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基于P32蛋白的山羊痘病毒抗体荧光微球检测方法的建立

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畜牧与兽医 2024年第4期56卷 89-94页

作者：孟卫芹王金良吴信明唐娜李通石竞楠董帅沈志强山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 青岛农业大学动物医学院山东青岛266109 内蒙古民族大学生命科学与食品学院内蒙古通辽028000 河北工程大学生命科学与食品工程学院河北邯郸056000

为建立一种山羊痘病毒(GTPV)抗体快速检测方法,试验将携带GTPV结构蛋白P32基因的重组质粒pET28a-P32转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后获得了重组蛋白,纯化后经Western blot鉴定表明该蛋白具有良好的特异性和反应原性... 详细信息

为建立一种山羊痘病毒(GTPV)抗体快速检测方法,试验将携带GTPV结构蛋白P32基因的重组质粒pET28a-P32转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后获得了重组蛋白,纯化后经Western blot鉴定表明该蛋白具有良好的特异性和反应原性。以荧光微球为标记材料对P32蛋白进行标记,通过优化反应条件制备了快速检测GTPV抗体的荧光微球免疫层析试纸条,并对其性能进行评价。结果:该试纸条与山羊副流感病毒3型(CPIV3)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、羊口疮病毒(ORFV)的阳性血清均无交叉反应;阳性血清稀释至800倍仍能检出阳性,敏感性较高;批内变异系数小于10%,批间变异系数小于15%,稳定性较好;与ELISA检测方法对比的总符合率为92.5%。综上,本试验建立的荧光微球试纸条可用于GTPV抗体的快速检测和流行病学调查。

关键词：山羊痘病毒 P32蛋白荧光微球抗体

基于N蛋白小反刍兽疫病毒单克隆抗体的制备及阻断ELISA方法的建立

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中国兽医学报 2024年第5期44卷 935-939页

作者：孟卫芹董帅陈金龙唐娜石竞楠郭璐宋晶晶王金良山东省滨州畜牧兽医研究院河北工程大学生命科学与食品工程学院石河子大学动物科技学院内蒙古民族大学生命科学与食品学院

为建立一种小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体的快速检测方法,本研究将pET-32a-N重组质粒转化至*** BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达、纯化获得重组蛋白并免疫BALB/c小鼠,制备了抗PPRV-N蛋白的单克隆抗体并进行HRP标记,通过优化反应条件... 详细信息

为建立一种小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体的快速检测方法,本研究将pET-32a-N重组质粒转化至*** BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达、纯化获得重组蛋白并免疫BALB/c小鼠,制备了抗PPRV-N蛋白的单克隆抗体并进行HRP标记,通过优化反应条件建立了PPRV阻断ELISA抗体检测方法。经评价该方法与PIV、GTPV、ORFV的阳性血清均无交叉反应;最低能检出1∶160稀释的阳性血清;批内和批间变异系数(Cv)均小于10%;通过对180份临床血清样品进行检测,该方法与竞争ELISA试剂盒的符合率为96%。表明建立的阻断ELISA方法具有良好的特异性、敏感性与可重复性,可用于PPRV抗体的检测,为PPRV疫苗的免疫效果评估及疫病防控提供了技术支持。

关键词：小反刍兽疫 N蛋白单克隆抗体阻断ELISA

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马铃薯采后绿变控制及品质保持技术研究

马铃薯采后绿变控制及品质保持技术研究

作者：孟卫芹山东农业大学

学位级别：硕士

马铃薯见光后表皮及内部组织易绿变，绿变的马铃薯不仅感官品质下降，而且伴有有毒物质龙葵素的生成，带来食用安全风险，影响市场销售和消费者健康。避光包装是国内外防止绿变的常用措施，但这不利于货架销售。见光不绿变、不产生龙葵... 详细信息

