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稳定转染重组STAT3基因对喉癌Hep-2细胞侵袭性的影响

稳定转染重组STAT3基因对喉癌Hep-2细胞侵袭性的影响

作     者:孙红村 郭明丽 张建耀 

作者单位:宁波鄞州人民医院耳鼻咽喉科 

会议名称:《2014年浙江省医学会耳鼻咽喉头颈外科学学术年会》

会议日期:2014年

学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

关 键 词:喉癌 稳定转染 RNA干扰技术 STAT3 细胞侵袭 

摘      要:目的:应用RNA干扰技术沉默STAT3基因后,观察对喉Hep-2细胞粘附、迁移、侵袭能力的影响及细胞内ICAM-1和VEGF蛋白表达的改变,探讨STAT3作用于喉癌的可能侵袭机制。方法:在前期试验筛选出稳定表达si RNA-STAT3的Hep-2细胞系的基础上,本实验应用MTT、划痕法、Transwell法分别检测其粘附力、迁移力及侵袭力的变化,Western Blot检测细胞ICAM-1和VEGF蛋白的表达。结果:淤接种20分钟后各组细胞的粘附率相差不大(P=0.886),40分钟后si RNA-STAT3组的粘附率小于si RNA-sh NC组和空白对照组(P=0.02),在60分钟后粘附抑制效应更加明显(P=0.012)。于接种48小时后,空白对照组和si R原NA-sh NC组的Hep-2细胞向划痕区生长速度明显快于si RNA-STAT3组。盂接种细胞24小时后,200倍光学显微镜下显示si RNA-STAT3组穿过Matrigel基质和滤膜的细胞数明显少于空白对照组和si RNA-sh NC组。榆Western Blot结果显示si RNA-STAT3组ICAM-1和VEGF蛋白的表达量低于si RNA-sh NC组和空白对照组。结论:稳定转染重组STAT3基因能显著抑制喉癌Hep-2细胞的粘附、迁移及侵袭能力。STAT3在喉癌的侵袭中起着重要的作用,其机制可能与其能调控ICAM-1和VEGF蛋白的表达有关。

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