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Choukroun's PRF对体外培养人脂肪干细胞增殖及成骨分化影响的实验研究

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Choukroun's PRF对体外培养人脂肪干细胞增殖及成骨分化影响的实...

作者：刘元媛南方医科大学

学位级别：硕士

一、研究背景国内外许多研究已经证明血小板浓缩物被激活后可释放出多种细胞生长因子,如：血小板衍化生长因子AB(PDGF-AB)、内皮细胞生长因子(ECGF)、表皮生长因子(EGF)、转化生长因子β(TGF-β)、类胰岛素生长因子(IGF)等。这些因子... 详细信息

一、研究背景国内外许多研究已经证明血小板浓缩物被激活后可释放出多种细胞生长因子,如：血小板衍化生长因子AB(PDGF-AB)、内皮细胞生长因子(ECGF)、表皮生长因子(EGF)、转化生长因子β(TGF-β)、类胰岛素生长因子(IGF)等。这些因子对细胞生长分化和组织修复再生有重要的作用。1984年,Assion最早从人血浆中提取出富血小板血浆(platelet-rich plasma, PRP),1987年,Ferrari等将PRP首先运用于心胸外科,随后由于发现PRP释放出的生长因子可以增强组织修复和再生,广泛应用于整形外科和创伤外科等领域。但由于PRP在制备过程中添加了异种凝血酶和抗凝剂,存在免疫排斥反应和感染性疾病传播的危险,其应用一直存在争议。 2000年,法国学者Choukroun等第一次制备提取了新一代血小板浓缩制品即富血小板纤维蛋白(Choukroun’s platlet-rich fibrin,Choukroun’s PRF),其保留了上一代血小板浓缩制品PRP的优点,同时兼具制备过程简单、完全取自于自体血、无需添加任何生物制剂、成骨能力强等特点,制备简单且经济,避免了血液交叉感染的风险以及伦理道德的争议。因此PRF被认为是一种最佳的天然血液凝集物。大量研究表明Choukroun’s PRF在口腔颌面外科、骨科和整形美容科有潜在的临床使用价值,比如其可以缩短创伤组织的愈合时间,促进骨组织的移植重建,加速美容手术后的修复。但目前Choukroun’s PRF的研究还处于初级阶段,还需要进一步的研究和探讨。在临床上,由于创伤、感染、肿瘤、畸形等造成的骨缺损非常常见,但骨组织的修复及再生是十分困难的,近几十年来,随着组织工程技术的发展,生物材料的更新,骨组织工程的发展已经成为骨缺损修复的新思路,是解决大块骨缺损等临床难题的较理想方法。而骨组织工程的种子细胞来源制约了骨组织工程进一步的应用。理想的种子细胞来源应具备：来源丰富,取材方便及对机体损伤小;有较强的增殖及传代能力;取自自体组织,移植后不存在免疫排斥反应;植入体内后能高质量的修复骨缺损,并保持良好的远期观察疗效。骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)具有增殖和多向分化的能力,已经广泛用于研究,但其不容易获取,成骨分化能力有限,成为骨组织工程的种子细胞具有局限性。自Zuk等首次从吸脂术抽取的脂肪组织中分离出脂肪来源间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)以来,体外培养的脂肪干细胞表现出与骨髓间充质干细胞(BMSCs)有类似的分化能力,在体外诱导分化实验中,加入不同的化学试剂和细胞因子,可以诱导ADSCs分化形成脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、肌肉细胞、心肌细胞、神经细胞、内皮细胞和肝细胞等。而且脂肪干细胞具有易获取、可迅速扩增及生长迅速的特点。由于其具有以上优点,近年来对其研究很多,ADSCs是一类具有广阔应用前景的成体干细胞,为组织工程技术提供了良好的细胞来源,但由于其作为成体干细胞仍然存在很多值得进一步研究的问题。但其成骨分化能力有限,制约了其在骨组织工程中的运用。二、研究目的本实验研究是体外培养人脂肪干细胞(ADSCs)后,给予自体富血小板纤维蛋白(Choukroun’s PRF)干预,并与对照组进行对比,观察自体富血小板纤维蛋白(Choukroun’s PRF)对人脂肪干细胞(ADSCs)增殖及成骨分化能力的影响,探讨一种可能增强脂肪干细胞增殖及成骨分化的技术,为骨组织工程的种子细胞提供一种新的技术和思路。三、方法 1.实验组织来源：所用脂肪来自于成人腹部脂肪抽脂术和骨科大腿手术获得的脂肪组织,供体共8位,为20～40岁患者,为2位珠江医院整形外科和6位骨科的就诊患者,无传染病及内分泌疾病,无长期服用药物史。静脉血来自相应脂肪来源的对应患者。 2.体外培养人脂肪干细胞,实验所用的细胞为第3代细胞。 3.人脂肪干细胞的鉴定：分别向骨细胞、脂肪细胞、神经球细胞定向诱导分化鉴定,并行细胞表面抗原CD29、CD45、CD90流式检测鉴定。 4.采用Choukroun法制备富血小板纤维蛋白(PRF)。 5.实验分组：本实验将普通细胞培养基中加入PRF与否,分为PRF组Ⅰ和对照组Ⅰ,并选择4个时间点(1d、3d、5d、7d)分别对比观察两组细胞增殖情况;成骨诱导培养基中加入PRF与否,分为PRF组Ⅱ和对照组Ⅱ,同样选择4个时间点(7d、14d、21d、28d),对比观察各时间点脂肪干细胞成骨诱导情况,并以不含PRF的普通细胞培养基组作为空白对照。每组样本量3-4例。 ***-8比色法制作标准曲线,检验测得的OD值与人脂肪干细胞数量之间的相关性。 ***-8试剂盒

