检索结果-南通市图书馆

犬细小病毒河南方城株分离及VP2基因序列分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国动物传染病学报 2023年第3期31卷 54-61页

作者：林瑜婷翟颀翟少伦吕殿红周秀蓉贾春玲霍玮温肖会魏文康仲恺农业工程学院动物科技学院广州510225 广东省农业科学院动物卫生研究所、广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广州510640 广东省农业科学院农业生物基因研究中心广州510640

为了解犬细小病毒的临床流行及变异情况,本研究于河南省方城县采集了8份疑似CPV感染犬粪便样品,经过PCR检测、CRFK细胞增殖培养、透射电镜观察和病毒滴度测定后,对其VP2基因进行序列分析。结果表明5株分离株为犬细小病毒,病毒滴度分别为... 详细信息

为了解犬细小病毒的临床流行及变异情况,本研究于河南省方城县采集了8份疑似CPV感染犬粪便样品,经过PCR检测、CRFK细胞增殖培养、透射电镜观察和病毒滴度测定后,对其VP2基因进行序列分析。结果表明5株分离株为犬细小病毒,病毒滴度分别为10^(-4.22)/0.1 mL(China-HN-01株)、10^(-3.56)/0.1 mL(China-HN-02株)、10^(-3.78)/0.1 mL(China-HN-05株)、10^(-4.4)7/0.1 mL(China-HN-06株)、10^(-4.4)/0.1 mL(China-HN-07株)。VP2基因序列比对和遗传进化树分析结果显示,4株分离株基因型为New CPV-2a,1株分离株基因型为CPV-2c,5株分离株与疫苗株的同源性为97.8%~98.7%,与国内外参考毒株的同源性为94.0%~99.0%,4株New CPV-2a基因型毒株与四川的Canine/China/24/2017株亲缘关系最近,CPV-2c基因型毒株与蒙古国5-MGL分离株位于同一分支,与我国河南地区的3株CPV-2c毒株亲缘关系较远。对河南方城地区CPV毒株的分析,为研究CPV变异株在河南地区的传播和宠物疫病防控提供了理论依据。

关键词：犬细小病毒分离 VP2基因进化分析

地克珠利对柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶特性影响研究

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

地克珠利对柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶特性影响研究

中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：李莎董辉赵其平韩红玉朱顺海翟颀梁思婷杨斯涵黄兵中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海师范大学生命与环境科学学院云南农业大学动物科学技术学院

地克珠利是一种三嗪类化合物,具有高效、低毒、广谱的抗球虫效力,但至今其作用机制尚不清楚。研究表明,柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药株LDH(rEtLDH)与敏感株LDH(sEtLDH)之间同工酶谱存在明显差异,提示EtLDH与地克珠利抗球虫作用机理有一... 详细信息

地克珠利是一种三嗪类化合物,具有高效、低毒、广谱的抗球虫效力,但至今其作用机制尚不清楚。研究表明,柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药株LDH(rEtLDH)与敏感株LDH(sEtLDH)之间同工酶谱存在明显差异,提示EtLDH与地克珠利抗球虫作用机理有一定关系。本研究比较了sEtLDH与rEtLDH基因特性的差异以及研究了地克珠利对***孢子化过程中LDH的影响研究。结果显示,sEtLDH与rEtLDH仅在第914位有1个碱基的差异,编码蛋白仅在第305位有1个氨基酸的差异;在球虫4个不同发育阶段(未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和第二代裂殖子)中,每个阶段sEtLDH基因的转录水平明显高于相应的rEtLDH(P<0.01);且rEtLDH蛋白在第二代裂殖子阶段的相对表达量比sEtLDH下降了55.32%(P<0.01);建立EtLDH催化反应体系,正、逆反应的最适温度分别为50C、40C,最适pH分别为6.00、7.00,孢子化卵囊中rEtLDH的催化活力是sEtLDH的78.66%(P<0.01)。经地克珠利处理后未孢子化卵囊的孢子化率为对照组的66.32%(P<0.01),药物组EtLDH氧化、还原反应催化活力分别为对照组的44.39%(P<0.01)、115.76%(P<0.01),转录水平为对照组的59.18%(P<0.01),而蛋白的翻译水平为对照组的80.39%(P<0.05)。推测地克珠利通过抑制糖酵解途径发挥抗球虫作用。

