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植物乳杆菌漆酶的催化特性及其对生物胺降解的研究

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植物乳杆菌漆酶的催化特性及其对生物胺降解的研究

作者：曹玉莹天津科技大学

学位级别：硕士

生物胺在发酵食品和酿造酒中广泛存在,过量摄入生物胺会引起不良生理反应,严重者会危及生命。生物胺降解酶在不影响发酵工艺和产品风味的情况下可有效降解食品中的生物胺,近年来已成为发酵产品中生物胺降解研究领域的热点。目前,以漆酶... 详细信息

生物胺在发酵食品和酿造酒中广泛存在,过量摄入生物胺会引起不良生理反应,严重者会危及生命。生物胺降解酶在不影响发酵工艺和产品风味的情况下可有效降解食品中的生物胺,近年来已成为发酵产品中生物胺降解研究领域的热点。目前,以漆酶为代表的多铜氧化酶可一次降解多种生物胺,应用最为广泛。真菌来源的漆酶研究较多,但主要应用于木质素类聚合物的降解,细菌来源的漆酶可应用于发酵食品和酿造酒中,但目前仅限于菌株筛选和生物胺降解的初步应用,缺乏对酶催化机制的研究,一定程度上阻碍了漆酶在酿造酒生物胺降解方面的应用。本实验室在前期研究中筛选获得了六株可有效降解生物胺的乳酸菌,经鉴定植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum ZG-1）的降解率最高,通过基因序列比对发现其含有编码漆酶的基因。因此,本论文进一步对L.plantarum ZG-1来源的漆酶进行深入研究。（1）将L.plantarum ZG-1来源的漆酶进行异源表达,分离纯化后分析其酶学性质并对影响其活力的主要因素进行研究。结果表明,该漆酶的最适反应温度为40℃,最适反应p H为4.0;浓度为1 mmol/L的Mg、Zn和Ca对漆酶的酶活具有不同程度的促进作用,其中Zn和Ca的促进作用最为明显;反之,高浓度的Mn、Fe和EDTA对漆酶酶活的抑制作用较大;以ABTS为底物时漆酶的K为2.49 mmol/L,V为0.22 mmol/（L·min）;漆酶对低浓度的乙醇具有较好的耐受性,在含有20%（v/v）乙醇的体系中保存1 h后相对酶活仍可达75%以上。（2）对L.plantarum ZG-1来源的漆酶进行生物信息学分析,结合同源建模与分子对接结果,选择5个靠近催化口袋附近的氨基酸残基,对其采用丙氨酸扫描策略定点突变获得突变体M392A、N386A、N390A、M352A和E452A;同时,选择5个靠近三核铜离子（TNC）区附近的氨基酸残基,定点突变得到突变体C153H、V398W、M476A、M478A和Y446A。结果表明,突变酶M478A、Y446A、M392A和N390A的酶活均高于野生酶。M478A在50℃和60℃条件下的热稳定性较野生酶提高最多;M478A、N390A和M392A在p H 3.0-6.0条件下,残余酶活均高于野生酶。动力学参数分析结果表明,M478A与底物ABTS的亲和力最强,K为1.819 mmol/L,M392A对底物的催化效率最高,K/K为137.77L·mmol·s。（3）生物胺降解实验结果表明,在TNC区定点突变关键氨基酸得到的突变体M478A和Y446A对组胺的降解率均为野生酶的2倍以上,对亚精胺和苯乙胺的降解率均有所降低;在催化口袋附近定点突变关键氨基酸得到的突变酶N390A和M392A对组胺、色胺和亚精胺的降解均有降低,该结果表明,漆酶对胺类物质和ABTS底物的催化机制有所不同,仍需进一步探究各种胺和不同位点的具体降解功能。

关键词：植物乳杆菌漆酶酶学性质分子改造生物胺

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发达国家开展中小学生课后服务的经验及启示

新教育（海南） 2022年第25期 89-91页

作者：曹玉莹海南省海南师范大学教育学院

“三点半”难题已成为全球多个国家面临的共同挑战,中小学生课后服务的供需矛盾日益突出。英国、美国、日本、韩国、澳大利亚、芬兰、瑞典等发达国家课后服务起步较早且积累了丰富的经验。合理借鉴发达国家的有益经验,对我国中小学生课... 详细信息

“三点半”难题已成为全球多个国家面临的共同挑战,中小学生课后服务的供需矛盾日益突出。英国、美国、日本、韩国、澳大利亚、芬兰、瑞典等发达国家课后服务起步较早且积累了丰富的经验。合理借鉴发达国家的有益经验,对我国中小学生课后服务的发展具有重要意义。

