隐丹参酮对人非小细胞肺癌抑制作用的研究

作     者：陈靓 

作者单位：大连医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王慧玲

授予年度：2014年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：隐丹参酮 非小细胞肺癌 肿瘤抑制 细胞周期 凋亡 调控因子 

摘      要：目的：研究隐丹参酮对体外人非小细胞肺癌A549细胞模型和体内人非小细胞肺癌荷瘤小鼠成瘤模型的抑制作用。 方法：1.培养人非小细胞肺癌A549细胞，予以隐丹参酮干预，MTT法检测细胞生长情况，检测细胞集落形成情况，FCM检测细胞周期，Realtime-PCR检测相关细胞周期调控因子，以及利用Western Blot检测细胞周期相关蛋白表达及细胞凋亡调控因子。2.构建人非小细胞肺癌荷瘤小鼠模型，移植部位皮下给予隐丹参酮，检测小鼠生长及成瘤情况，并对肿瘤瘤块行免疫组化检测凋亡相关因子原位表达情况。 结果：体外人非小细胞肺癌A549细胞模型研究发现隐丹参酮能抑制肿瘤细胞增殖及细胞集落形成，阻滞肿瘤细胞生长于细胞周期G2/M期，此期的细胞周期蛋白经Western Blot方法检测提示Cyclin B1、CDK1和CDC25C表达下调、P21CIP1/WAF1表达上升，而细胞凋亡调控因子Bcl-2下降、P53和Bax上调，促使细胞发生凋亡。Realtime-PCR检测显示CCNB1(cyclin B1)、CDK1(CDC2)和CDC25C表达均下调(2倍)。体内小鼠模型研究发现隐丹参酮可减缓荷瘤小鼠体重下降，比对照组小鼠精神状态好，其瘤体生长速度减缓。病理学检测提示肿瘤异种移植呈现相对于对照组的低密度浸润，同时存在有显著无活力的肿瘤细胞。而TUNEL检测提示隐丹参酮可促进肿瘤瘤体内的凋亡小体增多。免疫组化则提示，隐丹参酮可以促进瘤体的P53， Bax，Caspase3表达而抑制Bcl2的表达。 结论：体外人非小细胞肺癌A549细胞模型及体内人非小细胞肺癌荷瘤小鼠模型实验显示，隐丹参酮能够有效抑制肿瘤细胞增殖，使细胞周期受到阻滞，促进肿瘤细胞凋亡，并可改善小鼠生存状况，减缓瘤体形成和生长，起到一定的抗肿瘤作用。