关键词：球虫地克珠利乳酸脱氢酶耐药性

华南地区牛结节性皮肤病病毒全基因组测序及分析

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医学报 2023年第2期43卷 260-268页

作者：周秀蓉黄敏霞徐志宏温肖会罗胜军贾春玲高原翟颀吕殿红广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站/岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心广东广州510640 仲恺农业工程学院动物科技学院广东广州510225 珠海市启信达生物科技有限公司广东珠海519000

为了对2020年我国华南地区牛结节性皮肤病(lumpy skin disease,LSD)疫情进行溯源调查,本研究采用商品化检测试剂盒和透射电镜对2份华南地区疑似感染的牛皮肤结节组织样本进行鉴定,利用高通量测序技术进行病毒全基因组测序,并对其进行序... 详细信息

为了对2020年我国华南地区牛结节性皮肤病(lumpy skin disease,LSD)疫情进行溯源调查,本研究采用商品化检测试剂盒和透射电镜对2份华南地区疑似感染的牛皮肤结节组织样本进行鉴定,利用高通量测序技术进行病毒全基因组测序,并对其进行序列比对、遗传进化和病毒重组分析。qPCR检测结果显示2份样本均为牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)阳性,电镜观察到典型LSDV病毒粒子形态,将其命名为China/GD02/2020株和China/GX01/2020株,获得全基因组序列上传GenBank获得登录号分别为OM803091和OM803092。对病毒全基因组序列比对及遗传进化分析显示GD02和GX01株的核苷酸相似性达到99.99%,并与2020年中国台湾、中国香港和越南的LSDV分离株处于进化树的同一小分支,且均归属为重组病毒。病毒重组分析表明2株病毒的主要亲本为南非疫苗株(Neethling vaccine LW 1959),次要亲本为摩洛哥从牛分离的田间株(LSD/KSGP 0240/Morocco/2017)和南非野毒株(Neethling Warmbaths LW)等。本研究对国内LSDV流行毒株的遗传演化、溯源和防控具有借鉴意义。

关键词：华南地区牛结节性皮肤病病毒全基因组测序

柔嫩艾美耳球虫保守蛋白CHP39基因特性的初步研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

柔嫩艾美耳球虫保守蛋白CHP39基因特性的初步研究

中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：翟颀黄兵董辉朱顺海赵其平梁思婷李莎杨斯涵韩红玉中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海师范大学生命与环境科学学院云南农业大学动物科学技术学院

本实验室前期利用酵母双杂交技术,以柔嫩艾美耳球虫顶体膜抗原1(EtAMA1)为诱饵,筛选了柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库,获得一些潜在的与EtAMA1相互作用蛋白的ESTs序列。本研究选择其中一条编号为CHIP39的EST序列进行研究。该... 详细信息

本实验室前期利用酵母双杂交技术,以柔嫩艾美耳球虫顶体膜抗原1(EtAMA1)为诱饵,筛选了柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库,获得一些潜在的与EtAMA1相互作用蛋白的ESTs序列。本研究选择其中一条编号为CHIP39的EST序列进行研究。该序列含有3,末端的Ploy(A)尾,利用5’RACE技术获得了该基因的全长cDNA序列,并对该基因的生物信息学信息、转录水平分析、免疫定位分析和体外抑制等进行了研究。研究结果表明,该基因全长1344bp,ORF长873bp,编码290个氨基酸,预测分子量为32.6kDa,无跨膜结构和信号肽,没有保守结构域,具有多个抗原位点,与柔嫩艾美耳球虫保守的假象蛋白(hypothetical protein,conserved,ETH 00029745)100%同源,因此,将该基因命名为EtCHP39。EtCHP39基因在球虫4个发育阶段均有转录,但转录水平不同,其中在孢子化卵囊阶段转录水平最高,其次在未孢子化卵囊的转录水平高于子孢子和裂殖子的,表明其转录水平受到虫体阶段性的调控。对EtCHP39蛋白进行原核表达,纯化,制备多抗。Western-blot分析表明重组蛋白EtCHP39具有良好的抗原性。采用间接免疫荧光技术对EtCHP39蛋白在球虫不同发育阶段的分布进行了分析,发现其在入侵前主要位于子孢子的顶端,当准备入侵时分泌到子孢子的表面以及顶端;子孢子入侵细胞2h后,该蛋白主要位于虫体的顶端,24h后,蛋白的表达增加,且逐渐往虫体的后端分泌,当虫体发育为裂殖子时,该蛋白主要位于裂殖子的顶端。通过体外抑制实验检测不同浓度的EtCHP39多抗对子孢子入侵DF-1细胞的影响,发现anti-rEtCHP39抗体作用子孢子后,与对照组相比,子孢子入侵DF-1细胞的能力下降,且随着抗体浓度的不断增大,作用后子孢子入侵力逐渐降低,抗体抑制率逐渐升高,当抗体浓度为400μg/mL,抑制率为30%左右。以上结果为进一步研究柔嫩艾美耳球虫CHP39蛋白的功能提供了重要参考依据。

