DR-PAM诱导混合层原位再矿化改善牙本质粘接耐久性的研究

作     者：司瑞瑞 

作者单位：兰州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：苟雅萍

授予年度：2023年

学科分类：1003[医学-口腔医学] 100302[医学-口腔临床医学] 10[医学] 

主      题：牙本质仿生再矿化 DR PAMAM-NH2 DR-PAM 粘接耐久性 

摘      要：目的:为解决牙本质仿生再矿化过程中胶原纤维易被降解的问题,本研究基于PAMAM-NH良好的仿生再矿化性能,拟将具有特异性结合胶原分子的氨基酸序列-DSp ESp Sp EEDR-引入到PAMAM易修饰的表面官能团上,预期在保留PAMAM再矿化及抗菌性能的基础上赋予其交联、稳定胶原的作用。本实验中评估DSp ESp Sp EEDR-NH-PAMAM(简称:DR-PAM)作为牙本质粘接前处理剂的胶原结合、仿生再矿化及抗菌性能,为提高牙本质粘接耐久性提供新思路和新技术。方法:以第五代PAMAM-NH为基础,将具有特异性胶原结合作用的氨基酸序列-DSp ESp Sp EEDR-引入其表面,合成DR-PAM复合体并通过核磁氢谱(H NMR)及傅里叶变换红外光谱图(FTIR)来评估其分子结构。通过细胞毒性实验筛选出最佳的实验浓度。通过微拉伸实验检测其作为前处理剂的树脂-牙本质即刻粘接强度。通过羟脯氨酸释放量(HYP)的检测、异硫氰酸荧光染色实验(FITC)及圆二色谱(CD)分析来检测其与胶原的结合情况。采用扫描电镜(SEM)、红外光谱(FTIR)、元素分析(EDS)、X线衍射图谱(XRD)、透射电镜(TEM)及选区电子衍射图谱(SAED)研究其诱导胶原纤维实现仿生再矿化的能力。最后通过死活染色实验验证了其对变形链球菌(S.mutans)和粪肠球菌(E.faecalis)的抗菌效果。结果:本课题中成功合成了DR及DR-PAM,且通过CCK-8研究证明了DR-PAM良好的生物相容性并确定了实验浓度为1 mg/m L;通过微拉伸实验证明了DR-PAM不会影响牙本质的即刻粘接强度;HYP、FITC及CD结果显示DR及DR-PAM与胶原纤维具有较强的结合作用,并且可以增强胶原纤维的抗酶解力;再矿化实验证明了DR-PAM可诱导胶原纤维内外的矿化;且死/活染色实验结果显示改性后的DR-PAM仍具有一定的抗菌作用。结论:本课题中合成的DR-PAM生物相容性好且不影响牙本质即刻粘接强度,同时能够与胶原纤维牢固结合,提高了脱矿牙本质胶原纤维的稳定性及耐酶解性。在不影响PAMAM-NH原有再矿化作用及抑菌作用的基础上,成功赋予了其胶原保护作用,对改善树脂-牙本质粘接耐久性具有潜在的价值。