关键词： Choukroun’s 富血小板纤维蛋白(Choukroun’s PRF) 脂肪来源干细胞(ADSCs) 体外培养细胞增殖成骨分化

拉枝处理对富士苹果M9-T337生长及生理的影响

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拉枝处理对富士苹果M9-T337生长及生理的影响

作者：刘元媛新疆农业大学

学位级别：硕士

我国是世界上苹果生产面积最大的国家,新疆是重要的苹果产区,上世纪我国进行了矮化砧木的应用,但矮化砧木对自根砧的研究近几年才兴起,相关研究较少;矮化自根砧的栽培中,整形修剪是非常重要的一项栽培措施,直接影响着苹果的产量和品质,... 详细信息

我国是世界上苹果生产面积最大的国家,新疆是重要的苹果产区,上世纪我国进行了矮化砧木的应用,但矮化砧木对自根砧的研究近几年才兴起,相关研究较少;矮化自根砧的栽培中,整形修剪是非常重要的一项栽培措施,直接影响着苹果的产量和品质,拉枝是果树管理中最有效的控制树体旺长并促进开花结果的措施。本文通过研究矮化自根砧富士苹果不同拉枝角度:50°(对照)、80°和110°,研究其对树体生长、光合、内源激素含量的影响,旨在探讨富士苹果营养生长和生殖生长发生转换的机理,为新疆苹果自根砧矮化密植栽培模式下提供科学且实用的整形修剪技术理论支持。经过研究,得出以下结论:(1)通过三种拉枝处理对果树生长量、百叶重、成花率的影响研究,发现:随着拉枝角度的提高,砧木地径、胸径的增长量随拉枝角度上升而增高,各生长指标之间均呈显著差异性。拉枝角度对株高、侧枝生长、新梢生长呈现显著负相关,百叶重、叶片含水率均以110°处理最高;(2)通过对三种拉枝处理下叶片光合、叶绿素荧光参数等指标的测定发现,110°处理净光合速率中表现最高,其次是50°(对照),二者显著高于80°处理;随拉枝角度的增加,最大光合值、光补偿点、暗呼吸速率以及决定系数均呈现上升趋势;三种拉枝角度处理中,叶片SPAD值随拉枝角度的增大而升高。不同拉枝角度下叶片Fv/Fm在一天中表现稳定,均为0.81～0.85之间,不同处理光能转换效率大致相同;(3)通过对三种拉枝处理下叶片总碳和总氮指标的测量表明:总碳含量中,三种处理总体表现为随时间(或季节)变化持续上升的趋势。其中,除了7月30日其余时间均为110°高于其他两个处理,处理间差异显著;叶片总氮含量三种处理总体表现为先下降后上升再下降的趋势;三种处理叶片C/N值中,叶片C/N值为80°>110°>50°(对照),三种处理间差异显著;(4)通过对三种拉枝处理下叶片内源激素的含量及其比值的测定和分析,拉枝角度与ABA含量、ABA/IAA、ABA/GA均呈现极显著正相关;与IAA含量、GA含量呈现极显著负相关;这说明,ABA含量、ABA/IAA和ABA/GA随着拉枝角度的升高逐渐升高,而IAA含量、GA含量则随着拉枝角度的升高而降低。综合上述结论,得出拉枝角度为110°时有利于养分积累和激素分配,因此富士矮化自根砧的整形修剪中进行拉枝为110°更有利于树体生长。