马铃薯见光后表皮及内部组织易绿变，绿变的马铃薯不仅感官品质下降，而且伴有有毒物质龙葵素的生成，带来食用安全风险，影响市场销售和消费者健康。避光包装是国内外防止绿变的常用措施，但这不利于货架销售。见光不绿变、不产生龙葵素是国内外马铃薯采后研究的技术难题。本课题研究了NaCl胁迫、高二氧化碳、超低氧及乙醇熏蒸处理对马铃薯绿变及品质变化的影响，旨在寻求见光条件下，控制马铃薯绿变及品质保持的有效措施。研究结果表明： 1. NaCl胁迫处理明显延缓了马铃薯绿变的发生，见光对照第4天绿变，而NaCl胁迫12h处理，第8天开始绿变。NaCl胁迫处理还抑制了发芽，并降低了表皮龙葵素的产生，但引起马铃薯轻微腐烂。其综合感官品质好于见光对照，但明显低于黑暗对照。 2.与见光对照相比，高二氧化碳处理能够明显抑制马铃薯表皮叶绿素含量的升高，绿变均延缓了6天，发芽也显著推迟。高二氧化碳处理还可以抑制马铃薯中龙葵素的产生，常温货架期12天后，高二氧化碳各处理马铃薯的综合品质明显好于见光和黑暗对照，其中高二氧化碳24h处理的，绿变控制和品质保持效果最好。 3.超低氧处理对马铃薯表皮叶绿素合成有明显的阻碍作用，绿变程度较轻，并有效抑制其发芽和龙葵素的产生，其主要的品质指标淀粉、还原糖、Vc等含量随着贮藏时间的延长而发生变化。淀粉含量呈先上升后下降的趋势，还原糖含量呈下降趋势，Vc含量有所降低，但超低氧处理与对照相比保持了较好的贮藏品质，延长了货架期。 4.乙醇熏蒸处理有效控制了马铃薯表皮叶绿素的产生，处理浓度越高控制绿变效果越好。贮藏到12天，1000μL/L乙醇熏蒸处理的绿变仍不明显，但见光对照在第3天即绿变;黑暗与见光对照龙葵素含量增加，但乙醇熏蒸处理降低了龙葵素含量，且较好的抑制了发芽。贮藏期间还原糖含量降低，淀粉含量有所回升，与对照相比Vc含量较高，适宜浓度和时间的乙醇熏蒸处理较好地保持了马铃薯的贮藏品质。因此，乙醇熏蒸可以作为保证马铃薯采后食用安全的一种有效措施。

关键词：马铃薯采后绿变品质

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乙醇熏蒸对马铃薯绿变和α-茄碱含量的影响

食品与发酵工业 2012年第5期38卷 134-137页

作者：孟卫芹王庆国山东农业大学食品科学与工程学院山东泰安271018

研究不同浓度乙醇熏蒸处理对马铃薯绿变和α-茄碱含量的影响。结果表明:在光照条件下,马铃薯表皮绿变程度和α-茄碱含量随着贮藏时间的延长而增加;不同浓度乙醇熏蒸处理可有效控制马铃薯绿变并对α-茄碱具有降解作用,贮藏到12 d,马铃薯... 详细信息

研究不同浓度乙醇熏蒸处理对马铃薯绿变和α-茄碱含量的影响。结果表明:在光照条件下,马铃薯表皮绿变程度和α-茄碱含量随着贮藏时间的延长而增加;不同浓度乙醇熏蒸处理可有效控制马铃薯绿变并对α-茄碱具有降解作用,贮藏到12 d,马铃薯表皮叶绿素含量与α-茄碱含量明显低于对照,其中1 000μL/L乙醇熏蒸处理效果最佳。

关键词：马铃薯绿变 α-茄碱乙醇熏蒸

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玉米油中玉米赤霉烯酮的ELISA测定

现代食品科技 2013年第6期29卷 1431-1433页

作者：孟卫芹武玉香唐世云沈志强山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600 山东滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600

用间接竞争酶联免疫分析法(ELISA法)对3种玉米油中的玉米赤霉烯酮残留进行了测定,以评价试剂盒的性能。结果表明,标准曲线线性方程y=-2.2x+0.66,相关系数r为0.9974,IC50为0.29μg/kg,线性范围为0.05-4.05μg/kg,灵敏度为0.05μg/kg,添... 详细信息

用间接竞争酶联免疫分析法(ELISA法)对3种玉米油中的玉米赤霉烯酮残留进行了测定,以评价试剂盒的性能。结果表明,标准曲线线性方程y=-2.2x+0.66,相关系数r为0.9974,IC50为0.29μg/kg,线性范围为0.05-4.05μg/kg,灵敏度为0.05μg/kg,添加回收率均大于85%。该法测定玉米赤霉烯酮灵敏度高,重复性好,特异性高,适合用于检测各种玉米油中的玉米赤霉烯酮残留。

关键词：玉米油玉米赤霉烯酮酶联免疫检测法

鲁北地区猪用饲料及原料霉菌毒素的检测与分析

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黑龙江畜牧兽医 2016年第3期 272-275页

作者：李峰唐世云吕素芳孟卫芹苗立中武玉香李玲山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600

为了初步掌握鲁北地区猪用饲料及原料中霉菌毒素污染的数据资料和规律,试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对滨城、博兴等9个县区94家不同规模猪场332份饲料及原料样品进行了黄曲霉毒素(AF)、呕吐毒素(DON)、玉米赤霉烯酮(ZON)、赭曲... 详细信息