关键词：球虫顶体膜抗原1 保守蛋白 EtCHIP39 入侵

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

1株竹鼠奇异变形杆菌的分离鉴定及药敏分析

中国动物传染病学报 2021年第1期29卷 94-97页

作者：翟颀翟少伦吕殿红温肖会吴国景霍玮涂杜魏文康贾春玲周秀蓉广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广州510640

为确定广东某竹鼠养殖场发生竹鼠死亡的原因,本研究从发病竹鼠血液和组织中分离到可疑细菌,并对分离的菌株进行革兰氏染色、生化特性分析和16S rRNA基因鉴定及序列分析,同时进行药敏试验。结果显示:分离的细菌为杆状、球状和球杆状形状... 详细信息

为确定广东某竹鼠养殖场发生竹鼠死亡的原因,本研究从发病竹鼠血液和组织中分离到可疑细菌,并对分离的菌株进行革兰氏染色、生化特性分析和16S rRNA基因鉴定及序列分析,同时进行药敏试验。结果显示:分离的细菌为杆状、球状和球杆状形状不一的革兰氏阴性菌;生化特性与奇异变形杆菌基本一致;16S rRNA序列与NCBI数据库中奇异变形杆菌16S rRNA核苷酸相似性为99%以上。结果表明,该分离细菌为奇异变形杆菌将其命名为GD/ZS-01株;药敏实验显示,该菌株对头孢哌酮、丁胺卡那和左氧氟沙星高度敏感。本研究结果为竹鼠养殖场疫情的防治提供了科学参考。

关键词：竹鼠奇异变形杆菌分离鉴定耐药性

感染日本血吸虫前后东方田鼠血清补体的动态变化和杀虫作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国动物传染病学报 2019年第1期27卷 63-69页

作者：柴淑梅张倩翟颀余新刚洪炀陆珂李浩林矫矫谢建芸傅志强中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241 上海实验动物研究中心上海201203

东方田鼠是迄今为止发现的唯一一种具有天然抗日本血吸虫病特性的哺乳动物,但具体抗病机制尚不明确。本研究应用组织培养法比较了东方田鼠和BALB/c鼠感染日本血吸虫尾蚴后1、3、8、12、15 d的皮肤、肺脏和肝脏中童虫回收情况,结果表明... 详细信息

东方田鼠是迄今为止发现的唯一一种具有天然抗日本血吸虫病特性的哺乳动物,但具体抗病机制尚不明确。本研究应用组织培养法比较了东方田鼠和BALB/c鼠感染日本血吸虫尾蚴后1、3、8、12、15 d的皮肤、肺脏和肝脏中童虫回收情况,结果表明东方田鼠对日本血吸虫的杀伤主要发生在感染后1～3 d和8～12 d。应用RT-PCR和ELISA检测东方田鼠和BALB/c鼠的补体相关分子C3、C9、CD59和DAF的转录水平,结果显示BALB/c小鼠各指标变化不明显,东方田鼠感染后8 d各因子转录水平显著升高。体外杀虫试验结果显示,东方田鼠正常血清和灭活补体血清孵育的日本血吸虫童虫死亡率分别为85.50%±7.15%和60.99%±8.61%,差异具有显著统计学意义(P <0.001)。结果表明东方田鼠补体对日本血吸虫童虫具有显著杀伤效果,东方田鼠早期对日本血吸虫的杀伤作用可能和补体相关。

关键词：东方田鼠日本血吸虫补体 BALB/c小鼠

柔嫩艾美耳球虫沉默信息调节因子2真核表达质粒的构建及其免疫保护性评价

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

柔嫩艾美耳球虫沉默信息调节因子2真核表达质粒的构建及其免疫保...