关键词：拉枝富士生长生理 M9-T337

中国男性时尚杂志对男性气质的建构 ——以《时尚先生》为例

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中国男性时尚杂志对男性气质的建构 ——以《时尚先生》为例

作者：刘元媛安徽大学

学位级别：硕士

1997年中国第一本男性时尚杂志《时尚先生》创刊,自此掀开了中国男性时尚杂志的发展大幕。经过10余年的发展,国内杂志市场上的男性时尚杂志数量仍在不断扩大。相比于目前女性时尚杂志市场的激烈竞争,未来男性时尚杂志市场可供开发和挖... 详细信息

1997年中国第一本男性时尚杂志《时尚先生》创刊,自此掀开了中国男性时尚杂志的发展大幕。经过10余年的发展,国内杂志市场上的男性时尚杂志数量仍在不断扩大。相比于目前女性时尚杂志市场的激烈竞争,未来男性时尚杂志市场可供开发和挖掘的空间更大。男性时尚杂志主要以中产阶层作为目标消费者,通过建构一系列的精英、成功人士等形象引导男性受众的生活方式、价值观念,并通过建构出的男性气质类型来引导受众成为杂志所推崇的男人。本文试图通过选择《时尚先生》作为研究个案,来探析中国男性时尚杂志是如何建构男性气质的。在多样化的男性气质类型中,《时尚先生》主要建构了什么样的男性气质,这一由传媒话语建构出的男性气质是否契合于主流社会的意识形态要求。在消费主义已渗透进社会各个层面的背景下,依靠广告盈利的《时尚先生》在建构男性气质时又会受到哪些影响。对此,本文对《时尚先生》的杂志封面人物、杂志内容采取内容分析并结合符号学的研究方法进行研究。研究发现,《时尚先生》所建构出的主要是一种霸权的男性气质类型。这一类型的男性气质在外形上表现为发达的肌肉、强健的体魄等阳刚之美。另外,杂志中具有霸权的男性气质的男性除了具有阳刚之美的外形气质,在性格上或是儒雅的绅士、具有暴力气质的“糙哥”或是具有精英意识的城市英雄。这些人物彰显的男性气质都是为主流社会所推崇、历来专属于男性的,在各种男性气质类型中也处于支配性地位。男性气质是不能离开女性气质而单独存在的。本文专门选取了杂志的女性专栏作为研究对象,发现杂志所呈现的女性形象并未如杂志所指称的那样被尊重,与男性处于平等的地位。杂志中的女性仍然作为被凝视的对象而存在,处于弱势地位的女性气质作为凸显男性气质的支配性地位而存在。

关键词：男性气质霸权的男性气质男性时尚杂志建构

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畅胰通腑汤治疗急性胰腺炎的临床观察

畅胰通腑汤治疗急性胰腺炎的临床观察

作者：刘元媛湖北中医药大学

学位级别：硕士

目的：该临床试验，是以自拟方畅胰通腑汤灌肠兼口服缓解轻度急性胰腺炎急性期症状，将辨证为腑实热结证的患者作为研究对象，为畅胰通腑汤的临床应用提供资料。方法：1.选取湖北省中医院2012年5月至2013年2月符合轻度急性胰腺炎中西... 详细信息