关键词：发达国家三点半难题课后服务经验与启示

黄土高原典型草本植物根-土复合体抗剪性能的空间差异性及其影响因素研究

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草业学报 2023年第5期32卷 94-105页

作者：曹玉莹苏雪萌周正朝郑群威岳佳辉陕西师范大学地理科学与旅游学院陕西西安710119

为探究黄土高原草本植物根-土复合体抗剪性能的空间差异性,由北至南分别以神木六道沟(砂壤土)、安塞坊塔(粉壤土)和永寿墚(粘壤土)3个不同土壤质地带的土壤为对象,采用盆栽的方式分别种植须根系的黑麦草和直根系的紫花苜蓿,并以裸地为... 详细信息

为探究黄土高原草本植物根-土复合体抗剪性能的空间差异性,由北至南分别以神木六道沟(砂壤土)、安塞坊塔(粉壤土)和永寿墚(粘壤土)3个不同土壤质地带的土壤为对象,采用盆栽的方式分别种植须根系的黑麦草和直根系的紫花苜蓿,并以裸地为对照。在种植4个月后,测定0~10 cm、10~20 cm和20~30 cm土层根-土复合体的土壤理化性质、根系特征和抗剪强度(粘聚力和内摩擦角)。结果表明:1)与裸地相比,种植黑麦草和紫花苜蓿后,有机质(SOM)、平均重量直径(MWD)和粘聚力(c)均得到增加,但内摩擦角(φ)变化较小,植物对土壤理化性质和抗剪强度的影响效应随土层深度的增加逐渐减小,黑麦草对改善土壤理化性质和抗剪强度的效果优于紫花苜蓿;2)在砂壤土、粉壤土和粘壤土质地下c呈现增加的趋势,根系参数和容重(BD)呈现减小的趋势,SOM和MWD表现为粘壤土>砂壤土>粉壤土,SOM、MWD和c增加值最大的为粘壤土;3)主成分分析显示砂壤土的根系特征指标对根-土复合体抗剪强度的贡献度比较高,粉壤土和粘壤土则是土壤特征指标对根-土复合体抗剪强度的贡献度比较高。研究结果综合评价了黄土高原草本植物根-土复合体的抗剪性能,为黄土高原水土保持研究提供了基础数据和理论参考。

关键词：抗剪强度土壤质地主成分分析黄土高原

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浅析边沁功利主义法学对税收管理的影响

浅析边沁功利主义法学对税收管理的影响

吉林省支持经济发展研讨会

作者：曹玉莹李梦莹国家税务总局吉林省税务局

边沁功利主义法学理论是将刑罚的本质归于人性的趋利避害,通过提高人们向善的利和向恶的弊,来避免人们走向恶的一端。而税收管理工作恰好与边沁的法学理论不谋而和,一味地强调税务机关的威慑作用,无法从根源上提高纳税人的遵从度,只有... 详细信息

边沁功利主义法学理论是将刑罚的本质归于人性的趋利避害,通过提高人们向善的利和向恶的弊,来避免人们走向恶的一端。而税收管理工作恰好与边沁的法学理论不谋而和,一味地强调税务机关的威慑作用,无法从根源上提高纳税人的遵从度,只有让纳税人从心底接受纳税光荣、漏税可耻,认识到自己在纳税的过程中享受到的税收优惠政策带来的利,感受到在日常生活中因为税收带来的益,才能让纳税人心悦诚服地履行义务。通过减税降费等一系列优惠行为,提升纳税人的满意度,进而提高纳税人的纳税遵从度,最终既符合依法治国、依法治税的要求,又能达到税收工作水平与税收责任感双提升的目的。

关键词：边沁功利主义税收管理

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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澳大利亚国际教育的发展目标与战略举措

宁波大学学报（教育科学版） 2023年第5期45卷 93-100页

作者：李振玉曹玉莹海南师范大学教育科学研究院海南海口571158 海南师范大学教育学院海南海口571158

二战后,澳大利亚作为留学生教育大国而久负盛名。受新冠肺炎疫情冲击,该国在过去几年间出现传统留学市场大变动、国际学生生活处境艰难、国际教育机构濒临倒闭的局面。鉴于此,澳政府于2021年12月正式颁布《澳大利亚国际教育战略2021-203... 详细信息