中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：杨斯涵韩红玉赵其平朱顺海黄兵翟颀李莎梁思婷董辉杨亮宇中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室云南农业大学动物科学技术学院上海师范大学生命与环境科学学院

为构建柔嫩艾美耳球虫沉默信息调节因子2(Eimeria tenella silent information regulator 2,EtSIR2)的真核表达质粒,以柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子cDNA为模板,PCR扩增出EtSIR2基因,PCR产物经酶切回收纯化目的片段后与经相应酶切的真核... 详细信息

为构建柔嫩艾美耳球虫沉默信息调节因子2(Eimeria tenella silent information regulator 2,EtSIR2)的真核表达质粒,以柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子cDNA为模板,PCR扩增出EtSIR2基因,PCR产物经酶切回收纯化目的片段后与经相应酶切的真核表达载体pCAGGs连接,连接产物经PCR和酶切鉴定,再经测序鉴定正确后,分别转染DF-1细胞和BHK细胞进行表达,分别用Western blot和间接免疫荧光鉴定EtSIR2基因的表达情况。结果,成功扩增了EtSIR2基因,长度为909 bp,Western blot可见大小约为37 kDa的表达蛋白条带,间接免疫荧光可以检测到特异性绿色荧光,表明成功构建了EtSIR2的真核表达质粒pCAGGs-EtSIR2,并能在哺乳动物细胞和禽类细胞中表达。将构建的重组质粒pCAGGs-EtSIR2、重组蛋白EtSIR2、空质粒pCAGGs分别免疫7日龄雏鸡,同时设置非免疫攻虫组和非免疫非攻虫组。14天后进行二免,二免后第7d除了非免疫非攻虫组之外,其余各组用柔嫩艾美耳球虫上海株孢子化卵囊1×10进行攻虫,检测鸡的增重、盲肠病变记分、卵囊产量等生理指标。同时,在不同时间段采血和脾脏,分别进行抗体水平和淋巴细胞增殖与亚群的检测,通过多个指标进行免疫效果评价。结果显示,重组质粒对免疫期间的增重影响最小。重组质粒组攻虫后的增重与健康非免疫组相当,明显高于攻虫非免疫组(p0.05)。重组质粒组和重组蛋白组的病变记分和卵囊减少率相当,均明显低于攻虫非免疫组(p0.05);各组之间CD8/CD3T差异不显著。结果表明,重组质粒和重组蛋白对感染球虫鸡均具有一定的保护效果,但在生理指标方面,重组质粒组稍好于重组蛋白组,而重组蛋白在诱导抗体水平和T淋巴细胞水平方面稍优于重组质粒组。

关键词：柔嫩艾美耳球虫沉默信息调节因子2 真核表达动物保护实验

牛星状病毒和牛病毒性腹泻病毒及牛传染性鼻气管炎病毒三重荧光PCR方法的建立与应用

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2023年第10期53卷 1242-1248页

作者：赵亮温肖会翟颀李家奎贾春玲周秀蓉王焕硕吕殿红罗胜军广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站/岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心广东广州510640 西藏农牧学院动物科学学院西藏林芝860000 华中农业大学动物科技学院/动物医学院湖北武汉430070

为快速同时检测牛星状病毒(BAstV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV),本研究针对BAstV基因组ORF1a基因、BVDV基因组多聚蛋白基因和IBRV基因组g B基因的保守区域各设计特异性引物和探针,经反应体系和扩增程序优化,... 详细信息