目的：该临床试验，是以自拟方畅胰通腑汤灌肠兼口服缓解轻度急性胰腺炎急性期症状，将辨证为腑实热结证的患者作为研究对象，为畅胰通腑汤的临床应用提供资料。方法：1.选取湖北省中医院2012年5月至2013年2月符合轻度急性胰腺炎中西医诊断标准的入院患者61例，根据就诊顺序，分为对照组30例，治疗组31例。通过分析两组患者的临床综合疗效评分，症状总积分，各症状积分，腹部压痛减轻程度、排便恢复情况及肠鸣音恢复情况，治疗前后CT分级构成，血淀粉酶，异常患者血糖恢复，白细胞计数，体温，舌脉，复发率比较两组疗效。 2.观察组在西医保守治疗基础上加用畅胰通腑汤，具体方法如下：中药汤剂由我院药剂科统一煎制成200ml袋装汤剂，在适当温度下选用恰当体位灌肠，每日两次，每次尽量保留灌肠半小时以上。直到患者腹痛腹胀情况缓解、肠鸣音恢复正常、可少量进食时停止灌肠，改口服，每日1剂，分2次服，每次100ml。对照组依照西医内科保守治疗。观察5天，10天后复查CT结果，临床观察结束后，记录各项数据。 3.畅胰通腑汤组方：生大黄(后下)12g、芒硝（冲泡）12g、厚朴12g、枳实15g、赤芍20g、桃仁9g、炒蒲黄8g、五灵脂8g、蒲公英30g、野菊花20g、黄芩10g、黄连6g、炙甘草10g。 4.统计学方法：数据统一采用SPSS21.0统计软件分析各项指标及数据。计量资料采用t检验，计数资料采X2检验，等级资料采用Ridit分析。检验水准a＝0.05，双侧检验，以P＜0.05为有差异，具有统计学意义。结果：1.改善积分和疗效方面观察组和对照组总有效率比较无显著性差异（P＞0.05），但两组愈显率比较有显著性差异（P＜0.05），提示观察组愈显率明显优于对照组。两组在治疗第5天临床各症状积分均有改善，观察组在改善各症状积分上均优于对照组（P＜0.05）。两组症状总积分均有显著改善（P＜0.01），且治疗后组间证候总积分比较有显著差异（P＜0.01），提示对照组对改善症状有显著疗效，优于对照组。在改善体征方面（腹部压痛、肠鸣音、排便情况）观察组显效率明显优于对照组（P＜0.01）。 2.影像学检查结果临床CT分级比照后，治疗后两组均较前有显著差异（P＜0.05），但组间无明显差异（P＞0.05），提示两组均能改善CT表现，但差异不大。 3.实验室检查结果血淀粉酶恢复正常天数上两组无显著性差异，异常血糖恢复方面，两组均有效（P＜0.01），组间差异不大。观察组白细胞计数下降至正常时间上有明显疗效，优于对照组。对照组与观察组在体温降至正常的天数比较中，有显著性差异（P＜0.05），提示观察组体温恢复时间短于对照组。使用畅胰通腑汤的观察组愈显率明显优于对照组。 4.改善舌脉结果观察组在恢复脉象正常的例数上疗效确切，明显优于对照组;脉象恢复正常例数的疗效也明显优于对照组（P＜0.05）。 5.复发率结果三月后回访观察复发率，提示观察组对照组的在改善复发率方面无明显差异性（P＞0.05）。结论：畅胰通腑汤在治疗急性胰腺炎急性期腑实热结证方面疗效确切，可以更加迅速改善腹痛等临床症状，减少患者痛苦，促进胰腺组织修复，加强胰腺、胃肠功能，是临床上安全有效的急性期实用方剂，灌肠方法可操作性强，用畅胰通腑汤灌肠治疗有广阔的前景。

关键词：急性胰腺炎腑实热结证畅胰通腑汤临床观察

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基于非合作博弈的蜂窝基站节能策略研究

基于非合作博弈的蜂窝基站节能策略研究

作者：刘元媛深圳大学

学位级别：硕士

近年来,4G网络的迅速发展,网络用户的增长使得无线蜂窝基站的数量也随之大幅度提升,虽然保证了用户的服务质量,但在通信负载低的时刻,许多基站处于闲置状态。又因为基站不工作时的能量消耗也能超过满载时能量消耗的一半,因此这些闲置的... 详细信息

近年来,4G网络的迅速发展,网络用户的增长使得无线蜂窝基站的数量也随之大幅度提升,虽然保证了用户的服务质量,但在通信负载低的时刻,许多基站处于闲置状态。又因为基站不工作时的能量消耗也能超过满载时能量消耗的一半,因此这些闲置的基站造成了很高的蜂窝网络能量消耗,使得蜂窝网络能量利用率被大大降低。因此涌现出大量的学者致力于减少宏基站的能量消耗,从而达到提高无线蜂窝网络能量利用率的目的。随着社会环境变得越来越复杂,微蜂窝技术在宏蜂窝的技术上应运而生。微蜂窝基站有其传输功率低、体积小、覆盖范围小等特征,并且微蜂窝基站一般是零散地分布在热点地区,数量较小,最开始没有引起人们对它进行优化的重视。但是随着4G网络的迅猛发展,用户在一些特定场所如:地下停车场,地下超市和一些高密度话务量的小区域也有较高的通信服务要求,因而微蜂窝层的站点数量也就越来越多,微基站个数已由点连成片,传输成本占整个设备投资的比例已经大于宏蜂窝基站。当前,国家各领域都蓬勃发展,环境保护节约能源已被提上日程,根据实际情况对微蜂窝基站进行合理的优化变得尤为要。本文的研究目的是减少基站的能量消耗和环境污染,降低碳燃料排放量,从而符合未来绿色能源发展战略。本文首先研究多运营商共享基站从而达到节能目的的问题,提出了对宏基站运用一种新的博弈理论方法。我们建立的仿真模型是让两个运营商服务于同一片区域,他们使用非合作博弈来决定他们的宏基站开关方案和用户漫游策略,以及空闲基站的关闭时间段。仿真结果表明该方案在不影响阻塞率的前提下的确可以提高通信系统的能量利用率。本文从宏蜂窝基站的优化中受到启发,因此在微蜂窝基站节能这一块主要运用的方法是:先建立非合作博弈模型,根据实时流量决策出在一片区域内要关闭的微基站数量,同时从基站智能关闭策略与基站发射功率优化这两个层面入手,研究微基站节能的一个全局优化策略。仿真结果表明,这种方法确实能够节省能耗,提高能量利用率。