二战后,澳大利亚作为留学生教育大国而久负盛名。受新冠肺炎疫情冲击,该国在过去几年间出现传统留学市场大变动、国际学生生活处境艰难、国际教育机构濒临倒闭的局面。鉴于此,澳政府于2021年12月正式颁布《澳大利亚国际教育战略2021-2030》(以下简称“战略”),以挽危局。该战略作为未来澳大利亚重振和发展国际教育的指导方针,提出了一系列重振国际教育的战略目标和重要举措,以实现2030年愿景:一是促进学生来源和教学供给方式的多样化;二是满足多种职业技能需求,着力开发与产业社会相关联的职业教育课程;三是以学生为中心提升国际教育全球竞争力。澳大利亚发展国际教育目标和战略举措对我国有积极的借鉴和启示。

关键词：澳大利亚国际教育发展战略学生中心职业技能

植物乳杆菌漆酶的酶学性质及其对生物胺的降解作用

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食品科学 2023年第12期44卷 157-163页

作者：曹玉莹王爽刘怡宁高熳熳杜丽平马立娟张惠玲田晓菊杨伟明天津科技大学生物工程学院天津300457 天津科技大学工业发酵微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津300457 宁夏大学食品与葡萄酒学院宁夏银川750021 宁夏志辉源石葡萄酒庄有限公司宁夏银川750026

为研究乳酸菌来源的漆酶酶学性质及其在生物胺降解中的应用潜力,以来源于植物乳杆菌的漆酶编码基因为研究对象,对其进行异源表达及酶学性质的研究,测定其最适温度和pH值、金属离子及螯合剂对漆酶活性的影响、重组漆酶对不同体积分数的... 详细信息

为研究乳酸菌来源的漆酶酶学性质及其在生物胺降解中的应用潜力,以来源于植物乳杆菌的漆酶编码基因为研究对象,对其进行异源表达及酶学性质的研究,测定其最适温度和pH值、金属离子及螯合剂对漆酶活性的影响、重组漆酶对不同体积分数的乙醇的耐受性以及重组酶对生物胺的降解作用。结果表明,重组漆酶最适温度为40℃,最适pH值为4.0;低浓度的Mg^(2+)、Zn^(2+)和Ca^(2+)对重组漆酶活力具有不同程度的促进作用,其中Zn^(2+)和Ca^(2+)的促进作用最为明显;反之,高浓度的Mn^(2+)、Fe^(2+)和乙二胺四乙酸能够抑制重组漆酶活力至原本的15%甚至更低;2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)为底物时重组酶的米氏常数为2.49 mmol/L,最大反应速率为0.22 mmol/(L·min);重组漆酶对低体积分数乙醇具有很好的耐受性,在含有20%乙醇的体系中保存1 h后相对酶活力仍可达75%以上。生物胺降解实验表明,重组漆酶对酪胺和色胺的降解率达到了100%,对亚精胺、苯乙胺和组胺的降解率分别为49.60%、25.27%和21.80%。由此可见,本实验构建的来源于植物乳杆菌的重组漆酶针对低酒精度发酵饮品及发酵食品的生物胺降解具有很大的应用潜力。

关键词：生物胺漆酶异源表达酶学性质植物乳杆菌

石首市“西普体艺中心”体育服务综合体经营现状及发展对策研究

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石首市“西普体艺中心”体育服务综合体经营现状及发展对策研究

作者：曹玉莹武汉体育学院

学位级别：硕士

城市体育服务综合体是伴随我国国民经济持续稳定发展,体育产业不断壮大以及体育场馆经营管理体制不断深化改革的产物,是现阶段满足人们日益增长的体育健身需求,推进城市建设与发展的重要物质载体。城市体育服务综合体因其复合型特点且... 详细信息