为快速同时检测牛星状病毒(BAstV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV),本研究针对BAstV基因组ORF1a基因、BVDV基因组多聚蛋白基因和IBRV基因组g B基因的保守区域各设计特异性引物和探针,经反应体系和扩增程序优化,建立了BAstV、BVDV和IBRV三重荧光PCR检测方法,对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,并应用该方法对临床样品进行检测。结果显示,该方法可扩增BAstV、BVDV和IBRV的核酸,不能对多杀性巴氏杆菌(Pm)、B型牛鼻炎病毒(BRBV)、口蹄疫病毒(FMDV)等病原的核酸进行扩增,特异性较强;对BAstV、BVDV和IBRV的最低检测限(LOD)均为305copies/μL,敏感性较高;检测BAstV、BVDV和IBRV的组内、组间重复性试验变异系数(CV)值均小于3%,重复性较好。应用该方法检测100份临床样品,BAstV、BVDV、IBRV的阳性检出率分别为0、11%、6%。本研究建立的三重荧光PCR方法具有敏感性高、特异性强、在同一反应体系中可以快速鉴别检测BAstV、BVDV、IBRV等优点,可应用于临床BAstV、BVDV、IBRV感染的检测。

关键词：牛星状病毒牛病毒性腹泻病毒牛传染性鼻气管炎病毒三重荧光PCR

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

喜鹊和山斑鸠体内棘口科吸虫的种类鉴定

喜鹊和山斑鸠体内棘口科吸虫的种类鉴定

中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会

作者：梁思婷董辉朱顺海韩红玉赵其平吴迪翟颀李莎杨斯涵裴恩乐黄兵上海师范大学生命与环境科学学院中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海市野生动植物保护管理站云南农业大学动物科学技术学院

棘口科吸虫是主要寄生于鸟类和哺乳类动物肠道的小型寄生虫,种类多,呈世界性分布。己记录的棘口科吸虫有600多种,其中400多种寄生于鸟禽类,近70种寄生于哺乳动物,20余种寄生于人体。随着人类生活水平的提高,人与鸟类的接触越来越频繁,... 详细信息

棘口科吸虫是主要寄生于鸟类和哺乳类动物肠道的小型寄生虫,种类多,呈世界性分布。己记录的棘口科吸虫有600多种,其中400多种寄生于鸟禽类,近70种寄生于哺乳动物,20余种寄生于人体。随着人类生活水平的提高,人与鸟类的接触越来越频繁,人类感染棘口科吸虫的机会大大增高。因此,对棘口科吸虫的研究,不仅有利于鸟类寄生虫病的防控,而且有利于提高人们防范人兽共患寄生虫病的意识,具有重要的公共卫生学意义。本课题组于2012年对来源于曹家渡花鸟市场和龙川北路花鸟市场的103只鸟类进行了寄生虫感染情况调查,共检出吸虫268条。随后,我们对来源于喜鹊(Picapica)和山斑鸠(Streptopelia orientalis)肠道吸虫进行了初步形态学鉴定,其中有17条为棘口科吸虫。为鉴定喜鹊和山斑鸠体内棘口吸虫种类,本文采用形态学结合分子生物学方法对其进行了种类鉴定。分子生物学结果显示,来源于喜鹊和山斑鸠虫体的线粒体NADH脱氢酶1(ND1)基因同源性为99%,在构建的系统发育树中,两种鸟的虫体ND1序列归类在同一分支,与其亲缘关系最近的是强壮棘口吸虫(Echinostoma robustum)和弗氏棘口吸虫(***)。形态学观测结果显示,来自同一种鸟的虫体具有相似的形态结构,而两种鸟之间的虫体形态存在一定差异;通过比较所获得虫体与强壮棘口吸虫、弗氏棘口吸虫之间的形态特征,发现这两种鸟体内检出的棘口吸虫均与弗氏棘口吸虫的的形态特征更为相符。结合分子生物学和形态学鉴定的结果,确定感染喜鹊和山斑鸠的棘口科吸虫均为弗氏棘口吸虫,这是弗氏棘口吸虫在国内的首次报道,喜鹊和山斑鸠应为弗氏棘口吸虫的新宿主。

关键词：喜鹊山斑鸠棘口属 NADH脱氢酶1 弗氏棘口吸虫