聚合酶链反应—直接测序法快速检测结核分枝杆菌利福平耐药菌株

作     者：于保东 

作者单位：吉林大学 

学位级别：硕士

导师姓名：华树成

授予年度：2005年

学科分类：1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

主      题：聚合酶链反应 直接测序 结核分枝杆菌 耐药菌株 

摘      要：目的:了解长春市结核分枝杆菌耐RFP 菌株基因突变情况,建立快速检测结核分枝杆菌耐RFP 菌株耐药性的基因检测法,提高临床治疗耐药结核病的水平。 方法:用直接测序法(PCR-DS)分析结核分枝杆菌临床耐RFP菌株的突变基因,同时作细菌培养及药敏试验。 结果:结核分枝杆菌国际标准株及耐利福平国际标准株与临床利福平耐药株及利福平敏感株均扩得一258bp 的特异性条带。5 株RFP 敏感株测序结果与标准株相同,未发现突变位点。19 株RFP 耐药株均发现rpoB 基因突变,发生率为95%,其中531 点突变为8 例(42%),6 例为C→T 突变(Ser→Leu)。526 位点突变为8 例(42%),5 例为C→T 突变(His→Tyr)。3 株为516 位突变。1 株未发现rpoB基因突变。 结论:PCR-DS 方法是快速,精确,方便,廉价的检测结核分枝杆菌利福平耐药菌株的方法,对临床指导抗结核药物治疗有重要意义。