城市体育服务综合体是伴随我国国民经济持续稳定发展,体育产业不断壮大以及体育场馆经营管理体制不断深化改革的产物,是现阶段满足人们日益增长的体育健身需求,推进城市建设与发展的重要物质载体。城市体育服务综合体因其复合型特点且在服务范围等领域突破了原有大型体育场馆的限制,在现如今的城市建设与发展中,作为促进各产业融合的一条纽带而被高度重视。从未来发展趋势看,国内各级城市将逐步把体育服务综合体建设纳入城市发展规划中。近些年来,县市级等三、四线城市的体育产业逐渐显现活力,体育市场也开始活跃起来。由于场地资源、运动技术资源以及经济发展程度受限等因素,现有体育场地设施及相关体育服务无法满足市民日益增长的体育消费需求的矛盾逐渐突显出来。借鉴国内外的做法与先进经验,通过打造体育服务综合体来促进县市级城市体育产业的发展,缓解当下的供需矛盾成为一条可行路径。但县市级城市因其受人们消费观念、生活观念等因素的制约,在开发和建设体育服务综合体时该如何准确布局自己的服务功能、降低其开发风险;如何在服务于大众的同时又保证自己的正常运转则显得尤为重要。本研究通过文献资料法、实证分析法、数理分析法等研究方法对县市级城市体育服务综合体的代表——石首市西普体艺中心的经营状况进行分析,并对其成功经验进行总结,认为其运营经验可概括为:营造体育氛围,活动内容多样;功能设计合理,降低消费成本;注重全民健身,打造体育公益;体育服务为主,融合特色服务。在深入剖析西普体艺中心经营现状及存在问题的基础上,提出西普体艺中心体育服务综合体发展的对策,包括:1、立足全民健身战略,走融合发展道路;2、完善服务功能配套,满足市民多元化需求;3、丰富服务项目,优化服务内容;4、突显自身特色,吸引市民消费;5、准确市场定位,实施合理的价格策略。以打造体育服务综合体的方式来落实全民健身战略,以体育产业为重点产业的同时,带动其它产业同步发展是县市级城市突破当前体育产业发展瓶颈的出路之一。本文通过对西普体艺中心个案的深入研究,以期为我国其他县市级城市体育服务综合体的建设和发展提供一条可供借鉴的思路。

关键词：西普体艺中心体育服务综合体功能定位融合发展

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高空抛物行为的刑法规制

高空抛物行为的刑法规制

作者：曹玉莹山东大学

学位级别：硕士

随着城市的不断发展,高层建筑物的数量逐年增多,高空抛物现象也越来越普遍,严重侵犯了公民的人身财产安全,甚至对公共安全也造成了极大的威胁,具有较大的社会危害性。为了应对层出不穷的高空抛物案件,最高人民法院于2019年11月印发了《... 详细信息

随着城市的不断发展,高层建筑物的数量逐年增多,高空抛物现象也越来越普遍,严重侵犯了公民的人身财产安全,甚至对公共安全也造成了极大的威胁,具有较大的社会危害性。为了应对层出不穷的高空抛物案件,最高人民法院于2019年11月印发了《关于依法妥善审理高空抛物、坠物案件的意见》(以下简称《意见》)。《意见》强调,要在刑事定罪和民事追责上明确区分高空抛物行为和高空坠物行为,并规定了司法实践中处理高空抛物案件的诸多细则。2020年6月28日第十三届全国人大常委会第二十次会议发布了《中华人民共和国刑法修正案(十一)(草案)》(以下简称《草案》),其中第一条就是高空抛物的相关规定,即在刑法第114条中增加两款作为第二款、第三款:“从高空抛掷物品,危及公共安全的,处拘役或者管制,并处或者单处罚金。”“有前款行为,致人伤亡或者造成其他严重后果,同时构成其他犯罪的,依照处罚较重的规定定罪处罚。”后2020年10月13日,第二十二次会议发布《中华人民共和国刑法修正案(十一)(草案二次审议稿)》(以下简称《二次审议稿》),将该条删除。并在第27条规定,在刑法第291条后增加一条:“从建筑物或者其他高空抛掷物品,情节严重的,处一年以下有期徒刑、拘役或者管制,并处或者单处罚金。”“有前款行为,同时构成其他犯罪的,依照处罚较重的规定定罪处罚。”。最终,2020年12月26日,第二十四次会议通过了《中华人民共和国刑法修正案(十一)》,保留了《二次审议稿》对高空抛物行为的相关规定。2021年2月26日通过的《最高人民法院、最高人民检察院关于执行确定罪名的补充规定(七)》(以下简称《补充规定》),将第291条之二(《刑法修正案(十一)》第33条)规定为高空抛物罪。除了立法层面,在司法实践中,对于高空抛物案件也存在着诸多的争议。高空抛物所抛之“物”、抛物行为发生的情形、其直接或者间接导致的客观危害以及抛物人主观心态存在着千差万别,同时,找到抛物之人的难度也较大,导致行为本身具有一定的复杂性,认定较为困难,认定后如何定罪也存在较多争议。本文通过明确高空抛物行为概念以及其认定标准,对当前高空抛物犯罪所涉及的刑法规制问题进行了分析,以解决司法实践中关于高空抛物行为的认定以及刑法规制问题。本文共有五个部分。第一部分主要讨论高空抛物行为的界定,从客观、主观两个方面来对其进行讨论,用行为无价值二元论对其违法性进行分析,根据高空抛物行为所违反的法律规范将其分为三种类型,并通过举例的方式对这三种不同类型的高空抛物行为客观上存在的违法性进行了分析。最后对高空抛物行为和高空坠物行为进行了区分,否认了《意见》中简单用主观上是故意还是过失来进行区分的方式,并具体介绍了相应的区分方式。第二部分主要介绍了我国高空抛物行为的法律规制现状,分别从民法和刑法两种不同法律规范介绍了立法和司法两个方面的内容。第三部分主要对用刑法对高空抛物行为进行规制的必要性和可行性进行了分析。第四部分主要分析了高空抛物行为在刑法规制时所遇到的困境。首先,关于高空抛物行为的法律性质存在诸多争议,而明确行为的法律性质是对其进行定罪量刑的重要前提。其次,关于高空抛物行为罪名认定以及是否需要单独定罪的问题仍然存在很多的争议,而这些争议也直接影响了高空抛物行为的立法和司法。最后,在《意见》出台后,司法实践中又开始出现了矫枉过正的过度打击问题,根据《意见》中的规定,实践中出现了除特殊情况构成故意伤害罪、故意杀人罪外,其他类型的高空抛物行为都用以危险方法危害公共安全罪定罪的现象,导致该罪名成为高空抛物行为的兜底罪名。《刑法修正案(十一)》设立了一个新的罪名一—高空抛物罪,然而此罪名具有极大的可能成为高空抛物行为的口袋罪名。文章在对上述困境进行分析的基础上建构出了第五部分的内容,即明确了用刑法规制高空抛物行为的路径。本文的观点为不主张设立高空抛物罪,由现行刑法的罪名来规制高空抛物行为,其中包括以危险方法危害公共安全罪、寻衅滋事罪、故意杀人罪、故意伤害罪、过失致人重伤或死亡罪、重大安全事故罪。综上,本文顺着什么是高空抛物行为,为什么高空抛物行为要入罪以及如何给高空抛物行为定罪的思路,试图厘清高空抛物行为的相关知识体系,并针对高空抛物案件的刑法规制进行深入研究,以期达到更好地运用刑事手段规制高空抛物犯罪的目的。

