梅花入骨丹通过Toll样受体4/核转录因子-κB信号通路调节大鼠退变软骨细胞外基质代谢紊乱的作用机制

作     者：林家钟 黄艳峰 林翔 刘蔚楠 付长龙 刘献祥 王荣茂 LIN Jia-zhong;HUANG Yan-feng;LIN Xiang;LIU Wei-nan;FU Chang-long;LIU Xian-xiang;WANG Rong-mao

作者机构：福建中医药大学附属人民医院福建福州350004 福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350108 

出 版 物：《风湿病与关节炎》 (Rheumatism and Arthritis)

年 卷 期：2020年第9卷第9期

页      面：1-6,12页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：福建省教育厅科研项目(JT180221) 福建中医药大学科研平台开放课题(X2017005-平台) 

主　　题：骨关节炎 梅花入骨丹 基质金属蛋白酶 软骨细胞 Toll样受体4 核转录因子-κB 信号通路 

摘      要：目的:探讨梅花入骨丹通过Toll样受体4/核转录因子-κB(TLR4/NK-κB)信号通路调节退变软骨细胞外基质代谢紊乱的作用机制。方法:体外培养大鼠软骨细胞并鉴定,采用CCK-8法检测梅花入骨丹水提物(BCAE)对体外软骨细胞的增殖-毒性,筛选药物作用的最佳浓度和时间。采用10 ng·mL-1白细胞介素-1β(IL-1β)建立软骨细胞炎症退变模型,将软骨细胞分为空白对照组、模型对照组、BCAE组、抑制剂TAK-242组和抑制剂PDTC组,分别进行相应干预后,qRT-PCR及Western blot法检测各组基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-3、MMP-9、MMP-13、TLR4、IKKβ、IκBα、p-p65、ColⅡ的mRNA、蛋白表达情况。结果:与空白对照组比较,模型对照组MMP-1、MMP-3、MMP-9、MMP-13、TLR4、IKKβ、p-p65的mRNA及蛋白的表达明显升高(P0.01),而IκBα、ColⅡ表达下降(P0.01);与模型对照组比较,TAK-242组、PDTC组、BCAE组MMP-1、MMP-3、MMP-9、MMP-13、TLR4、IKKβ、p-p65的mRNA及蛋白的表达明显减少(P0.01),而IκBα、ColⅡ表达升高(P0.01)。结论:梅花入骨丹通过TLR4/NK-κB信号通路抑制MMPs的关键调控因子表达,从而抑制IL-1β介导的退变软骨细胞外基质代谢紊乱,发挥抗炎和保护软骨细胞的作用。