为了初步掌握鲁北地区猪用饲料及原料中霉菌毒素污染的数据资料和规律,试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对滨城、博兴等9个县区94家不同规模猪场332份饲料及原料样品进行了黄曲霉毒素(AF)、呕吐毒素(DON)、玉米赤霉烯酮(ZON)、赭曲霉毒素(OTA)4种霉菌毒素的检测。结果表明:AF、DON、ZON、OTA平均值分别为0.5μg/kg、409.5μg/kg、96.2μg/kg、2.7μg/kg,证明该区域饲料及原料存在不同程度的霉菌毒素污染,其中DON、ZON的检出率和超标率较高,其检出率分别为96.99%、72.59%,超标率分别为8.43%、3.92%。

关键词：鲁北地区猪用饲料与原料霉菌毒素酶联免疫吸附试验(ELISA) 检测

高二氧化碳处理对马铃薯绿变和龙葵素含量的影响

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农学学报 2012年第8期2卷 13-16页

作者：孟卫芹王庆国山东农业大学食品科学与工程学院山东泰安271018

为了研究高二氧化碳处理对马铃薯绿变和龙葵素含量的影响,研究了光照贮藏期间,不同时间高二氧化碳处理后马铃薯表皮a值、叶绿素和龙葵素含量的变化。结果表明,随着贮藏时间的延长马铃薯表皮a值下降,颜色趋于绿色,高二氧化碳处理能够抑... 详细信息

为了研究高二氧化碳处理对马铃薯绿变和龙葵素含量的影响,研究了光照贮藏期间,不同时间高二氧化碳处理后马铃薯表皮a值、叶绿素和龙葵素含量的变化。结果表明,随着贮藏时间的延长马铃薯表皮a值下降,颜色趋于绿色,高二氧化碳处理能够抑制马铃薯表皮a值的降低,贮藏期间HCO2-24处理表皮a值最高;叶绿素含量均有所升高,贮藏到12天,对照叶绿素含量达到17.11mg/kg,HCO2-12处理含量为7.10mg/kg,HCO2-48处理含量为4.80mg/kg,而HCO2-24处理含量为3.45mg/kg,从试验数据可以看出,高二氧化碳处理能够控制马铃薯绿变,延长货架期;贮藏后龙葵素含量升高,而HCO2-24处理含量有所降低,但差异不显著。

关键词：马铃薯绿变龙葵素高二氧化碳

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雪莲果及其鲜切产品贮藏技术的初步研究

现代食品科技 2010年第6期26卷 585-588,584页

作者：孟卫芹王庆国山东农业大学食品科学与工程学院山东泰安271018

贮藏期间雪莲果容易裂果和腐烂。鲜切雪莲果容易腐烂,褐变也是影响其货架寿命的主要因素之一。实验研究了雪莲果块根的适宜贮藏温度及温度和包装材料对鲜切雪莲果保鲜效果的影响。结果表明:5℃是雪莲果及其鲜切产品较适宜的贮藏温度,0.0... 详细信息

贮藏期间雪莲果容易裂果和腐烂。鲜切雪莲果容易腐烂,褐变也是影响其货架寿命的主要因素之一。实验研究了雪莲果块根的适宜贮藏温度及温度和包装材料对鲜切雪莲果保鲜效果的影响。结果表明:5℃是雪莲果及其鲜切产品较适宜的贮藏温度,0.04～0.05mm厚复合袋包装鲜切雪莲果可显著抑制失水、褐变及腐烂等现象的出现,明显延长其货架期。

关键词：雪莲果鲜切保鲜技术

NaCl胁迫处理对采后马铃薯见光绿变的影响

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中国农学通报 2018年第21期34卷 29-34页

作者：董田田孟卫芹王庆国山东农业大学食品科学与工程学院山东泰安271018

为探究NaCl胁迫处理对采后马铃薯见光绿变及龙葵素生成的影响,本试验先将马铃薯块茎置于20%NaCl溶液中分别浸泡6 h和12 h,后置于光照条件下进行试验。结果表明:与见光对照相比,2个处理均显著提高了马铃薯的综合感官品质,货架期延长1倍;N... 详细信息

为探究NaCl胁迫处理对采后马铃薯见光绿变及龙葵素生成的影响,本试验先将马铃薯块茎置于20%NaCl溶液中分别浸泡6 h和12 h,后置于光照条件下进行试验。结果表明:与见光对照相比,2个处理均显著提高了马铃薯的综合感官品质,货架期延长1倍;NaCl溶液处理较好地抑制了马铃薯表皮绿变,在同一光照时间,处理马铃薯表皮a*、叶绿素含量显著低于对照组;8天货架期后,2个处理马铃薯龙葵素含量显著低于见光对照组,8天货架期间,对照龙葵素增加了122%,而NaCl处理6 h和12 h的龙葵素含量分别增加了68.86%和91.42%。因此,20%NaCl处理可有效抑制马铃薯表皮绿变和龙葵素的产生,并且20%NaCl处理对马铃薯发芽也有明显的抑制作用。

关键词：马铃薯 NaCl处理绿变控制龙葵素光照