关键词：高空抛物行为刑法修正案(十一) 高空抛物罪以危险方法危害公共安全罪

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红卫农场农事管理系统设计与实现

红卫农场农事管理系统设计与实现

作者：曹玉莹东北农业大学

学位级别：硕士

据国家统计局公布粮食生产数据显示,2020年全国粮食总产量为6695亿千克,黑龙江省粮食总产量750亿千克,粮食产量约占我国总产量的十分之一,具有“全国粮食产量第一大省”的美誉。黑龙江省土质优沃、水量充沛、地势平坦,具备农业生产有利... 详细信息

据国家统计局公布粮食生产数据显示,2020年全国粮食总产量为6695亿千克,黑龙江省粮食总产量750亿千克,粮食产量约占我国总产量的十分之一,具有“全国粮食产量第一大省”的美誉。黑龙江省土质优沃、水量充沛、地势平坦,具备农业生产有利的自然条件。建三江红卫农场位于黑龙江省东北部,是我国商品粮的重要基地,也是我国大规模农场的典型代表。目前,红卫农场对于信息的管理还是以人工管理为主,信息管理为辅,管理效率低下。在数据管理上存在数据孤岛、数据质量差等问题,对于农业信息采集、处理、发布的时效性也难以保证。因此,开发一套农事管理系统,提升红卫农场现代化管理水平与生产效率的需求十分迫切。农场管理是指对农业自然资源、农业劳动力资源、农业资本、农业技术以及农业信息的管理,是农业生产和经营的重要基础。本文通过对红卫农场实地调研,结合农事管理中的实际需求,提出了红卫农场农事管理系统的研究。从构建系统的可行性、整体业务流程、系统功能等方面进行全面分析,设计了一套适用于红卫农场的农事管理系统。在系统性能方面从系统总体结构、数据库结构、功能设计等几方面对红卫农场农事管理系统进行详细设计,保障系统实用性、稳定性和安全性。本系统使用Java语言、Web GIS系统、My Batis等框架进行开发,选择My Eclipse作为开发工具,应用My SQL数据库和B/S体系结构。本系统实现了地块管理、农事管理、农资管理、农机管理、会话管理、人员管理等功能,根据用户角色和使用需求的不同,划分了用户使用权限,并开发Web端和移动端两个系统,满足各级用户的使用需求。本系统功能齐备、界面直观、操作简单,在测试过程中表现良好,满足系统设计预期,可用于红卫农场农业生产和经营管理。系统设计与实现对提高红卫农场管理效率具有重要应用价值,对建设现代化农场具有重要作用,对促进我国农业信息化发展具有重要意义。

关键词：农业信息化信息管理系统农场管理