关键词：无线蜂窝网络非合作博弈全局优化策略能量利用率

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国潮文化视域下本土美妆品牌营销策略研究

国潮文化视域下本土美妆品牌营销策略研究

作者：刘元媛上海师范大学

学位级别：硕士

伴随着中国综合实力的迅速提升,符合时代前沿且具有中国特色的国潮文化正在向世界输出着中国潮流文化新思路。在国潮文化的浪潮中,本土美妆品牌呈现出比以往更加强劲的发展势头。国潮文化引领了新的消费热潮,本土美妆品牌针对新时代的... 详细信息

伴随着中国综合实力的迅速提升,符合时代前沿且具有中国特色的国潮文化正在向世界输出着中国潮流文化新思路。在国潮文化的浪潮中,本土美妆品牌呈现出比以往更加强劲的发展势头。国潮文化引领了新的消费热潮,本土美妆品牌针对新时代的消费特征正在进行自我焕新和营销策略升级。鉴于此,本文选取本土美妆品牌作为研究对象,通过对于研究视角国潮文化的理论阐释,将本土美妆品牌这一研究主体的发展概况进行梳理后,分析得出本土美妆品牌进行国潮化营销的可行性。结合以传统型、新锐型和文化IP型为代表的本土美妆品牌国潮化营销的具体案例,探析本土美妆品牌在产品策略、渠道策略、推广策略层面所呈现出的品牌营销现状及特征,并点明其发展瓶颈。国潮文化视域下,本土美妆品牌首先通过迎合消费者偏好和诉求进行精准化的市场选择和产品定位,凭借图形、色彩、包装三大设计元素打造产品视觉营销策略。其次发挥出电商引流平台、社交媒体矩阵、线下体验营销的多重渠道优势使品牌营销广泛触达国潮文化消费者。最后,本土美妆品牌汇聚国潮文化力量以跨界营销、整合营销、情感营销的推广方式助推品牌破圈变革,提高品牌认同感,进而实现推广策略的效果最大化。在国潮文化的推动下,本土美妆品牌的营销策略在不断自我迭代,扩大品牌营销效应,提升品牌营销价值,用国潮化营销的魅力震撼当下美妆市场。借助国潮文化布局的营销策略为本土美妆品牌带来积极影响的同时,也暴露出些许不足。比如盲目跟风同质化、缺乏内涵表面化和短期热点化的营销策略问题制约了本土美妆品牌长期稳定健康发展,这些值得进一步反思和研究。

关键词：国潮文化本土美妆品牌品牌营销策略

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苦芪甘颗粒的质量及应用研究

苦芪甘颗粒的质量及应用研究

作者：刘元媛辽宁中医药大学

学位级别：硕士

本课题是将有临床用药经验的验方研制开发成一种治疗病毒性心肌炎的新药——苦芪甘颗粒剂。本试验对该方进行了组方研究、制备工艺研究、质量标准研究、药效学研究。采用体外抗病毒试验对该方的组方及配比进行研究，依据抗病毒作用效果... 详细信息

本课题是将有临床用药经验的验方研制开发成一种治疗病毒性心肌炎的新药——苦芪甘颗粒剂。本试验对该方进行了组方研究、制备工艺研究、质量标准研究、药效学研究。采用体外抗病毒试验对该方的组方及配比进行研究，依据抗病毒作用效果并结合临床用药经验确定了该方的最佳组方及配比。采用正交试验法摸索了该方的最佳提取工艺以及适合的剂型，初步确定了该方的提取工艺和成型工艺。质量标准研究中采用薄层色谱法对黄芪、苦参、甘草分别进行了定性研究，采用HPLC-ELSD色谱法对黄芪甲苷进行了含量测定，经方法学考察，其精密度、稳定性、重复性、回收率等均符合有关规定。药效学研究部分研究了该方对机体免疫力的影响，结果证明该方具有增强机体免疫力的作用。本课题基本上完成了新药开发的临床前期研究工作，为进一步的临床试验奠定了基础，同时也为市场开发提供了坚实的基础。

关键词：苦芪甘颗粒质量研究高效液相色谱法正交实验药效学