基于P32蛋白的山羊痘病毒抗体荧光微球检测方法的建立

作     者：孟卫芹 王金良 吴信明 唐娜 李通 石竞楠 董帅 沈志强 MENG Weiqin;WANG Jinliang;WU Xinming;TANG Na;LI Tong;SHI Jingnan;DONG Shuai;SHEN Zhiqiang

作者机构：山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 青岛农业大学动物医学院山东青岛266109 内蒙古民族大学生命科学与食品学院内蒙古通辽028000 河北工程大学生命科学与食品工程学院河北邯郸056000 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2024年第56卷第4期

页      面：89-94页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：山东省羊产业技术体系岗位专家项目(SDAIT-10-07) 滨州市农社领域科技创新政策引导计划项目(2023SHFZ004) 

主　　题：山羊痘病毒 P32蛋白 荧光微球 抗体 

摘      要：为建立一种山羊痘病毒(GTPV)抗体快速检测方法,试验将携带GTPV结构蛋白P32基因的重组质粒pET28a-P32转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后获得了重组蛋白,纯化后经Western blot鉴定表明该蛋白具有良好的特异性和反应原性。以荧光微球为标记材料对P32蛋白进行标记,通过优化反应条件制备了快速检测GTPV抗体的荧光微球免疫层析试纸条,并对其性能进行评价。结果:该试纸条与山羊副流感病毒3型(CPIV3)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、羊口疮病毒(ORFV)的阳性血清均无交叉反应;阳性血清稀释至800倍仍能检出阳性,敏感性较高;批内变异系数小于10%,批间变异系数小于15%,稳定性较好;与ELISA检测方法对比的总符合率为92.5%。综上,本试验建立的荧光微球试纸条可用于GTPV抗体的快速检测和流行病学调查。