故障,结合发动机分解检修状态,验证故障检测诊断的准确性。结果表明:利用红外光谱仪构建柴油发动机故障检测诊断流程,能够有效地对农用柴油发动机的异常磨损状态进行诊断分析。

关键词：柴油发动机农机设备红外光谱仪故障检测与诊断

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原发性血小板增多症患者血小板功能研究

原发性血小板增多症患者血小板功能研究

作者：柴瑞瑞河北北方学院

学位级别：硕士

探讨原发性血小板增多症(Essential thrombocytosis,ET)患者血小板功能的变化,为抗凝治疗的决策提供理论依据,减少血管事件的发生。选取2017年1月至2022年6月就诊我院的150例ET患者作为观察组,同期40例健康体检者作为对照组。比较分析... 详细信息

探讨原发性血小板增多症(Essential thrombocytosis,ET)患者血小板功能的变化,为抗凝治疗的决策提供理论依据,减少血管事件的发生。选取2017年1月至2022年6月就诊我院的150例ET患者作为观察组,同期40例健康体检者作为对照组。比较分析两组血细胞相关参数(PLT、WBC、Hb)、血小板相关指标(MPV、PDW)、血小板聚集功能(MAR)、血小板膜表面糖蛋白(CD42b、CD41、CD61)的差异;依据血小板计数高低,将ET患者分为高血小板计数组(PLT>1000×10/L)和低血小板计数组(PLT≤1000×10/L),分析两组患者血小板功能差异;依据驱动基因的不同,将ET患者分为JAK2组、CALR组、MPL组、三阴组,进行亚组分析,探讨各组ET患者血小板功能的差异。研究发现:1、ET患者共150例,男70例、女80例,中位年龄62.39岁。JAK2突变78例、CALR突变26例、MPL突变1例、JAK2与CALR双突变1例、三阴44例。2、ET组血细胞相关参数:PLT 916.37±333.48×10/L、WBC12.55±6.09×10/L、Hb 138.11±25.19g/L;对照组血细胞相关参数:PLT225.90±45.82×10/L、WBC 5.55±1.01×10/L、Hb 140.60±18.42g/L,两组比较Hb方面差异无统计学意义(P=0.671),PLT、WBC差异有统计学意义(P0.05)。MPL突变及JAK2、CALR基因双突变各1例,未做统计学分析。由以上结果可得出:1.ET患者血小板计数不同程度升高,聚集功能增强、血小板膜糖蛋白CD41、CD61及CD42b表达异常,提示该病患者血小板功能异常活跃,容易发生血管事件;2.低血小板计数组(PLT≤1000)血小板最大聚集率(MAR)高于高血小板计数(PLT>1000),提示患者血栓的风险与血小板数量相关;3.不同驱动基因对血小板功能无显著影响。

关键词：原发性血小板增多症血小板功能血小板最大聚集率血小板膜糖蛋白

钒氯过氧化酶催化氨基酸合成腈类化合物的应用研究

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钒氯过氧化酶催化氨基酸合成腈类化合物的应用研究

作者：张瑞瑞石河子大学

学位级别：硕士

目的:(1)通过文献查阅和数据库调研挖掘出能够催化氨基酸合成腈类化合物的广谱酶,并实现其在工业微生物菌大肠杆菌中的高效异源表达;(2)通过优化工程菌株的培养条件来提高钒氯过氧化酶(VCPO)的表达量和催化活性,并探究VCPO的酶学性质以... 详细信息

