他巴唑对甲状腺细胞内质网应激诱导的ICAM-1、VCAM-1表达的作用

作     者：廖培芬 

作者单位：福建医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：黄惠斌

授予年度：2019年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：他巴唑 内质网应激 ICAM-1 VCAM-1 衣霉素 

摘      要：目的在细胞水平研究他巴唑对甲状腺细胞内质网应激诱导的粘附分子ICAM-1、VCAM-1表达的作用,同时探讨他巴唑对内质网应激相关蛋白的作用。方法在37℃5%CO细胞培养箱中,用T25细胞培养瓶培养人正常甲状腺细胞株(Nthy-ori-3-1),待细胞生长至对数生长期,将细胞重悬均匀后转到六孔板中继续培养,当细胞之间相互接触且融合度达到约100%时,以该甲状腺细胞株作为研究对象。用内质网应激激动剂衣霉素(Tunicamycin,TM)及抗甲状腺药物他巴唑(Methimazole,MMI)干预甲状腺细胞并分成四组,分别是对照组1(空白对照组)、对照组2(DMSO组)、衣霉素组、衣霉素+他巴唑组,置于培养箱中培养,提取各组细胞蛋白,运用Western-blot测定干预后甲状腺细胞ICAM-1、VCAM-1、PERK、IRE1、ATF6、GRP78的表达变化。结果1.衣霉素组与对照组1、对照组2的ICAM-1相对表达量分别是:0.457±0.035、0.077±0.015、0.113±0.024,衣霉素组与对照组1、对照组2的VCAM-1相对表达量分别是:0.490±0.116、0.053±0.024、0.093±0.034;衣霉素组与对照组1、对照组2的PERK相对表达量分别是:0.825±0.075、0.090±0.021、0.137±0.037,衣霉素组与对照组1、对照组2的IRE1相对表达量分别是:0.630±0.085、0.083±0.023、0.141±0.036,衣霉素组与对照组1、对照组2的ATF6相对表达量分别是:0.900±0.136、0.193±0.032、0.141±0.036,衣霉素组与对照组1、对照组2的GRP78相对表达量分别是:1.700±0.150、0.176±0.540、0.222±0.122。结果表明:(1)衣霉素组ICAM-1、VCAM-1的表达均显著高于对照组1及对照组2(p0.05)。2.衣霉素+他巴唑组与衣霉素组ICAM-1相对表达量分别是:0.180±0.017、0.387±0.041,衣霉素+他巴唑组与衣霉素组VCAM-1相对表达量分别是:0.160±0.036、0.413±0.041,衣霉素+他巴唑组与衣霉素组PERK相对表达量分别是:0.120±0.05、0.963±0.073,衣霉素+他巴唑组与衣霉素组IRE1相对表达量分别是:0.100±0.04、0.550±0.029,衣霉素+他巴唑组与衣霉素组ATF6相对表达量分别是:0.430±0.053、0.873±0.136,衣霉素+他巴唑组与衣霉素组GRP78相对表达量分别是:0.277±0.058、1.773±0.114。结果表明:(1)他巴唑+衣霉素组ICAM-1、VCAM-1表达显著低于衣霉素组(p0.05),同时他巴唑+衣霉素组内质网应激相关蛋白(PERK、ATF6、IRE1、GRP78)的表达也显著低于衣霉素组(p0.05);(2)对照组1(空白对照组)与对照组2(DMSO组)之间ICAM-1、VCAM-1、ICAM-1、VCAM-1、PERK、ATF6、IRE1、GRP78蛋白表达均无显著区别(p0.05)。1.衣霉素诱导的甲状腺细胞内质网应激促进粘附分子ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达。2.他巴唑抑制了衣霉素诱导的甲状腺细胞粘附分子ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达,同时抑制内质网应激相关蛋白PERK、ATF6、IRE1、GRP78蛋白的表达。他巴唑可能通过抑制内质网应激途径抑制粘附分子ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达。