目的:(1)通过文献查阅和数据库调研挖掘出能够催化氨基酸合成腈类化合物的广谱酶,并实现其在工业微生物菌大肠杆菌中的高效异源表达;(2)通过优化工程菌株的培养条件来提高钒氯过氧化酶(VCPO)的表达量和催化活性,并探究VCPO的酶学性质以找出其最佳催化条件;(3)通过研究VCPO作用于不同底物时对应的产物谱,确定该酶的广谱性,并确认最佳底物,纯化该底物的产物。方法:(1)使用分子生物学技术构建质粒p ET28a-VCPO,进一步筛选出VCPO的表达菌株,根据VCPO的粗酶使酚红水溶液颜色变化深浅来初步判断酶的活性。(2)通过调节诱导温度、诱导时间和诱导剂浓度优化VCPO表达菌培养条件,同时使用十二烷基磺酸钠-聚丙烯基酰胺凝胶蛋白电泳(SDS-PAGE)检测酶的表达情况,使用BCA蛋白浓度测定试剂盒检测蛋白浓度。对影响酶活性质的溴化钠浓度、补加过氧化氢的时间、pH和温度进行分析,确定VCPO的最佳反应条件。(3)初步测试VCPO对L-高丝氨酸,L-丙氨酸、L-酪氨酸、L-异亮氨酸、L-色氨酸,L-谷氨酸,L-天冬氨酸和L-2-氨基丁酸的催化活性,使用高效液相色谱(HPLC)检测对应的腈化物来确定VCPO的最佳底物,并对该反应产物进行分离纯化。结果:(1)通过筛选确定了VCPO的最佳表达菌株,根据VCPO蛋白溶液与酚红水溶液反应的结果,初步证明该酶有活性。(2)在诱导剂IPTG添加量为1 m M,诱导温度为20℃,诱导时间为20 h时蛋白表达量最高为12.72 mg/mL,总酶活最高为0.42 U。酶学活性分析表明该酶在溴化钠浓度为10 m M、每5 min补加5 m M的过氧化氢、pH=5.6、25℃下VCPO催化L-高丝氨酸生成3-羟基丙腈的活性最好,由此确定了该酶的最佳催化条件。(3)通过对VCPO的底物谱进行拓展,用HPLC对它们的产物进行检测,发现1.272 mg/mL的VCPO对底物浓度为50 m M的L-高丝氨酸的转化率最高为58.32%,并以L-高丝氨酸为底物在实验室制备得到1.11 g/L纯度为68.37%药物中间体3-羟基丙腈。结论:通过筛选确定了来自海洋生物的VCPO的表达载体和表达宿主菌,并成功实现了VCPO在工业微生物大肠杆菌中的异源表达;通过优化得到最佳诱导条件为诱导剂IPTG浓度为1 m M,诱导温度为20℃,诱导时间为20 h,最佳反应条件为溴化钠浓度10 m M、pH=5.6、每5 min加入5 m M过氧化氢、温度为25℃;在此反应条件下得到浓度为1.11 g/L,纯度为68.37%的药物中间体3-羟基丙腈。为酶法催化氨基酸合成腈类化合物在工业上的应用提供参考依据。

关键词：钒氯过氧化物酶氨基酸腈类化合物

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抖音自制音乐内容运营研究

抖音自制音乐内容运营研究

作者：曹瑞瑞中国传媒大学

学位级别：硕士

自2016年开始,国内短视频行业呈现爆发式增长,在激烈的市场竞争中,抖音凭借“音乐社区”的市场定位,成为短视频领域的头部产品。凭借其算法技术与强大的市场影响力,通过可视化的音乐传播方式,逐步成为国内音乐宣推的重要平台。在取消独... 详细信息

自2016年开始,国内短视频行业呈现爆发式增长,在激烈的市场竞争中,抖音凭借“音乐社区”的市场定位,成为短视频领域的头部产品。凭借其算法技术与强大的市场影响力,通过可视化的音乐传播方式,逐步成为国内音乐宣推的重要平台。在取消独家版权后,在线音乐市场争相发力原创音乐内容,抖音也抓住机遇,入局在线音乐市场,发展自制音乐内容。抖音作为月活超7亿的短视频平台,对音乐传播有着重要影响。因此,对其自制音乐内容的运营开展相关研究存在一定的必要性和重要性。本文通过个案研究法、文献调查法以及访谈法,了解抖音自制音乐的内容生产与运营逻辑,基于对其运营现状的分析,总结出当前抖音自制音乐的运营模式,探究其在运营过程中存在的困境,并提出优化措施。笔者认为,为了实现长足的发展,抖音首先应规避自身核心版权数量不足的问题,大力扶持原创音乐人,发展粉丝经济,增强用户粘性;其次应该细分用户圈层,瞄准用户群体,服务泛音乐用户,走差异化音乐之路;最后,抖音应发挥自身算法优势,加强音乐内容推送的消费推荐,刺激潜在付费群体消费,实现利润增长。分析抖音自制音乐内容运营的困境,探究运营优化措施,为抖音在音乐市场的发展提供建议,使其更好的为音乐产业与消费者服务,以期促进在线音乐产业良性竞争与音乐市场繁荣。

关键词：抖音在线音乐音乐运营